熒光壽命成像FLIM在生物學(xué)上的應(yīng)用根據(jù)熒光分子種類可以分為三種：分別為自發(fā)熒光FLIM、外源分子探針FLIM和FRET-FLIM。自發(fā)熒光FLIM被普遍應(yīng)用于非標(biāo)記生物成像領(lǐng)域。所謂自發(fā)熒光，即生物細(xì)胞本身便包含熒光分子，稱為內(nèi)源性熒光分子團(tuán)。FLIM通過(guò)對(duì)自發(fā)熒光分子團(tuán)（如NAD(P)H和FAD）熒光壽命的考察，可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞代謝的監(jiān)測(cè)。這種方案無(wú)需人為對(duì)樣品加入熒光試劑便可以發(fā)射熒光，有效減少了熒光染料對(duì)樣品的毒性、熒光分子與樣品的非特異性結(jié)合及染料對(duì)生理性能的干擾影響。熒光壽命成像（FLIM）對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)及調(diào)控，蛋白間的相互作用等生物研究發(fā)揮著很大作用。吉林單分子熒光壽命成像

熒光壽命成像顯微技術(shù)已在生命科學(xué)，臨床熒光壽命領(lǐng)域中得到了普遍的應(yīng)用。成像，擴(kuò)散光學(xué)層析成像，熒光相關(guān)光譜等等。使用我們專有的多維時(shí)間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)技術(shù)（TCSPC），我們的FLIM和TCSPC系統(tǒng)具有超高光子效率的特點(diǎn)。因此，科學(xué)家，醫(yī)生，研究人員和其他用戶能夠進(jìn)行TCSPC FLIM顯微鏡檢查，多波長(zhǎng)FLIM，同時(shí)FLIM和快速獲取FLIM。生命科學(xué)是我們熒光壽命成像顯微（FLIM）設(shè)備的主要應(yīng)用領(lǐng)域。我們的技術(shù)經(jīng)常用于以下領(lǐng)域：分子影像學(xué)、代謝成像、FRET成像、同時(shí)進(jìn)行NAD(P)H和pO2成像。江蘇開放式熒光壽命成像大概多少錢熒光壽命成像能夠靈敏地反應(yīng)熒光基團(tuán)生化特性以及周圍微環(huán)境的變化情況。

熒光壽命成像技術(shù)有兩種：時(shí)間域和頻率域。（1）時(shí)域FLIM：需要脈沖光源，所以一般在雙光子的系統(tǒng)上比較常見FLIM（熒光壽命成像Fluorescence Life-time imaging Microcopy簡(jiǎn)稱FLIM），理由一是激光是脈沖的，二是買雙光子的老師一般也搭配一個(gè)FLIM。（2）頻域FLIM：需要一個(gè)相位調(diào)制的光源，有用LED調(diào)制的。熒光壽命成像FLIM的應(yīng)用：1）細(xì)胞體自身熒光壽命分析；2）自身熒光相對(duì)熒光標(biāo)記的有效區(qū)分；3）具有相同頻譜性質(zhì)的不同熒光標(biāo)記的區(qū)分；4）活細(xì)胞內(nèi)水介質(zhì)的PH值測(cè)量；5）局部氧氣濃度測(cè)量；6）活細(xì)胞內(nèi)鈣濃度測(cè)量；7）時(shí)間分辨Forster共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）：納米級(jí)尺度上的遠(yuǎn)程測(cè)量，環(huán)境敏感的FRET探針定量測(cè)量。

熒光顯微技術(shù)具有無(wú)損、非接觸、高特異性、高靈敏、高體友好以及能夠提供功能信息等突出優(yōu)點(diǎn)，一直是生命科學(xué)，尤其是細(xì)胞生物學(xué)研究的重要工具。近年來(lái)，隨著生命科學(xué)的發(fā)展，對(duì)熒光顯微技術(shù)也提出了越來(lái)越高的要求，激光技術(shù)、熒光探針標(biāo)記技術(shù)、新型熒光探測(cè)技術(shù)和成像手段的不斷發(fā)展，極大地促進(jìn)了熒光顯微技術(shù)的發(fā)展，成為推動(dòng)生命科學(xué)發(fā)展的重要?jiǎng)恿?。此外，熒光顯微技術(shù)也在成像的對(duì)比機(jī)制方面獲得了很大的進(jìn)展。超分辨(SR)成像技術(shù)的發(fā)展，也為熒光壽命成像(FLIM)的新發(fā)展提供了巨大的機(jī)遇。熒光壽命可以在頻域或者時(shí)間域測(cè)量。

受光學(xué)衍射極限的限制，熒光顯微技術(shù)的空間分辨率只能達(dá)到200納米左右，難以滿足生命科學(xué)研究的需要。而對(duì)于熒光壽命成像來(lái)說(shuō)，其空間分辨率受衍射極限的影響尤為嚴(yán)重。熒光壽命成像是一個(gè)新興的研究領(lǐng)域，尋求具有高度原創(chuàng)性的技術(shù)原理與方案，并率先解決熒光壽命成像在生命科學(xué)應(yīng)用中存在的難題，具有重大的科學(xué)意義與應(yīng)用價(jià)值。一種熒光壽命成像方法，所述方法包括下述步驟：對(duì)標(biāo)記于樣品中的光開關(guān)染料分子進(jìn)行稀疏激勵(lì)；激發(fā)樣品中被激勵(lì)的光開關(guān)染料分子，收集被激發(fā)的光開關(guān)染料分子所發(fā)射的光子并記錄光開關(guān)染料分子的熒光圖像，對(duì)熒光圖像中的光開關(guān)染料分子進(jìn)行質(zhì)心定位；對(duì)在質(zhì)心定位處接收到的光子進(jìn)行計(jì)數(shù)，確定被激發(fā)的光開關(guān)染料分子的熒光壽命；結(jié)合得到的光開關(guān)染料分子的質(zhì)心定位結(jié)果和熒光壽命，構(gòu)建熒光壽命圖像。熒光壽命成像可以體現(xiàn)熒光物質(zhì)形貌信息。廣東熒光壽命成像費(fèi)用

熒光壽命成像不需要考慮跳色的影響，從而免去了計(jì)算和去除跳色雜質(zhì)信號(hào)的麻煩；吉林單分子熒光壽命成像

熒光壽命成像分析：熒光壽命是用于幾種生物測(cè)定的穩(wěn)健參數(shù)。它有可能替代傳統(tǒng)的測(cè)量技術(shù)，如吸收法、冷光法或熒光強(qiáng)度法3。熒光團(tuán)物理化學(xué)環(huán)境的任何變化都會(huì)導(dǎo)致熒光壽命的改變?？赏ㄟ^(guò)各種機(jī)制來(lái)研發(fā)基于壽命的分析，例如簡(jiǎn)單的結(jié)合測(cè)定，涉及到兩個(gè)組分的結(jié)合（一個(gè)被熒光標(biāo)記）而引起FLT的變化。另一種機(jī)制是猝滅釋放型測(cè)定，涉及大量過(guò)量存在的猝滅物質(zhì)，其具有低而有限的熒光。一旦熒光化合物被釋放（通過(guò)酶促反應(yīng)或與互補(bǔ)DNA結(jié)合），系統(tǒng)的壽命就會(huì)改變。FLT可與FRET（熒光共振能量轉(zhuǎn)移）分析結(jié)合用于能量轉(zhuǎn)移效率測(cè)量。吉林單分子熒光壽命成像

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