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上海顯微熒光壽命成像使用步驟

來源: 發(fā)布時間:2023-03-13

熒光壽命通常來講是一定的,不受激發(fā)光強度、熒光團濃度等因素的影響,只與熒光團所處的微環(huán)境有關,因此,利用熒光壽命顯微鏡(Fluorescence lifetime imaging microscopy, FLIM)對樣品進行熒光壽命成像,可以對樣品所在的微環(huán)境中的許多物理參數(shù)如氧壓、溶液疏水性等及生物化學參數(shù)如pH值、離子濃度等進行定量測量。此外,熒光壽命成像技術還可以同時獲得分子狀態(tài)和空間分布的信息。因此,熒光壽命成像在生物醫(yī)學領域有廣闊的應用前景。熒光壽命成像可以定量的區(qū)分參與FRET和沒有參與FRET的分子數(shù)量。上海顯微熒光壽命成像使用步驟

熒光壽命成像具有什么優(yōu)勢?熒光壽命成像的優(yōu)勢:通過熒光強度成像可以獲得熒光分子的空間分布,較為直接和簡便,但是當熒光分子具有相似的頻譜特性,或是同樣的熒光分子在不同環(huán)境下時,依賴強度進行成像的方案便無法準確反映信息。與基于光強的成像方式不同,F(xiàn)LIM成像適用于測量熒光分子環(huán)境的變化,或是測量分子的運動情況。其結(jié)果與熒光分子濃度無關,且不受影響光強的光散射或是光吸收影響,可以精確測量熒光淬滅過程,對生物分子微環(huán)境進行定量測量。湖北植物熒光壽命成像售價熒光成像技術可以實時和多維度地清晰地監(jiān)測生物分子、細胞、組織和生物生物。

熒光壽命成像不但具有其它熒光顯微鏡所具有的高靈敏度、可檢測人體生物樣品等優(yōu)點,它在監(jiān)控熒光納米材料的穩(wěn)定性上還具有以下幾個優(yōu)勢:(1)熒光壽命不受熒光探針的濃度的影響,可排除納米材料的胞吐及細胞分化導致的納米顆粒的稀釋等對測量的影響;(2)很多常見的發(fā)光材料的熒光壽命都遠遠大于細胞的自熒光的壽命,很易去除生物自熒光對熒光成像的干擾;(3)發(fā)光材料的熒光壽命和其材料的穩(wěn)定性密切相關,熒光壽命的改變可以靈敏地反映相應材料的化學穩(wěn)定性。熒光壽命成像是一種重要的熒光顯微鏡技術。

熒光壽命成像技術是如何應用在生物醫(yī)學中的?隨著近年來對蛋白及分子功能研究的不斷深入,科研工作者除對多色成像、鈣成像等功能成像的需求日漸增多之外,對熒光壽命成像的需求也逐漸增加,而熒光壽命成像能提供除熒光強度、熒光光譜信息之外的熒光分子的壽命信息,可用于分子間相互作用(FRET)、分子所處微環(huán)境的離子濃度(如Ca2+、pH)及細胞代謝水平的改變等測量,并可拆分光譜重疊的熒光染料及染料和自發(fā)熒光,還可以結(jié)合熒光相關光譜對單分子實現(xiàn)熒光壽命相關光譜FLCS的測量。熒光壽命成像擴展了傳統(tǒng)熒光成像的維度,是功能成像的理想工具,在生物醫(yī)學領域有廣闊的應用前景。熒光壽命成像技術是怎么運作的?

熒光壽命成像與傳統(tǒng)的使用熒光強度和光譜信息作為鑒別組織異常的成像方式相比,壽命成像提供了更多的生化診斷信息。熒光壽命成像已用于骨骼和牙齒的診斷。另外,采用多光子激發(fā)可顯著提高組織體的成像深度,如對人體皮膚自體熒光進行多光子激發(fā)熒光壽命成像,成像深度達200 um,組織體的熒光壽命分布揭示了細胞代謝狀態(tài)的變化,可用于對皮膚病的診斷。對腔體中瘤的早期臨床診斷,已開發(fā)出具有實時及壽命分辨功能的內(nèi)窺鏡,并對離體膀胱樣品進行測試,得到了黃素分子的自體熒光壽命圖像。影響熒光壽命成像測量的因素是什么?天津紅外熒光壽命成像怎么樣

熒光壽命成像可用于多種生物應用,包括組織表面掃描、組織類型繪圖、光動力治理、DNA芯片分析等。上海顯微熒光壽命成像使用步驟

紅外熒光壽命成像技術在生物多重檢測中的應用。相比于熒光強度,熒光壽命的數(shù)值具有很好的穩(wěn)定性,不依賴于生物組織穿透深度。因此可以實現(xiàn)生物多重成像和量化診斷。該團隊利用能量延遲方法并結(jié)合對發(fā)光離子濃度的調(diào)控,實現(xiàn)NIR-II區(qū)單一波長下熒光壽命三個量級以上的精確調(diào)節(jié)。將這種成像方法應用于乳腺的精確診斷,其對標志物的定量檢測結(jié)果與傳統(tǒng)的免疫印跡法和免疫組織化學法相比有很好的一致性。而相比于后兩者一次只能對一種標志物進行檢測,這種新的時間維度成像方法可以原位實現(xiàn)同時定量多個標記物,并且減少了傳統(tǒng)檢測方法在組織切片的制作、處理以及評分過程中所導致結(jié)果的差異性。上海顯微熒光壽命成像使用步驟

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