熒光壽命成像:熒光壽命是熒光團(tuán)在發(fā)射熒光光子返回基態(tài)之前保持其激發(fā)態(tài)的平均時(shí)間長(zhǎng)度。這取決于熒光團(tuán)的分子組成和納米環(huán)境。熒光壽命成像將壽命測(cè)量與成像相結(jié)合:對(duì)每個(gè)圖像像素以測(cè)得的熒光壽命進(jìn)行顏色編碼,產(chǎn)生額外的圖像反差。因此,熒光壽命成像可以提供關(guān)于熒光分子空間分布的信息和有關(guān)其生化狀態(tài)或納米環(huán)境的信息。有很多技術(shù)可以在顯微鏡環(huán)境中檢測(cè)熒光壽命。常見的的是基于供體(受體光漂白,F(xiàn)RET AB)或受體(敏化發(fā)射,F(xiàn)RET SE)熒光強(qiáng)度的技術(shù)。熒光壽命成像(FLIM)可用于測(cè)量分子環(huán)境參數(shù),通過(guò)熒光共振能量轉(zhuǎn)移進(jìn)行的蛋白質(zhì)相互作用。湖北顯微熒光壽命成像研發(fā)
熒光壽命成像的原理:熒光壽命是熒光團(tuán)在發(fā)射熒光光子返回基態(tài)之前保持其激發(fā)態(tài)的平均時(shí)間長(zhǎng)度。這取決于熒光團(tuán)的分子組成和納米環(huán)境。熒光壽命成像將壽命測(cè)量與成像相結(jié)合:對(duì)每個(gè)圖像像素以測(cè)得的熒光壽命進(jìn)行顏色編碼,產(chǎn)生額外的圖像反差。因此,熒光壽命成像可以提供關(guān)于熒光分子空間分布的信息和有關(guān)其生化狀態(tài)或納米環(huán)境的信息。有很多技術(shù)可以在顯微鏡環(huán)境中檢測(cè)熒光壽命。常見的的是基于供體(受體光漂白,F(xiàn)RET AB)或受體(敏化發(fā)射,F(xiàn)RET SE)熒光強(qiáng)度的技術(shù)。上海熒光壽命成像生產(chǎn)熒光的特性包含有:熒光激發(fā)和發(fā)射光譜、熒光強(qiáng)度、量子效率、熒光壽命等。
熒光壽命成像和熒光光盤有什么區(qū)別?與熒光光譜一樣,熒光壽命也是熒光物質(zhì)的一種內(nèi)在特有性質(zhì),不受熒光物質(zhì)濃度、激發(fā)光強(qiáng)度等因素的影響。熒光壽命成像能在不受熒光強(qiáng)度影響因素影響的條件下,在納米分辨率水平對(duì)蛋白互作進(jìn)行研究,或者通過(guò) FRET 探針研究分子環(huán)境變化,更重要的是其測(cè)量數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性高、易重復(fù)。通過(guò)熒光壽命成像還可以對(duì)樣本所處的微環(huán)境進(jìn)行檢測(cè)、對(duì)樣品組份進(jìn)行分離等等。在傳統(tǒng)的熒光強(qiáng)度和熒光光譜兩個(gè)維度的基礎(chǔ)上,又增加了熒光壽命這一新的成像維度,大幅度拓展了該系統(tǒng)的應(yīng)用范圍。
影響熒光壽命成像測(cè)量的因素有哪些?溫度影響:一般說(shuō)來(lái),熒光隨溫度升高而強(qiáng)度減弱,溫度升高1℃,熒光強(qiáng)度下降1~10%不等。測(cè)定時(shí),溫度必須保持恒定。PH值影響:PH 值影響物質(zhì)的熒光,應(yīng)選擇較佳PH制備樣品。光分解對(duì)熒光測(cè)定的影響: 熒光物質(zhì)吸收紫外可見光后,發(fā)生光化學(xué)反應(yīng),導(dǎo)致熒光強(qiáng)度下降。因此,熒光分析要采用高靈敏度的檢測(cè)器,而不是用增強(qiáng)光源來(lái)提高靈敏度。測(cè)定時(shí),用較窄的激發(fā)光部分的狹縫,以減弱激發(fā)光。同時(shí),用較寬的發(fā)射狹縫引導(dǎo)熒光。熒光分析應(yīng)盡量在暗環(huán)境中進(jìn)行。熒光壽命成像這種技術(shù)相對(duì)較新,涉及到同時(shí)在圖像的每個(gè)像素處確定熒光衰減時(shí)間的空間分布。影響熒光壽命成像測(cè)量的因素是什么?
熒光壽命成像具有什么優(yōu)勢(shì)?熒光壽命成像的優(yōu)勢(shì):通過(guò)熒光強(qiáng)度成像可以獲得熒光分子的空間分布,較為直接和簡(jiǎn)便,但是當(dāng)熒光分子具有相似的頻譜特性,或是同樣的熒光分子在不同環(huán)境下時(shí),依賴強(qiáng)度進(jìn)行成像的方案便無(wú)法準(zhǔn)確反映信息。與基于光強(qiáng)的成像方式不同,F(xiàn)LIM成像適用于測(cè)量熒光分子環(huán)境的變化,或是測(cè)量分子的運(yùn)動(dòng)情況。其結(jié)果與熒光分子濃度無(wú)關(guān),且不受影響光強(qiáng)的光散射或是光吸收影響,可以精確測(cè)量熒光淬滅過(guò)程,對(duì)生物分子微環(huán)境進(jìn)行定量測(cè)量。生物發(fā)光與熒光壽命成像不同點(diǎn):產(chǎn)生光子的原理不同。廣州單分子熒光壽命成像哪家靠譜
熒光壽命成像和生物發(fā)光的不同之處是什么?湖北顯微熒光壽命成像研發(fā)
熒光成像技術(shù)涉及精確測(cè)量已添加到組織中的自然熒光分子或熒光標(biāo)簽的熒光衰減率或壽命。由于壽命取決于分子環(huán)境的特性,如溫度和pH,以及其與周圍分子的相互作用,因此可利用熒光成像技術(shù)獲得有關(guān)分子性質(zhì)及其微環(huán)境的信息。通常,使用激光掃描共聚焦顯微鏡進(jìn)行熒光成像技術(shù),通過(guò)掃描激光束穿過(guò)熒光樣品以形成圖像,從而實(shí)現(xiàn)高分辨率。為了在宏觀尺度上獲得熒光成像的信息,研究人員開發(fā)了一種共焦的宏觀系統(tǒng),該系統(tǒng)結(jié)合了激光和非常短的脈沖,利用只有皮秒的長(zhǎng)度和非常靈敏的檢測(cè)器來(lái)檢測(cè)熒光。該系統(tǒng)還包括計(jì)算光子的電子器件,并繪制它們相對(duì)于激光脈沖和樣品上激光束位置的時(shí)間分布。湖北顯微熒光壽命成像研發(fā)
上海波銘科學(xué)儀器有限公司位于望園南路1288弄80號(hào)1904、1909室,是一家專業(yè)的上海波銘科學(xué)儀器有限公司是一家實(shí)力的光學(xué)儀器生產(chǎn)廠家,同時(shí)也是愛特蒙特正式代理商,主要提供光學(xué)儀器如光柵光譜儀,熒光光譜儀,膜厚測(cè)量?jī)x,探測(cè)器響應(yīng)分析儀等科研光學(xué)儀器.并且提供光學(xué)機(jī)械,電子測(cè)量解決方案,制造工藝精良,質(zhì)量可靠,性能穩(wěn)定,報(bào)價(jià)合理,售后無(wú)憂,值得信賴.公司。專業(yè)的團(tuán)隊(duì)大多數(shù)員工都有多年工作經(jīng)驗(yàn),熟悉行業(yè)專業(yè)知識(shí)技能,致力于發(fā)展愛特蒙特的品牌。我公司擁有強(qiáng)大的技術(shù)實(shí)力,多年來(lái)一直專注于上海波銘科學(xué)儀器有限公司是一家實(shí)力的光學(xué)儀器生產(chǎn)廠家,同時(shí)也是愛特蒙特正式代理商,主要提供光學(xué)儀器如光柵光譜儀,熒光光譜儀,膜厚測(cè)量?jī)x,探測(cè)器響應(yīng)分析儀等科研光學(xué)儀器.并且提供光學(xué)機(jī)械,電子測(cè)量解決方案,制造工藝精良,質(zhì)量可靠,性能穩(wěn)定,報(bào)價(jià)合理,售后無(wú)憂,值得信賴.的發(fā)展和創(chuàng)新,打造高指標(biāo)產(chǎn)品和服務(wù)。自公司成立以來(lái),一直秉承“以質(zhì)量求生存,以信譽(yù)求發(fā)展”的經(jīng)營(yíng)理念,始終堅(jiān)持以客戶的需求和滿意為重點(diǎn),為客戶提供良好的拉曼光譜儀,電動(dòng)位移臺(tái),激光器,光電探測(cè)器,從而使公司不斷發(fā)展壯大。