熒光壽命成像的原理:熒光壽命是熒光團(tuán)在發(fā)射熒光光子返回基態(tài)之前保持其激發(fā)態(tài)的平均時(shí)間長(zhǎng)度。這取決于熒光團(tuán)的分子組成和納米環(huán)境。熒光壽命成像將壽命測(cè)量與成像相結(jié)合:對(duì)每個(gè)圖像像素以測(cè)得的熒光壽命進(jìn)行顏色編碼,產(chǎn)生額外的圖像反差。因此,熒光壽命成像可以提供關(guān)于熒光分子空間分布的信息和有關(guān)其生化狀態(tài)或納米環(huán)境的信息。有很多技術(shù)可以在顯微鏡環(huán)境中檢測(cè)熒光壽命。常見(jiàn)的的是基于供體(受體光漂白,F(xiàn)RET AB)或受體(敏化發(fā)射,F(xiàn)RET SE)熒光強(qiáng)度的技術(shù)。熒光壽命不受熒光探針的濃度的影響,可排除納米材料的胞吐分化導(dǎo)致的納米顆粒的稀釋等對(duì)測(cè)量的影響。江蘇植物熒光壽命成像好不好
熒光壽命成像在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用:自發(fā)熒光FLIM被普遍應(yīng)用于非標(biāo)記生物成像領(lǐng)域。所謂自發(fā)熒光,即生物細(xì)胞本身便包含熒光分子,稱為內(nèi)源性熒光分子團(tuán)。FLIM通過(guò)對(duì)自發(fā)熒光分子團(tuán)(如NAD(P)H)熒光壽命的考察,可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞代謝的監(jiān)測(cè)。這種方案無(wú)需人為對(duì)樣品加入熒光試劑便可以發(fā)射熒光,有效減少了熒光染料對(duì)樣品的毒性、熒光分子與樣品的非特異性結(jié)合及染料對(duì)生理性能的干擾影響。外源分子探針FLIM借助于外部熒光染料的注入以產(chǎn)生熒光。如今,為了利用FLIM對(duì)物理?xiàng)l件(包括粘度、溫度、酸度和氧化作用)的敏感性,已經(jīng)開(kāi)發(fā)出了許多適用于體內(nèi)和體外應(yīng)用的光學(xué)探針。廣東單分子熒光壽命成像哪個(gè)品牌好熒光壽命成像的應(yīng)用領(lǐng)域有哪些?
為什么說(shuō)熒光壽命成像FLIM相比于熒光強(qiáng)度成像更有優(yōu)勢(shì)?通過(guò)熒光強(qiáng)度成像可以獲得熒光分子的空間分布,較為直接和簡(jiǎn)便,但是當(dāng)熒光分子具有相似的頻譜特性,或是同樣的熒光分子在不同環(huán)境下時(shí),依賴強(qiáng)度進(jìn)行成像的方案便無(wú)法準(zhǔn)確反映信息。與基于光強(qiáng)的成像方式不同,熒光壽命成像FLIM適用于測(cè)量熒光分子環(huán)境的變化,或是測(cè)量分子的運(yùn)動(dòng)情況。其結(jié)果與熒光分子濃度無(wú)關(guān),且不受影響光強(qiáng)的光散射或是光吸收影響,可以精確測(cè)量熒光淬滅過(guò)程,對(duì)生物分子微環(huán)境進(jìn)行定量測(cè)量。熒光壽命成像可以用于無(wú)法控制局部探針濃度的熒光顯微鏡中。
熒光成像技術(shù)是一種非侵入性成像方法,熒光成像技術(shù)可以實(shí)時(shí)和多維度地清晰地監(jiān)測(cè)生物分子、細(xì)胞、組織和生物生物。具有高靈敏度輸出、高時(shí)間分辨率、非侵入性和低成本。熒光成像在疾病診斷,藥物分布和代謝評(píng)估以及血管生物成像中得到了普遍的應(yīng)用。其中一些前瞻性方法在診斷和影像學(xué)引導(dǎo)療治為未來(lái)醫(yī)學(xué)發(fā)展提供更廣闊的道路。除了手術(shù)中的成像引導(dǎo),熒光成像技術(shù)還可以用于手術(shù)中神經(jīng)保護(hù),外科手術(shù)過(guò)程中神經(jīng)意外橫斷或損傷,導(dǎo)致患者部分活動(dòng)功能衰退甚至長(zhǎng)久喪失。熒光壽命成像技術(shù)是通過(guò)建立檢測(cè)到的熒光事件的直方圖來(lái)確定壽命。
熒光壽命顯微成像(Fluorescence lifetime imaging microscopy,FLIM)是熒光壽命測(cè)量和熒光顯微技術(shù)的結(jié)合,熒光壽命顯微成像具有高特異性、高靈敏度、可定量測(cè)量微環(huán)境變化和分子間相互作用、不受探針濃度、激發(fā)光強(qiáng)度和光漂白影響等優(yōu)點(diǎn)。熒光壽命成像(FLIM)對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)及調(diào)控,蛋白間的相互作用等生物研究發(fā)揮著很大作用。利用熒光壽命成像顯微鏡技術(shù)可實(shí)現(xiàn)可以實(shí)時(shí)監(jiān)控發(fā)光納米顆粒在活細(xì)胞內(nèi)的穩(wěn)定性。在過(guò)去的十年中,光學(xué)技術(shù)硬件和軟件、材料科學(xué)和生物醫(yī)學(xué)的迅速發(fā)展,共同促進(jìn)了FLIM技術(shù)及其應(yīng)用的巨大進(jìn)步。熒光壽命成像能夠?qū)Σ煌N類或處于不同狀態(tài)的生物組織提供更好的對(duì)比度。動(dòng)物熒光壽命成像批發(fā)
影響熒光壽命成像測(cè)量的因素是什么?江蘇植物熒光壽命成像好不好
熒光壽命成像:熒光壽命是熒光團(tuán)在發(fā)射熒光光子返回基態(tài)之前保持其激發(fā)態(tài)的平均時(shí)間長(zhǎng)度。這取決于熒光團(tuán)的分子組成和納米環(huán)境。熒光壽命成像將壽命測(cè)量與成像相結(jié)合:對(duì)每個(gè)圖像像素以測(cè)得的熒光壽命進(jìn)行顏色編碼,產(chǎn)生額外的圖像反差。因此,熒光壽命成像可以提供關(guān)于熒光分子空間分布的信息和有關(guān)其生化狀態(tài)或納米環(huán)境的信息。有很多技術(shù)可以在顯微鏡環(huán)境中檢測(cè)熒光壽命。常見(jiàn)的的是基于供體(受體光漂白,F(xiàn)RET AB)或受體(敏化發(fā)射,F(xiàn)RET SE)熒光強(qiáng)度的技術(shù)。江蘇植物熒光壽命成像好不好
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