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天津紅外熒光壽命成像批發(fā)

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-03-02

影響熒光壽命成像測(cè)量的因素:高濃度樣品的影響:1)當(dāng)激發(fā)光照射高濃度樣品時(shí),在激發(fā)光入口附近產(chǎn)生熒光,但這些熒光并不能進(jìn)入熒光檢測(cè)器。2)高濃度的分子之間相互作用而發(fā)生活性阻礙現(xiàn)象。3)熒光的再吸收:即熒光光譜的短波長端和激發(fā)光譜的長波長端如果相互重疊,則發(fā)生熒光再吸收。熒光壽命成像具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級(jí)的時(shí)間分辨率。散射光的影響: 主要是瑞利散射光和拉曼散射光的影響較大。校正辦法:先用短的激發(fā)光激發(fā),檢出溶液的拉曼峰,然后進(jìn)行熒光光譜校正。因?yàn)闊晒夤庾V不隨激發(fā)光波長的改變而改變,而拉曼光卻隨之改變。熒光壽命成像的優(yōu)勢(shì)是什么?天津紅外熒光壽命成像批發(fā)

熒光壽命成像的優(yōu)勢(shì)是什么?熒光壽命成像具有不同于熒光強(qiáng)度成像的眾多優(yōu)點(diǎn);不需要考慮跳色的影響,從而免去了計(jì)算和去除跳色雜質(zhì)信號(hào)的麻煩;去除跳色雜質(zhì)的準(zhǔn)確性很大程度上依賴于信噪比、成像流程的設(shè)計(jì)和控制、以及跳色信號(hào)估算的算法,這些因素使得通過穩(wěn)態(tài)光強(qiáng)度測(cè)量熒光壽命成像的精確度在很多時(shí)候受到質(zhì)疑。穩(wěn)態(tài)光強(qiáng)度的熒光壽命成像測(cè)量很容易受熒光標(biāo)記光漂白或是激發(fā)光散射背景的影響,而這些因素對(duì)FLIM-FRET的測(cè)量影響相對(duì)較低。熒光壽命成像可以定量的區(qū)分參與FRET和沒有參與FRET的分子數(shù)量,這樣深入的定量分析是穩(wěn)態(tài)光強(qiáng)度方法做不到的。江蘇分子熒光壽命成像哪家靠譜影響熒光壽命成像測(cè)量的因素有哪些?

熒光壽命成像與傳統(tǒng)的使用熒光強(qiáng)度和光譜信息作為鑒別組織異常的成像方式相比,壽命成像提供了更多的生化診斷信息。熒光壽命成像已用于骨骼和牙齒的診斷。另外,采用多光子激發(fā)可顯著提高組織體的成像深度,如對(duì)人體皮膚自體熒光進(jìn)行多光子激發(fā)熒光壽命成像,成像深度達(dá)200 um,組織體的熒光壽命分布揭示了細(xì)胞代謝狀態(tài)的變化,可用于對(duì)皮膚病的診斷。對(duì)腔體中瘤的早期臨床診斷,已開發(fā)出具有實(shí)時(shí)及壽命分辨功能的內(nèi)窺鏡,并對(duì)離體膀胱樣品進(jìn)行測(cè)試,得到了黃素分子的自體熒光壽命圖像。

分子的熒光壽命在幾納秒至幾百納秒之間,因此,測(cè)量熒光壽命成像需要極快響應(yīng)時(shí)間的探測(cè)器。如今主要存在兩類方案:一是時(shí)域測(cè)量,由一束窄脈沖將熒光分子激發(fā)至較高能態(tài)S1,接著測(cè)量熒光的發(fā)射幾率隨時(shí)間的變化。典型的時(shí)域測(cè)量方法有TCSPC和時(shí)間門(TG)兩種。TCSPC利用快速秒表測(cè)量激發(fā)脈沖與探測(cè)熒光之間的時(shí)間差。使用高重復(fù)脈沖激發(fā)光激發(fā)樣品,在每一個(gè)脈沖周期內(nèi),較多激發(fā)熒光分子發(fā)出一個(gè)光子,然后記錄光子出現(xiàn)的時(shí)刻,并在該時(shí)刻記錄一個(gè)光子,再下一個(gè)脈沖周期內(nèi)也是相同的情況,經(jīng)過多次計(jì)數(shù)可以得到熒光光子隨時(shí)間的分布曲線。相似的,TG則探測(cè)不同時(shí)間窗口內(nèi)的熒光強(qiáng)度,通過曲線擬合得到熒光壽命。二是頻域測(cè)量,對(duì)連續(xù)激發(fā)光進(jìn)行振幅調(diào)制后,分子發(fā)出的熒光強(qiáng)度也會(huì)受到振幅調(diào)制,兩個(gè)調(diào)制信號(hào)之間存在與熒光壽命相關(guān)的相位差,因此可以測(cè)量該相位差計(jì)算熒光壽命。熒光壽命成像可用于對(duì)皮膚病的診斷,對(duì)腔體病癥早期的臨床診斷。

熒光壽命成像如何理解?熒光壽命成像主要通過TCSPC技術(shù)(Time-Correlated Single Photon Counting)實(shí)現(xiàn)。系統(tǒng)采用超短脈寬激光器作為激發(fā)光源,通過光路耦合器,將激光引入顯微光路。激光通過物鏡聚焦照射樣品池,利用光子探測(cè)裝置(PMT)對(duì)熒光信號(hào)進(jìn)行探測(cè),再用TCSPC計(jì)數(shù)器對(duì)每一個(gè)光子進(jìn)行計(jì)數(shù),并將其放入一個(gè)對(duì)應(yīng)的時(shí)間窗口,經(jīng)過一定時(shí)間的統(tǒng)計(jì)疊加后即得到熒光壽命曲線。幾十萬次重復(fù)以后,不同的時(shí)間通道累積下來的光子數(shù)目不同。以光子數(shù)對(duì)時(shí)間作圖可得到熒光衰減曲線。實(shí)現(xiàn)從百ps-ns-us的瞬態(tài)測(cè)試。綜上所述由于TCSPC系統(tǒng),一個(gè)激光脈沖只采集一個(gè)光子信號(hào),所以激光器的重復(fù)頻率決定了系統(tǒng)的數(shù)據(jù)采集速度。重頻越高,采集速度越快,數(shù)據(jù)信噪比越好。熒光壽命成像擁有超快的激光技術(shù),高速、高靈敏度探測(cè)技術(shù)。安徽分子熒光壽命成像

熒光壽命成像能夠?qū)Σ煌N類或處于不同狀態(tài)的生物組織提供更好的對(duì)比度。天津紅外熒光壽命成像批發(fā)

熒光壽命成像有什么作用?熒光壽命可以在頻域或者時(shí)間域測(cè)量。時(shí)間域測(cè)量方法涉及用短光脈沖照射樣品(比色皿、細(xì)胞或組織),然后隨時(shí)間測(cè)量發(fā)射強(qiáng)度。FLT由衰減曲線的斜率確定。有幾種熒光檢測(cè)方法可用于壽命測(cè)量,其中時(shí)間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)(TCSPC)可實(shí)現(xiàn)簡單的數(shù)據(jù)收集和增強(qiáng)的定量光子計(jì)數(shù)。頻域方法涉及高頻率入射光的正弦調(diào)制。在該方法中,發(fā)射發(fā)生在與入射光相同的頻率處,并且隨著激發(fā)光兼有相位延遲和振幅的變化(解調(diào))。壽命測(cè)量不需要波長比率探針來提供眾多分析物的定量測(cè)定。壽命法通過使用光譜位移探針擴(kuò)展了分析物濃度范圍的靈敏度。天津紅外熒光壽命成像批發(fā)

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