熒光壽命成像有什么作用?熒光壽命可以在頻域或者時間域測量。時間域測量方法涉及用短光脈沖照射樣品(比色皿、細胞或組織),然后隨時間測量發(fā)射強度。FLT由衰減曲線的斜率確定。有幾種熒光檢測方法可用于壽命測量,其中時間相關(guān)單光子計數(shù)(TCSPC)可實現(xiàn)簡單的數(shù)據(jù)收集和增強的定量光子計數(shù)。頻域方法涉及高頻率入射光的正弦調(diào)制。在該方法中,發(fā)射發(fā)生在與入射光相同的頻率處,并且隨著激發(fā)光兼有相位延遲和振幅的變化(解調(diào))。壽命測量不需要波長比率探針來提供眾多分析物的定量測定。壽命法通過使用光譜位移探針擴展了分析物濃度范圍的靈敏度。熒光壽命成像這種技術(shù)相對較新,涉及到同時在圖像的每個像素處確定熒光衰減時間的空間分布。重慶開放式熒光壽命成像哪家便宜
熒光壽命成像如何理解?熒光壽命成像主要通過TCSPC技術(shù)(Time-Correlated Single Photon Counting)實現(xiàn)。系統(tǒng)采用超短脈寬激光器作為激發(fā)光源,通過光路耦合器,將激光引入顯微光路。激光通過物鏡聚焦照射樣品池,利用光子探測裝置(PMT)對熒光信號進行探測,再用TCSPC計數(shù)器對每一個光子進行計數(shù),并將其放入一個對應(yīng)的時間窗口,經(jīng)過一定時間的統(tǒng)計疊加后即得到熒光壽命曲線。幾十萬次重復以后,不同的時間通道累積下來的光子數(shù)目不同。以光子數(shù)對時間作圖可得到熒光衰減曲線。實現(xiàn)從百ps-ns-us的瞬態(tài)測試。綜上所述由于TCSPC系統(tǒng),一個激光脈沖只采集一個光子信號,所以激光器的重復頻率決定了系統(tǒng)的數(shù)據(jù)采集速度。重頻越高,采集速度越快,數(shù)據(jù)信噪比越好。遼寧紅外熒光壽命成像供貨商熒光壽命成像特別適用于新材料、光子學、光伏、光催化、生物材料的原理探究和設(shè)計優(yōu)化。
熒光壽命成像和熒光光盤有什么區(qū)別?與熒光光譜一樣,熒光壽命也是熒光物質(zhì)的一種內(nèi)在特有性質(zhì),不受熒光物質(zhì)濃度、激發(fā)光強度等因素的影響。熒光壽命成像能在不受熒光強度影響因素影響的條件下,在納米分辨率水平對蛋白互作進行研究,或者通過 FRET 探針研究分子環(huán)境變化,更重要的是其測量數(shù)據(jù)準確性高、易重復。通過熒光壽命成像還可以對樣本所處的微環(huán)境進行檢測、對樣品組份進行分離等等。在傳統(tǒng)的熒光強度和熒光光譜兩個維度的基礎(chǔ)上,又增加了熒光壽命這一新的成像維度,大幅度拓展了該系統(tǒng)的應(yīng)用范圍。
為什么說熒光壽命成像技術(shù)是先進的?熒光壽命成像可以提供熒光強度(光子數(shù))和光子壽命的空間分布,具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。通過雙光子激發(fā)(結(jié)合飛秒脈沖和共焦顯微鏡)可以直接檢測熒光和時間分辨的熒光壽命。這種無損檢測技術(shù),無需解剖或?qū)iT制造分層樣品,不但可在樣品表面,還可在樣品表面以下實現(xiàn)深度解析測量。特別適用于新材料、光子學、光伏、光催化、生物材料、納米材料和納米復合材料以及其相關(guān)的原理探究和設(shè)計優(yōu)化。測量熒光壽命需要極快響應(yīng)時間的探測器。
熒光壽命成像具有什么優(yōu)勢?熒光壽命成像的優(yōu)勢:通過熒光強度成像可以獲得熒光分子的空間分布,較為直接和簡便,但是當熒光分子具有相似的頻譜特性,或是同樣的熒光分子在不同環(huán)境下時,依賴強度進行成像的方案便無法準確反映信息。與基于光強的成像方式不同,F(xiàn)LIM成像適用于測量熒光分子環(huán)境的變化,或是測量分子的運動情況。其結(jié)果與熒光分子濃度無關(guān),且不受影響光強的光散射或是光吸收影響,可以精確測量熒光淬滅過程,對生物分子微環(huán)境進行定量測量。影響熒光壽命成像測量的因素:高濃度樣品,高濃度的分子之間相互作用而發(fā)生活性阻礙現(xiàn)象。深圳顯微熒光壽命成像怎么用
生物發(fā)光與熒光成像相同點是都需要對細胞進行標記。重慶開放式熒光壽命成像哪家便宜
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