熒光壽命成像（FLIM）的方法特別適合于體內(nèi)診斷，因?yàn)樗鼈兪菬o(wú)創(chuàng)且無(wú)損的。因此，它們被普遍用于受試者的臨床研究和醫(yī)學(xué)檢查。例如，該技術(shù)可以用于以下領(lǐng)域：皮膚的體內(nèi)診斷：人類(lèi)皮膚的多光子擴(kuò)散層析成像結(jié)合了雙光子激發(fā)和非解掃檢測(cè)，因此，多光子FLIM可以提供組織層的光學(xué)切片圖像，深度可達(dá)100 μm。人皮膚細(xì)胞的體內(nèi)雙光子成像是可能的，而不會(huì)損害組織的活力，可以從亞細(xì)胞分辨率重建三維結(jié)構(gòu)。眼科檢查：眼科FLIM結(jié)合了快速光束掃描和皮秒二極管激光器激發(fā)的功能。該方法非常靈敏，可以記錄人眼眼底（背景）的壽命圖像。通過(guò)這種方式，有可能及早發(fā)現(xiàn)眼部疾病，因?yàn)檫@些疾病通常伴隨著眼底的代謝變化。反過(guò)來(lái)，這些引起內(nèi)源性熒光團(tuán)的熒光衰減參數(shù)的變化。不同熒光基團(tuán)激發(fā)態(tài)停時(shí)間不同，大多數(shù)生物熒光素的熒光壽命時(shí)間在 0.2 - 20 ns。重慶生物熒光壽命成像哪里有賣(mài)

影響熒光壽命成像測(cè)量的因素有哪些？散射光的影響： 主要是瑞利散射光和拉曼散射光的影響較大。校正辦法：先用短的激發(fā)光激發(fā)，檢出溶液的拉曼峰，然后進(jìn)行熒光光譜校正。因?yàn)闊晒夤庾V不隨激發(fā)光波長(zhǎng)的改變而改變，而拉曼光卻隨之改變。高濃度樣品的影響：1）當(dāng)激發(fā)光照射高濃度樣品時(shí)，在激發(fā)光入口附近產(chǎn)生熒光，但這些熒光并不能進(jìn)入熒光檢測(cè)器。2）高濃度的分子之間相互作用而發(fā)生活性阻礙現(xiàn)象。3）熒光的再吸收：即熒光光譜的短波長(zhǎng)端和激發(fā)光譜的長(zhǎng)波長(zhǎng)端如果相互重疊，則發(fā)生熒光再吸收。重慶生物熒光壽命成像怎么操作熒光壽命成像能夠靈敏地反應(yīng)熒光基團(tuán)生化特性以及周?chē)h(huán)境的變化情況。

熒光壽命是熒光團(tuán)在發(fā)射熒光光子返回基態(tài)之前保持其激發(fā)態(tài)的平均時(shí)間長(zhǎng)度。這取決于熒光團(tuán)的分子組成和納米環(huán)境。熒光壽命成像將壽命測(cè)量與成像相結(jié)合：對(duì)每個(gè)圖像像素以測(cè)得的熒光壽命進(jìn)行顏色編碼，產(chǎn)生額外的圖像反差。因此，熒光壽命成像可以提供關(guān)于熒光分子空間分布的信息和有關(guān)其生化狀態(tài)或納米環(huán)境的信息。有很多技術(shù)可以在顯微鏡環(huán)境中檢測(cè)熒光壽命。常見(jiàn)的的是基于供體（受體光漂白，F(xiàn)RET AB）或受體（敏化發(fā)射，F(xiàn)RET SE）熒光強(qiáng)度的技術(shù)。

熒光壽命成像 (FLIM)通過(guò)建立檢測(cè)到的熒光事件的直方圖來(lái)確定壽命。可顯示單指數(shù)或多指數(shù)熒光衰減。數(shù)值曲線(xiàn)擬合表示熒光壽命和振幅（即檢測(cè)到的光子數(shù)）。由于FRET減少了供體壽命，因此如果無(wú)FRET的供體壽命已知，就可以量化FRET發(fā)生的程度。該供體壽命τ作為分析FRET樣品的一定參考。因此，F(xiàn)LIM-FRET為內(nèi)部參照—這一特點(diǎn)減少了基于強(qiáng)度測(cè)量FRET時(shí)的很多缺點(diǎn)。由于其熒光壽命是染料的固有特性，因此對(duì)其他不利影響（如光漂白、圖像明暗處理、不同濃度或表達(dá)水平）具有普遍的不變性。使用基于強(qiáng)度的FRET測(cè)量的主要限制是所有可觀(guān)察的供體分子都經(jīng)歷FRET的基本假設(shè)。通常情況并非如此。供體分子這種變化的“非結(jié)合”組分給測(cè)量的FRET效率帶來(lái)了相當(dāng)大的不確定性，使得無(wú)法在實(shí)驗(yàn)之間進(jìn)行比較。熒光壽命成像克服了這一缺點(diǎn)。由于熒光壽命成像不受樣品濃度影響，具有其他熒光成像技術(shù)無(wú)法代替的優(yōu)異性能。

熒光壽命成像系統(tǒng)是一種用于化學(xué)領(lǐng)域的分析儀器，熒光壽命成像可以在體現(xiàn)熒光物質(zhì)形貌信息之外，還能夠靈敏地反應(yīng)熒光基團(tuán)生化特性以及周?chē)h(huán)境的變化情況。將熒光壽命成像與共聚焦成像技術(shù)結(jié)合起來(lái)，實(shí)現(xiàn)人體三維熒光壽命成像，進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)人體三維功能成像奠定基礎(chǔ)，有潛力應(yīng)用于瘤識(shí)別，病變?cè)\斷等領(lǐng)域。熒光壽命是熒光基團(tuán)在通過(guò)發(fā)射熒光光子返回基態(tài)之前在其激發(fā)態(tài)下保持平均多長(zhǎng)時(shí)間的量度。不同熒光基團(tuán)激發(fā)態(tài)停時(shí)間不同，大多數(shù)生物熒光素的熒光壽命時(shí)間在 0.2 - 20 ns。熒光壽命檢測(cè)經(jīng)典方法為點(diǎn)對(duì)點(diǎn)的時(shí)間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)（TCSPC），但由于過(guò)去檢測(cè)硬件的局限和復(fù)雜的使用而沒(méi)有被普遍地應(yīng)用于科學(xué)研究。隨著技術(shù)的發(fā)展，在顯微鏡視野內(nèi)進(jìn)行超快速全像素?zé)晒鈮勖盘?hào)采集的熒光壽命成像成為可能。熒光壽命成像已用于骨骼和牙齒的診斷。重慶生物熒光壽命成像怎么操作

熒光壽命成像不需要考慮跳色的影響，從而免去了計(jì)算和去除跳色雜質(zhì)信號(hào)的麻煩；重慶生物熒光壽命成像哪里有賣(mài)

熒光壽命(FLT)是熒光團(tuán)在發(fā)射光子并返回基態(tài)之前花費(fèi)在激發(fā)態(tài)的時(shí)間。根據(jù)熒光基團(tuán)的不同，F(xiàn)LT可以從皮秒到數(shù)百納秒不等。熒光團(tuán)群的壽命是指經(jīng)熒光或非輻射過(guò)程的能量損失后，激發(fā)態(tài)分子數(shù)量以指數(shù)方式衰減到原始數(shù)量的N / e（36.8％）的時(shí)間。熒光壽命是熒光團(tuán)的固有屬性。FLT不依賴(lài)于熒光團(tuán)濃度、樣品吸收、樣品厚度、測(cè)量方法、熒光強(qiáng)度、光漂白和/或激發(fā)強(qiáng)度。它受外部因素影響，如溫度、極性和熒光淬滅劑的存在。熒光壽命對(duì)依賴(lài)于熒光團(tuán)結(jié)構(gòu)的內(nèi)部因素敏感。重慶生物熒光壽命成像哪里有賣(mài)

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