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熒光壽命成像顯微術(shù)(FLIM)是一種利用熒光染料固有特性的成像技術(shù)。除了具有特有的發(fā)射光譜外,每個(gè)熒光分子還有特有的壽命,它反映了熒光基團(tuán)在發(fā)射光子之前處于激發(fā)態(tài)的時(shí)間。除了標(biāo)準(zhǔn)的熒光強(qiáng)度測量外,壽命分析還可以提供其他信息。過去,壽命成像一直是一種緩慢、復(fù)雜的專業(yè)化技術(shù)。只有經(jīng)驗(yàn)豐富的顯微鏡**或物理學(xué)家才會(huì)使用這種技術(shù)。熒光壽命成像提供了額外的信息,有助提高共聚焦成像的質(zhì)量。它非常適合用于區(qū)分熒光發(fā)射光譜重疊的熒光探針,或消除不需要的背景熒光信號(hào)。在種類繁多的顯微技術(shù)中,熒光壽命顯微成像技術(shù)被普遍地應(yīng)用于生物學(xué)研究及臨床診斷等領(lǐng)域。深圳化學(xué)熒光壽命成像供貨商
典型的熒光壽命成像包括從感興趣區(qū)域(ROI)的共焦圖像中提取1-,2-或3-衰減時(shí)間。限制熒光團(tuán)的衰減速率可能是任意的,而且很復(fù)雜,因?yàn)樵诩?xì)胞環(huán)境中存在幾種衰減速率。對(duì)于相量圖,關(guān)于選擇哪種衰減模型以及評(píng)估擬合優(yōu)度的挑戰(zhàn)性決定已成為過去。在相量圖中,所有原始FLIM數(shù)據(jù)在向量空間中均表示為相位和幅度。圖像中的每個(gè)像素都轉(zhuǎn)換為相量圖中的一個(gè)點(diǎn)。單獨(dú)于其在圖像中的位置,具有相似衰減特征的像素在相量圖中形成群集??梢栽诖岁嚵兄羞x擇不同的相量簇,并在標(biāo)注中反向注釋對(duì)應(yīng)的像素。北京植物熒光壽命成像售價(jià)熒光壽命檢測經(jīng)典方法為點(diǎn)對(duì)點(diǎn)的時(shí)間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)(TCSPC)。
熒光壽命成像顯微技術(shù)已在生命科學(xué),臨床熒光壽命領(lǐng)域中得到了普遍的應(yīng)用。成像,擴(kuò)散光學(xué)層析成像,熒光相關(guān)光譜等等。使用我們專有的多維時(shí)間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)技術(shù)(TCSPC),我們的FLIM和TCSPC系統(tǒng)具有超高光子效率的特點(diǎn)。因此,科學(xué)家,醫(yī)生,研究人員和其他用戶能夠進(jìn)行TCSPC FLIM顯微鏡檢查,多波長FLIM,同時(shí)FLIM和快速獲取FLIM。生命科學(xué)是我們熒光壽命成像顯微(FLIM)設(shè)備的主要應(yīng)用領(lǐng)域。我們的技術(shù)經(jīng)常用于以下領(lǐng)域:分子影像學(xué)、代謝成像、FRET成像、同時(shí)進(jìn)行NAD(P)H和pO2成像。
熒光壽命成像FLIM相比于熒光強(qiáng)度成像更有優(yōu)勢。通過熒光強(qiáng)度成像可以獲得熒光分子的空間分布,較為直接和簡便,但是當(dāng)熒光分子具有相似的頻譜特性,或是同樣的熒光分子在不同環(huán)境下時(shí),依賴強(qiáng)度進(jìn)行成像的方案便無法準(zhǔn)確反映信息。與基于光強(qiáng)的成像方式不同,熒光壽命成像FLIM適用于測量熒光分子環(huán)境的變化,或是測量分子的運(yùn)動(dòng)情況。其結(jié)果與熒光分子濃度無關(guān),且不受影響光強(qiáng)的光散射或是光吸收影響,可以精確測量熒光淬滅過程,對(duì)生物分子微環(huán)境進(jìn)行定量測量。熒光壽命成像通常用于研究生物分子間相互作用、細(xì)胞中的信號(hào)事件或區(qū)分光譜重疊的熒光團(tuán)。
熒光壽命成像有幾點(diǎn)優(yōu)勢:1.不需要考慮跳色的影響,從而免去了計(jì)算和去除跳色雜質(zhì)信號(hào)的麻煩;去除跳色雜質(zhì)的準(zhǔn)確性很大程度上依賴于信噪比、成像流程的設(shè)計(jì)和控制、以及跳色信號(hào)估算的算法,這些因素使得通過穩(wěn)態(tài)光強(qiáng)度測量熒光壽命成像的精確度在很多時(shí)候受到質(zhì)疑。2.穩(wěn)態(tài)光強(qiáng)度的熒光壽命成像測量很容易受熒光標(biāo)記光漂白或是激發(fā)光散射背景的影響,而這些因素對(duì)FLIM-FRET的測量影響相對(duì)較低。3.熒光壽命成像可以定量的區(qū)分參與FRET和沒有參與FRET的分子數(shù)量,這樣深入的定量分析是穩(wěn)態(tài)光強(qiáng)度方法做不到的。不同熒光基團(tuán)激發(fā)態(tài)停時(shí)間不同,大多數(shù)生物熒光素的熒光壽命時(shí)間在 0.2 - 20 ns。廣州熒光壽命成像怎么操作
熒光壽命成像(FLIM)可用于測量分子環(huán)境參數(shù)。深圳化學(xué)熒光壽命成像供貨商
在種類繁多的顯微技術(shù)中,熒光壽命顯微成像技術(shù)(FLIM)具有對(duì)生物大分子結(jié)構(gòu)、動(dòng)力學(xué)信息和分子環(huán)境等進(jìn)行高分辨高精度測量的能力,因此其重要性日漸提升,被普遍地應(yīng)用于生物學(xué)研究及臨床診斷等領(lǐng)域。熒光的特性包含有:熒光激發(fā)和發(fā)射光譜、熒光強(qiáng)度、量子效率、熒光壽命等,其中,熒光壽命是指熒光分子在激發(fā)態(tài)上存在的平均時(shí)間(納秒量級(jí))。分子的熒光壽命在幾納秒至幾百納秒之間,因此,測量熒光壽命需要極快響應(yīng)時(shí)間的探測器。熒光壽命成像的發(fā)展很好地彌補(bǔ)了基于強(qiáng)度成像的問題,對(duì)生物醫(yī)學(xué)檢測有著重要的意義。深圳化學(xué)熒光壽命成像供貨商
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