技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法和應(yīng)用，采用該構(gòu)建方法可以得到視網(wǎng)膜色素變性疾病模型，該模型可表現(xiàn)出視網(wǎng)膜色素變性性疾病特征，該模型可用于視網(wǎng)膜色素變性性疾病的研究，可以幫助闡明rp的發(fā)病過(guò)程及機(jī)制，并為該疾病的或預(yù)防提供新的靶標(biāo)。本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的：方面，本發(fā)明實(shí)施例提供了一種利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法，其包括：敲除目標(biāo)動(dòng)物視網(wǎng)膜前體細(xì)胞中的基因組中的gm20541基因。znf124是一種編碼鋅指蛋白的新基因。鋅指蛋白是一類具有手指狀結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子，對(duì)基因調(diào)控起重要的作用。znf124蛋白可穿過(guò)核孔進(jìn)入核內(nèi)，作為轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控其他基因的表達(dá)。目前針對(duì)znf124蛋白功能的研究報(bào)道并不多，對(duì)其功能也知之甚少，znf124與一種先天性系統(tǒng)發(fā)育疾病dandy-walker復(fù)合征(dandy-walkercomplex，dwc)相關(guān)。此外，znf124被認(rèn)為參與了前體生長(zhǎng)因子(vegf)對(duì)人造血細(xì)胞凋亡的抑制作用，表明znf124在人體生命活動(dòng)中承擔(dān)有重要功能。發(fā)明人的另一研究表明，znf124基因突變與rp有關(guān)，對(duì)探索rp的致病機(jī)制有極大幫助。因此，深入研究znf124對(duì)視網(wǎng)膜色素變性疾病的及病因探討潛力巨大。臨床上平時(shí)不易見(jiàn)到的疾病可用動(dòng)物隨時(shí)復(fù)制出來(lái)。江蘇小鼠動(dòng)物模型造模

    40mmnaoh，)，并在金屬浴100℃加熱1h；(3)取出離心管，冷卻至室溫后，加入100μl的中和液(40mmtris-hcl，)，10000g離心2min后，取上清用于小鼠基因型鑒定。(3)pcr擴(kuò)增：按照如系配置pcr反應(yīng)體系2×taqmix：10μl尾巴組織裂解液：2μl引物1(gm20541-loxp-forward或six3-cre-forward)：1μl(濃度：10mm)引物2(gm20541-loxp-reverse或six3-cre-reverse)：1μl(濃度：10mm)ddh2o：6μl。引物序列如下：gm20541-loxp-forward序列：5’-attccccttcaagatagctac-3’；gm20541-loxp-reverse序列：5’-aatgatcaactgtaattcccc-3’；six3-cre-forward序列：5’-gccgccgggatcactctcg-3’；six3-cre-reverse序列：5’-ccagccgccgtcgcaactc-3’。擴(kuò)增程序：pcr反應(yīng)體系配制完后，在pcr儀上于95℃預(yù)加熱5分鐘使模板dna充分變性，然后進(jìn)入擴(kuò)增循環(huán)。在每一個(gè)循環(huán)中，先于95℃保持30秒鐘使模板變性，然后將溫度降到復(fù)性溫度58℃，保持30秒，使引物與模板充分退火；在72℃保持30秒，使引物在模板上延伸，合成dna，完成一個(gè)循環(huán)。重復(fù)這樣的循環(huán)25次，使擴(kuò)增的dn段大量累積。，在72℃保持5分鐘，使產(chǎn)物延伸完整，4℃保存。(4)凝膠電泳稱取1g瓊脂糖放于100mltaebuffer中。上海模式動(dòng)物模型手術(shù)可以嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)材料的可比性。

    gaaaccctatgaatgtaaccaatgtgg660taaagcctttgcatattccaacagtctccaaatacatcaaagaacacacactggagagaa720accctatgaatgtaaccagtgtggtaaagcctttgcatatcacaatagtctccaaataca780taaaagtacacacactggagagaaaccctataaatgtaaccagtgtggtaaagcctttgc840atatcacattactctccgaacacataaaggaacacacactgaagagaaaccctatgaatg900taaccaatgtggtaaagcctttgcatattccaacagtctccaaatacatcaaagaacaca960cactggagagaaaccctatgaatgtaaccagtgtggtaaagcctttgcatatcacaatag1020tctccaaatacataaaagtacacacactggagagaaaccctatgaatgtaaccagtgtgg1080taaagcctttgtatgtagcagtcattttcaaaggcataaaaaaattcatactggagagaa1140accctatgattgtaaccagtgtggtaaagcctttgcatataaaagtaatctccaaattca1200tgaaagaaaacacactggagggaaaccctctgaatgtaattaatgtagtaaagcttttgc1260atttcataatagtttccaaatacataaaagaacacatagtgagagaaaccctatgaatat1320aaccaatgtggtaaaacatttccatatctcagtggtctccgcatttataacagaacacat1380agtggagagaaaccctatggatgtaa1406。

    疾病神經(jīng)系統(tǒng)疾病模型動(dòng)物抗抑郁對(duì)腦突觸體攝取5-HT、NA、DA的抑制作用（樣品篩選、IC50測(cè)定）大鼠強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)（大/小鼠，Noduls軟件、視屏分析）大/小鼠小鼠懸尾試驗(yàn)（Noduls軟件、視屏分析）小鼠5-羥色胺增強(qiáng)試驗(yàn)小鼠利血平誘導(dǎo)眼瞼下垂試驗(yàn)小鼠育亨賓毒性增強(qiáng)試驗(yàn)小鼠高劑量阿撲拮抗小鼠大鼠慢性輕度不可預(yù)見(jiàn)性刺激（CUMS）模型大鼠新環(huán)境進(jìn)食抑制實(shí)驗(yàn)大/小鼠小鼠腦內(nèi)單胺氧化酶MAO-A、MAO-B活性測(cè)定小鼠對(duì)新生大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用（谷氨酸損傷、過(guò)氧化氫損傷、缺糖缺氧損傷、損傷等）新生大鼠對(duì)SH-SY5Y細(xì)胞合成分泌BDNF的作用SH-SY5Y細(xì)胞抗驚厥育亨賓毒性增強(qiáng)試驗(yàn)小鼠戊四唑驚厥小鼠荷包牡丹堿驚厥小鼠印防己驚厥小鼠抗焦慮與戊巴比妥類藥物的協(xié)同作用小鼠對(duì)巴比妥閾下劑量的影響小鼠再入睡試驗(yàn)小鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)（大/小鼠，全程攝像監(jiān)控、軟件處理）大/小鼠大鼠高架十字迷宮法（全程攝像監(jiān)控、軟件處理）大鼠大鼠穿梭箱法（全程攝像監(jiān)控、軟件處理）大鼠抗帕金森氏癥抗帕金森氏癥6-羥多巴胺致大鼠帕金森病模型大鼠MPTP模型（雙側(cè)損毀PD模型）大/小鼠氧化震顫素致顫模型大/小鼠疼痛。在肝臟中，肝外膽道系統(tǒng)的阻塞會(huì)引發(fā)膽汁淤積和炎癥，導(dǎo)致門(mén)靜脈周圍區(qū)域的強(qiáng)烈纖維化反應(yīng)。

    17-高原濕度環(huán)境模擬裝置，18-動(dòng)物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察單元，19-功能控制面板。具體實(shí)施方式為了使本實(shí)用新型的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合附圖及實(shí)施例，對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例用以解釋本實(shí)用新型，并不用于限定本實(shí)用新型，即所描述的實(shí)施例是本實(shí)用新型一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。通常在此處附圖中描述和示出的本實(shí)用新型實(shí)施例的組件可以以各種不同的配置來(lái)布置和設(shè)計(jì)。因此，以下對(duì)在附圖中提供的本實(shí)用新型的實(shí)施例的詳細(xì)描述并非旨在限制要求保護(hù)的本實(shí)用新型的范圍，而是表示本實(shí)用新型的選定實(shí)施例?；诒緦?shí)用新型的實(shí)施例，本領(lǐng)域技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本實(shí)用新型保護(hù)的范圍。需要說(shuō)明的是，術(shù)語(yǔ)“”和“第二”等之類的關(guān)系術(shù)語(yǔ)用來(lái)將一個(gè)實(shí)體或者操作與另一個(gè)實(shí)體或操作區(qū)分開(kāi)來(lái)，而不一定要求或者暗示這些實(shí)體或操作之間存在任何這種實(shí)際的關(guān)系或者順序。而且，術(shù)語(yǔ)“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含，從而使得包括一系列要素的過(guò)程、方法、物品或者設(shè)備不包括那些要素，而且還包括沒(méi)有明確列出的其他要素。卵巢切除致骨質(zhì)疏松大鼠模型。云南大鼠動(dòng)物模型技術(shù)

特發(fā)性肺纖維化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是臨床上具有代表性的一種慢性纖維化性肺。江蘇小鼠動(dòng)物模型造模

    轉(zhuǎn)基因小鼠對(duì)黑色素瘤發(fā)生的分子途徑的理解有重要意義。此外，轉(zhuǎn)基因小鼠是可靠且可重現(xiàn)的模型，用來(lái)評(píng)估受損基因?qū)谏亓錾飳W(xué)的影響。應(yīng)用：基因工程小鼠模型可用于研究特定基因組改變?cè)诤谏亓龅陌l(fā)生和發(fā)展的重要性及藥物的靶向。1Lum－/－基因敲除小鼠Lumican是一種富含亮氨酸的小蛋白聚糖(smallleucine-richproteoglycan，SLRP)，為膠原原纖維形成的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑。黑色素瘤中Lumican表達(dá)降低與浸潤(rùn)相關(guān)。方法：有研究者利用BamHI建立的克隆衍生物導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，建立Lum－/－轉(zhuǎn)基因小鼠。該模型可提供與發(fā)生和轉(zhuǎn)移相關(guān)機(jī)制及可見(jiàn)變的進(jìn)展，以及確定負(fù)責(zé)的黑色素瘤進(jìn)展的基因。2Tyr::N-RasQ61K轉(zhuǎn)基因小鼠方法：有研究者使用突變的人N-ＲasQ61K和SV40剪接以及聚腺苷酸化序列生成Tyr::N-ＲasQ61K構(gòu)建體，并注射到卵母細(xì)胞中，建立Tyr::N-ＲasQ61K轉(zhuǎn)基因小鼠。3BrafV600E轉(zhuǎn)基因小鼠模型有研究者使用LoxP-stop-LoxP(LSL)/Cre重組酶技術(shù)從內(nèi)源性Braf基因中誘導(dǎo)BrafV600E表達(dá)，建立BrafV600E轉(zhuǎn)基因黑色素瘤小鼠模型?？偨Y(jié)目前已有三種不同的黑色素瘤小鼠模型，但由于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與人類基因組、基因調(diào)控、細(xì)胞類型、結(jié)構(gòu)與組成等方面是有一定差別。江蘇小鼠動(dòng)物模型造模