進而使一些生長因子受體磷酸化。方法:有研究者用100μL的、、1%的DMBA的溶液涂抹于6周齡雌性C3H/Hen小鼠已剃毛的背部皮膚。在DMBA涂抹一周后,每周兩次將TPA(40nmol)施用到相同部位。模型驗證:幾周后,小鼠背部皮膚上出現(xiàn)色素沉著斑點。組織學研究表明,小鼠真皮組織中色素細胞積累,某些色素細胞表現(xiàn)出嵌套的形態(tài)學模式。缺點:化學誘導(dǎo)黑素瘤小鼠模型缺乏與人類疾病的臨床相關(guān)性。另外,此類模型可用于研究陽光對黑色素細胞痔轉(zhuǎn)化為侵襲性的黑色素瘤的過程中起的作用。由于小鼠模型的免疫系統(tǒng)功能,因此也可以用于研究免疫策略。二、移植性模型移植模型是目前應(yīng)用多的模型。應(yīng)用:移植接種的黑色素瘤小鼠模型概括了黑色素瘤原位發(fā)展、轉(zhuǎn)移的一些特點,多用于抗和轉(zhuǎn)移藥物評估。1同種移植模型同種移植模型是將小鼠黑素瘤細胞接種到具有相同遺傳背景的小鼠中獲得小鼠黑素瘤模型。此模型包括ICR小鼠的Harding-Passey黑色素瘤模型、DBA小鼠的S91黑色素瘤模型、C57BL/6小鼠的B16黑色素瘤模型,其中C57BL/6小鼠的B16黑色素瘤是常用模型。優(yōu)點:同種移植模型具有免疫能力,可通過黑色素細胞與免疫細胞之間固有的相互作用來研究黑色素瘤與微環(huán)境的關(guān)系。惡性黑色素瘤是起源于神經(jīng)嵴的黑色素細胞惡性。湖北C57動物模型建模
代謝組學的研究對象大都是相對分子量在1000以內(nèi)的小分子物質(zhì),因此常用的血液樣本在取樣后,應(yīng)小心操作,防止溶血,盡快分離出血清,分置于溫環(huán)境下保存。由于用于病理實驗的動物組織采集相對其他樣品的采集,操作更繁瑣,在處理過程中許多細節(jié)容易忽略,造成數(shù)據(jù)不完美(甚至不能用)。因此接下來將重點介紹組織樣品采集的注意事項及其固定。組織樣品采集注意事項組織應(yīng)新鮮,操作時間盡可能短,否則細胞發(fā)生死后變化、自融及現(xiàn)象。是動物心臟還在跳動時采集,樣本取出后在5分鐘以內(nèi)置于固定液內(nèi),避免長時間暴露在空氣環(huán)境中。組織塊盡量小而薄。組織塊的厚度以不超過5mm為宜,較為理想的厚度為2mm左右,主要目的是使固定液迅速而均勻的滲入組織塊內(nèi)部。勿使組織塊受擠壓。在采集過程中,應(yīng)盡量選擇較為鋒利的手術(shù)器械,如手術(shù)刀片等,避免操作過程中擠壓挫傷標本。擠壓過的組織均不可用。固定液的量一般以組織塊大小的20倍為宜,組織能夠在容器內(nèi)自由移動。盡量保持組織的原有形態(tài)。新鮮組織經(jīng)固定后,或多或少產(chǎn)生收縮現(xiàn)象(如胃腸),為此可將組織展平,以盡可能維持原形。保持組織清潔。組織塊上如有血液、污物、粘液、食物、糞便等,可用生理鹽水沖洗。湖北C57動物模型建模高脂飼料致高脂血癥大鼠模型。
用一次定量放血法可擺分之擺造成出血性休克,擺分之擺死亡,這就符合可重復(fù)性和達到了標準化要求。(三)可靠性復(fù)制的動物模型應(yīng)該力求可靠地反映人類疾病,即可特異地、可靠地反映某種疾病或某種功能、代謝、結(jié)構(gòu)變化,應(yīng)具備該種疾病的主要癥狀和體征,經(jīng)化驗或X線照片、心電圖、病理切片等證實。若易自發(fā)地出現(xiàn)某些相應(yīng)病變的動物,就不應(yīng)加以選用,易產(chǎn)生與復(fù)制疾病相混淆的疾病者也不宜選用。(四)適用性和可控性供醫(yī)學實驗研究用的動物模型,在復(fù)制時,應(yīng)盡量考慮到今后臨床應(yīng)用和便于控制其疾病的發(fā)展,以利于研究的開展。(五)易行性和經(jīng)濟性在復(fù)制動物模型時,所采用的方法應(yīng)盡量做到容易執(zhí)行和合乎經(jīng)濟條件原則。以上就是上海研錄為你分享的小知識,如果想要了解更多相關(guān)內(nèi)容,可與我們聯(lián)系,我們期待您的來電!
我們知道WB實驗步驟繁瑣,一次實驗歷時也不短,從提蛋白到顯影結(jié)束可能要三天,我們就講一下這里面的一些關(guān)鍵環(huán)節(jié)。一、蛋白提取及變性1、提取蛋白很多經(jīng)驗豐富的WB實驗者都深有體會,蛋白提取是影響結(jié)果重要的環(huán)節(jié)之一。該過程重要的是防降解和保證蛋白濃度不要太低。防降解主要有兩點,一是裂解前注意保持樣品處于低溫環(huán)境中,二是裂解時加入足夠的蛋白酶抑制劑。我們習慣先用冰冷的PBS做心臟的體循環(huán)灌注,然后冰上取腦,分離各腦區(qū)(嗅球,皮層,海馬,中腦,小腦,延髓,丘腦,紋狀體)后置于,用液氮速凍后轉(zhuǎn)移至-80度冰箱長期保存。接著是保證蛋白濃度,即要加入適量的裂解液,加太少會使蛋白提取不充分,加太多會讓蛋白濃度太低,一般經(jīng)驗是這樣的,細胞樣品例如一個六孔板的細胞加60微升的裂解液,動物組織的話每毫克組織加10微升裂解液。還要加上超聲破碎處理,具體方案見討論部分。如果沒有超聲破碎儀,那就用1毫升注射器不斷抽吸,冰上反復(fù)抽吸1分鐘左右,注意不要產(chǎn)生過多氣泡。(需要灌注取材的視頻可以私聊獲取,由于文件過大,又比較血腥,不宜直接放到文章里。)2、蛋白變性加入上樣緩沖液后100攝氏度煮10分鐘,這里的上樣緩沖液有兩種可選。合理建立周圍性面癱動物模型對進一步深入研究具有重要意義。
橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型一、服務(wù)信息1、動物模型名稱:橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周5、實驗動物體重:150g-180g6、實驗動物環(huán)境:SPF級二、服務(wù)項目服務(wù)編號服務(wù)內(nèi)容服務(wù)周期價錢DH2016橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型20周詢價1、實驗方法:橄欖油聯(lián)合酒精誘導(dǎo)。按,背頸部皮下注射50%CCl4的橄欖油溶液,**注射量加倍(6mL/kg體重),2次/周,皮下注射共13周;造模前4周為10%酒精溶液喂養(yǎng)代替飲水,4周后改為30%酒精溶液灌胃(30%酒精溶液灌胃1mL/100g體重,3次/周)。繼續(xù)正常飼養(yǎng)1個月。實驗結(jié)束測量門靜脈血流量(PBF)和腸系膜上動脈血流量(SMABF)。處死,取肝臟進行組織病理學檢查。2、檢測標準:門靜脈及腸系膜上動脈血流量情況與正常對照組比較均增加,差異有統(tǒng)計學意義肝組織病理可見肝硬化病理改變。三、交付標準:1.提供動物模型構(gòu)建過程中的原始實驗記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動物或相關(guān)組織材料。四、服務(wù)項目說明:1、如有特殊要求,請另詢價。2、雙方簽訂合同后,收取70%首付后啟動實驗。通過建立腦缺血-再灌注動物模型,模擬人類ICVD的病理過程。湖北C57動物模型建模
小鼠腎纖維化(UUO)模型建立。湖北C57動物模型建模
表明在gm20541敲除鼠視網(wǎng)膜外節(jié)變短退化。sixko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型小鼠;dapi(4,6-diamidino-2-phenylindole):細胞核染料4,6-二脒基-2-苯基吲哚;rhodopsin:視紫紅質(zhì)抗體;merge:兩種顏色重疊。具體實施方式為使本發(fā)明實施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚,下面將對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進行清楚、完整地描述。實施例中未注明具體條件者,按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者,均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。以下結(jié)合實施例對本發(fā)明的特征和性能作進一步的詳細描述。實施例11采用rt-pcr方法檢測gm20541基因在不同組織的表達情況。方法:分別提取小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、腸、肌肉、心臟、腎臟以及脾的總rna,然后用cdna合成試劑盒(invitrogen,waltham,ma,usa)合成cdna。根據(jù)gm20541的cdna序列設(shè)計引物:gm20541-cdna-f:5’-tcggtctcatcttcattccc-3;gm20541-cdna-r:5’-ggaaggctctgttccggtat-3。以提取的cdna為模板,進行rt-pcr。擴增后進行電泳,結(jié)果見圖1。結(jié)果見圖1中a和b,可以看出,通過rt-pcr方法檢測gm20541基因在小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、腸、肌肉、心臟、腎臟以及脾中的表達。湖北C57動物模型建模