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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-05-01

HE染色伊紅溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行),可改變組織等電點(diǎn),促進(jìn)伊紅與胞漿蛋白質(zhì)結(jié)合,其本身不參與染色的反應(yīng)。當(dāng)蘇木素染色效能極高,很短時(shí)間就導(dǎo)致核漿共染時(shí),可適當(dāng)?shù)靥砑颖姿?一般不超過(guò)2%),抑制蘇木素染色效能,方便控制染色時(shí)間,同時(shí)也能提高蘇木素染色的清晰度?,F(xiàn)在有商用的HE染色液賣,但是質(zhì)量參差不齊。如果課題組較大,完全可以自己配制,效果也挺好。配制為乙酸濃度5%-7.5%和鹽酸濃度為0.5%-1%的蘇木素溶液放置一周,即可完全成熟,染色效果好,氧化膜和結(jié)晶都很少(一般蘇木素中酸度越低越容易產(chǎn)生氧化膜和結(jié)晶,這也是提示更換蘇木素的標(biāo)志之一)。HE染色結(jié)果如何分析和讀片?上海HE染色服務(wù)

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HE染色:在組織病理學(xué)中,蘇木素-伊紅染色是一種日常使用比較普遍的常規(guī)染色方法。常規(guī)蘇木素染色的對(duì)比染色是用伊紅,也有采用焰紅,因?yàn)檠婕t比伊紅色澤更鮮明,還有采用橘黃G,比布里希猩紅,波爾多紅等作為對(duì)比染色。伊紅是比較常用的胞質(zhì)染料,本身溶于醇而不溶于水,為磚紅色粉末狀或醬紅色結(jié)晶。配方:伊紅Y(水溶)0.5-1g,蒸餾水99ml。如果取用伊紅Y(醇溶性)應(yīng)當(dāng)溶于99ml 75%或95%的乙醇中。如果在伊紅液中加入0.5ml冰醋酸,可以加速其染色過(guò)程,使得胞質(zhì)的色澤更加艷麗。結(jié)果是細(xì)胞核呈藍(lán)色,胞質(zhì)、肌肉、結(jié)締組織、紅細(xì)胞和嗜伊紅顆粒呈不同程度的紅色。鈣鹽和各種微生物也可染成藍(lán)色或紫藍(lán)色。上海HE染色服務(wù)HE染色切片知識(shí)以及如何做出漂亮的切片。

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HE染色原理1、細(xì)胞核染色的原理:蘇木精為堿性天然染料,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。2、細(xì)胞漿染色的原理:伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,在一定條件下可使細(xì)胞漿著色。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物,細(xì)胞漿的染色與染液的pH在胞漿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(4.7—5.0)以下時(shí),胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,則細(xì)胞漿帶正電荷,就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽(yáng)離子結(jié)合,使細(xì)胞漿著色,呈現(xiàn)紅色。

HE染色標(biāo)本一般是針對(duì)石蠟標(biāo)本,脂滴和石蠟都是的有機(jī)物, 都具有非極,脂滴應(yīng)該可以溶解石蠟的。 HE染色就是用蘇木精和伊紅對(duì)細(xì)胞內(nèi)的核糖體和細(xì)胞質(zhì)染色的方法。 H:Hematoxylin,蘇木精 E:Eosin,伊紅 蘇木精(Hematoxylin,H)是一種堿染料,可將細(xì)胞核和細(xì)胞內(nèi)核糖體染成藍(lán)紫色,被堿染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜堿。 伊紅(,E)是一種酸染料,能將細(xì)胞質(zhì)染成紅色或淡紅色,被酸染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜酸。染色前,須用二甲苯脫去切片中的石蠟,再經(jīng)由高濃度到低濃度酒精,***入蒸餾水,就可染色。南京英瀚斯生物肺部組織HE染色如何觀察。

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HE染色組織樣本水化:將浸泡過(guò)二甲苯的待測(cè)組織樣本先放入無(wú)水乙醇中浸泡5min,使脫蠟時(shí)用的二甲苯可以被洗脫出去,使水可以進(jìn)入組織中;再依次置于95%、85%、70%乙醇中各浸泡5min以達(dá)到充分水化的效果。組織切片蘇木素染色、分化與反藍(lán):將水化后的組織樣本的切片使用PBS溶液浸泡清洗,每次浸泡5min,總共清洗3次。之后用移液***吸取已經(jīng)預(yù)先配制好的蘇木素染色液,每個(gè)組織切片滴加100ul,充分染色10min。染色完畢后使用蒸餾水洗去多余的蘇木素染色液。然后再使用1%的鹽酸乙醇進(jìn)行分化,使細(xì)胞核中結(jié)合過(guò)多的染液和細(xì)胞漿中的多余的染液被除去。分化完成后,再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。為了使蘇木素染藍(lán)色,使用弱堿性的促藍(lán)液加入組織切片中,讓細(xì)胞核染藍(lán)色。反藍(lán)結(jié)束后先用清水進(jìn)行清洗,再用雙蒸水將組織切片沖洗干凈。南京英瀚斯,專業(yè)的技術(shù)提供專業(yè)的HE染色服務(wù)。四川推薦的HE染色檢測(cè)

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HE染色顯微鏡下見(jiàn)切片內(nèi)有大量水珠分析以及應(yīng)對(duì)原因:切片經(jīng)梯度乙醇處理后沒(méi)有完全脫水,導(dǎo)致二甲苯透明中性樹膠封固后殘留大量水分。對(duì)策:移去蓋玻片,用二甲苯溶解封固劑如中性樹膠。將切片置入新鮮的無(wú)水乙醇中,待切片重新脫水完全后,用新二甲苯透明,中性樹膠封固。所有用于脫水和透明的液體,在使用一定時(shí)間以后,應(yīng)即時(shí)更換。光鏡下切片某些區(qū)域難以聚焦分析以及應(yīng)對(duì)原因:蓋玻片上可能有封固切片的封固劑。對(duì)策:移去蓋玻片,重新用干凈的蓋玻片封片上海HE染色服務(wù)