熒光壽命取決于熒光分子所處的微環(huán)境，通過對樣品熒光壽命的測量和成像可以定量獲取樣品的功能信息。熒光分子受激發(fā)后發(fā)光，熒光壽命量化了發(fā)光的衰減率。該特征時間不但取決于特定的熒光團，還取決于其環(huán)境，分子相互作用影響弛豫過程并改變熒光團的壽命。熒光壽命是微環(huán)境的相對參數(shù)，不受環(huán)境吸收、樣本濃度等因素影響，因此能夠對生物組織環(huán)境中的 p H 值水平、離子濃度、氧分子濃度等微環(huán)境狀態(tài)進行高精度檢測。熒光壽命顯微成像（FLIM），可以定位不同的分子及濃度分布，在生物，材料，半導體領域具有重要的應用價值。熒光壽命成像技術可顯示單指數(shù)或多指數(shù)熒光衰減。湖北紅外熒光壽命成像哪個品牌好
為什么說熒光壽命成像FLIM相比于熒光強度成像更有優(yōu)勢？通過熒光強度成像可以獲得熒光分子的空間分布，較為直接和簡便，但是當熒光分子具有相似的頻譜特性，或是同樣的熒光分子在不同環(huán)境下時，依賴強度進行成像的方案便無法準確反映信息。與基于光強的成像方式不同，熒光壽命成像FLIM適用于測量熒光分子環(huán)境的變化，或是測量分子的運動情況。其結果與熒光分子濃度無關，且不受影響光強的光散射或是光吸收影響，可以精確測量熒光淬滅過程，對生物分子微環(huán)境進行定量測量。熒光壽命成像可以用于無法控制局部探針濃度的熒光顯微鏡中。北京多色熒光壽命成像熒光成像在疾病診斷，藥物分布和代謝評估以及血管生物成像中得到了普遍的應用。
熒光壽命成像如何理解？熒光壽命成像主要通過TCSPC技術（Time-Correlated Single Photon Counting）實現(xiàn)。系統(tǒng)采用超短脈寬激光器作為激發(fā)光源，通過光路耦合器，將激光引入顯微光路。激光通過物鏡聚焦照射樣品池，利用光子探測裝置（PMT）對熒光信號進行探測，再用TCSPC計數(shù)器對每一個光子進行計數(shù)，并將其放入一個對應的時間窗口，經過一定時間的統(tǒng)計疊加后即得到熒光壽命曲線。幾十萬次重復以后，不同的時間通道累積下來的光子數(shù)目不同。以光子數(shù)對時間作圖可得到熒光衰減曲線。實現(xiàn)從百ps-ns-us的瞬態(tài)測試。綜上所述由于TCSPC系統(tǒng)，一個激光脈沖只采集一個光子信號，所以激光器的重復頻率決定了系統(tǒng)的數(shù)據(jù)采集速度。重頻越高，采集速度越快，數(shù)據(jù)信噪比越好。
影響熒光壽命成像測量的因素：高濃度樣品的影響：1）當激發(fā)光照射高濃度樣品時，在激發(fā)光入口附近產生熒光，但這些熒光并不能進入熒光檢測器。2）高濃度的分子之間相互作用而發(fā)生活性阻礙現(xiàn)象。3）熒光的再吸收：即熒光光譜的短波長端和激發(fā)光譜的長波長端如果相互重疊，則發(fā)生熒光再吸收。熒光壽命成像具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。散射光的影響： 主要是瑞利散射光和拉曼散射光的影響較大。校正辦法：先用短的激發(fā)光激發(fā)，檢出溶液的拉曼峰，然后進行熒光光譜校正。因為熒光光譜不隨激發(fā)光波長的改變而改變，而拉曼光卻隨之改變。熒光壽命成像是一種什么樣的技術？
熒光壽命成像的應用領域有哪些？生命科學領域：細胞體自身熒光壽命分析；自身熒光相對熒光標記的有效區(qū)分；活細胞內水介質的PH 值測量；局部氧氣濃度測量；具有相同頻譜性質的不同熒光標記的區(qū)分；活細胞內鈣濃度測量；時間分辨共振能量轉移（FRET）：納米級尺度上的遠差測量，環(huán)境敏感的FRET 探針定量測量；代謝成像：NAD(P)H 和FAD 胞質體的熒光壽命成像。材料科學領域：寬禁帶半導體等體系的少子壽命mapping 測量；量子點等用作熒光壽命成像顯微鏡探針；鈣鈦礦電池/LED 薄膜的組分分析、缺陷檢測；銅銦鎵硒CIGS，銅鋅錫硫CZTS 薄膜太陽能電池的組分、缺陷檢測；鑭系上轉換納米顆粒；GaAs 或GaAsP 量子阱的載流子擴散研究。熒光壽命成像一般不受諸如激光或熒光強度擾動、染料的光漂白以及其他有礙熒光強度的因素的影響。北京動物熒光壽命成像哪家專業(yè)
熒光壽命成像能夠對不同種類或處于不同狀態(tài)的生物組織提供更好的對比度。湖北紅外熒光壽命成像哪個品牌好
熒光壽命成像技術是如何應用在生物醫(yī)學中的？隨著近年來對蛋白及分子功能研究的不斷深入，科研工作者除對多色成像、鈣成像等功能成像的需求日漸增多之外，對熒光壽命成像的需求也逐漸增加，而熒光壽命成像能提供除熒光強度、熒光光譜信息之外的熒光分子的壽命信息，可用于分子間相互作用（FRET）、分子所處微環(huán)境的離子濃度（如Ca2+、pH）及細胞代謝水平的改變等測量，并可拆分光譜重疊的熒光染料及染料和自發(fā)熒光，還可以結合熒光相關光譜對單分子實現(xiàn)熒光壽命相關光譜FLCS的測量。熒光壽命成像擴展了傳統(tǒng)熒光成像的維度，是功能成像的理想工具，在生物醫(yī)學領域有廣闊的應用前景。湖北紅外熒光壽命成像哪個品牌好
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