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上海分子熒光壽命成像有哪些

來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-03-03

為什么說熒光壽命成像FLIM相比于熒光強(qiáng)度成像更有優(yōu)勢(shì)?通過熒光強(qiáng)度成像可以獲得熒光分子的空間分布,較為直接和簡(jiǎn)便,但是當(dāng)熒光分子具有相似的頻譜特性,或是同樣的熒光分子在不同環(huán)境下時(shí),依賴強(qiáng)度進(jìn)行成像的方案便無法準(zhǔn)確反映信息。與基于光強(qiáng)的成像方式不同,熒光壽命成像FLIM適用于測(cè)量熒光分子環(huán)境的變化,或是測(cè)量分子的運(yùn)動(dòng)情況。其結(jié)果與熒光分子濃度無關(guān),且不受影響光強(qiáng)的光散射或是光吸收影響,可以精確測(cè)量熒光淬滅過程,對(duì)生物分子微環(huán)境進(jìn)行定量測(cè)量。熒光壽命成像可以用于無法控制局部探針濃度的熒光顯微鏡中。熒光壽命成像和生物發(fā)光的不同之處:生物發(fā)光與熒光壽命成像產(chǎn)生光子的過程和機(jī)制是完全不同的。上海分子熒光壽命成像有哪些

紅外熒光壽命成像技術(shù)在生物多重檢測(cè)中的應(yīng)用。相比于熒光強(qiáng)度,熒光壽命的數(shù)值具有很好的穩(wěn)定性,不依賴于生物組織穿透深度。因此可以實(shí)現(xiàn)生物多重成像和量化診斷。該團(tuán)隊(duì)利用能量延遲方法并結(jié)合對(duì)發(fā)光離子濃度的調(diào)控,實(shí)現(xiàn)NIR-II區(qū)單一波長(zhǎng)下熒光壽命三個(gè)量級(jí)以上的精確調(diào)節(jié)。將這種成像方法應(yīng)用于乳腺的精確診斷,其對(duì)標(biāo)志物的定量檢測(cè)結(jié)果與傳統(tǒng)的免疫印跡法和免疫組織化學(xué)法相比有很好的一致性。而相比于后兩者一次只能對(duì)一種標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè),這種新的時(shí)間維度成像方法可以原位實(shí)現(xiàn)同時(shí)定量多個(gè)標(biāo)記物,并且減少了傳統(tǒng)檢測(cè)方法在組織切片的制作、處理以及評(píng)分過程中所導(dǎo)致結(jié)果的差異性。杭州紅外熒光壽命成像怎么樣生物發(fā)光與熒光壽命成像不同點(diǎn):產(chǎn)生光子的原理不同。

熒光壽命成像和生物發(fā)光的不同之處:產(chǎn)生光子的原理不同,類似于我們都是通過肉眼去觀察螢火蟲和發(fā)光水母一樣,生物發(fā)光與熒光成像在本質(zhì)上,都是機(jī)體中特定的細(xì)胞或材料發(fā)出光子,被高靈敏度的CCD檢測(cè)到形成圖像,但是生物發(fā)光與熒光壽命成像產(chǎn)生光子的過程和機(jī)制是完全不同的。生物發(fā)光與熒光成像相同點(diǎn):都需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記。生物發(fā)光產(chǎn)生的光子和熒光壽命成像產(chǎn)生的光子都可以被高靈敏的CCD檢測(cè)并形成圖像,就像一個(gè)人的眼睛就可以既看到螢火蟲又可以看到發(fā)光水母一樣。熒光壽命(FLT)是熒光團(tuán)在發(fā)射光子并返回基態(tài)之前花費(fèi)在激發(fā)態(tài)的時(shí)間。根據(jù)熒光基團(tuán)的不同,F(xiàn)LT可以從皮秒到數(shù)百納秒不等。

熒光壽命成像和熒光光盤有什么區(qū)別?與熒光光譜一樣,熒光壽命也是熒光物質(zhì)的一種內(nèi)在特有性質(zhì),不受熒光物質(zhì)濃度、激發(fā)光強(qiáng)度等因素的影響。熒光壽命成像能在不受熒光強(qiáng)度影響因素影響的條件下,在納米分辨率水平對(duì)蛋白互作進(jìn)行研究,或者通過 FRET 探針研究分子環(huán)境變化,更重要的是其測(cè)量數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性高、易重復(fù)。通過熒光壽命成像還可以對(duì)樣本所處的微環(huán)境進(jìn)行檢測(cè)、對(duì)樣品組份進(jìn)行分離等等。在傳統(tǒng)的熒光強(qiáng)度和熒光光譜兩個(gè)維度的基礎(chǔ)上,又增加了熒光壽命這一新的成像維度,大幅度拓展了該系統(tǒng)的應(yīng)用范圍。熒光壽命成像中的熒光壽命是什么意思?

熒光壽命顯微成像技術(shù)(FLIM)具有對(duì)生物大分子結(jié)構(gòu)、動(dòng)力學(xué)信息和分子環(huán)境等進(jìn)行高分辨高精度測(cè)量的能力,因此其重要性日漸提升,被普遍地應(yīng)用于生物學(xué)研究及臨床診斷等領(lǐng)域。熒光壽命成像的發(fā)展很好地彌補(bǔ)了基于強(qiáng)度成像的問題,對(duì)生物醫(yī)學(xué)檢測(cè)有著重要的意義。熒光的特性包含有:熒光激發(fā)和發(fā)射光譜、熒光強(qiáng)度、量子效率、熒光壽命等,其中,熒光壽命是指熒光分子在激發(fā)態(tài)上存在的平均時(shí)間(納秒量級(jí))。分子的熒光壽命在幾納秒至幾百納秒之間,因此,測(cè)量熒光壽命需要極快響應(yīng)時(shí)間的探測(cè)器。熒光壽命成像可用于多種生物應(yīng)用,包括組織表面掃描、組織類型繪圖、光動(dòng)力治理、DNA芯片分析等。廣州多色熒光壽命成像操作步驟

影響熒光壽命成像測(cè)量的因素:高濃度樣品,高濃度的分子之間相互作用而發(fā)生活性阻礙現(xiàn)象。上海分子熒光壽命成像有哪些

熒光壽命成像有什么作用?熒光壽命可以在頻域或者時(shí)間域測(cè)量。時(shí)間域測(cè)量方法涉及用短光脈沖照射樣品(比色皿、細(xì)胞或組織),然后隨時(shí)間測(cè)量發(fā)射強(qiáng)度。FLT由衰減曲線的斜率確定。有幾種熒光檢測(cè)方法可用于壽命測(cè)量,其中時(shí)間相關(guān)單光子計(jì)數(shù)(TCSPC)可實(shí)現(xiàn)簡(jiǎn)單的數(shù)據(jù)收集和增強(qiáng)的定量光子計(jì)數(shù)。頻域方法涉及高頻率入射光的正弦調(diào)制。在該方法中,發(fā)射發(fā)生在與入射光相同的頻率處,并且隨著激發(fā)光兼有相位延遲和振幅的變化(解調(diào))。壽命測(cè)量不需要波長(zhǎng)比率探針來提供眾多分析物的定量測(cè)定。壽命法通過使用光譜位移探針擴(kuò)展了分析物濃度范圍的靈敏度。上海分子熒光壽命成像有哪些

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