熒光壽命顯微成像（Fluorescence lifetime imaging microscopy,FLIM）是熒光壽命測量和熒光顯微技術(shù)的結(jié)合，已普遍應(yīng)用于生物醫(yī)學研究和其他領(lǐng)域。FLIM具有高特異性、高靈敏度、可定量測量微環(huán)境變化和分子間相互作用、不受探針濃度、激發(fā)光強度和光漂白影響等優(yōu)點。在過去的十年中，光學技術(shù)硬件和軟件、材料科學和生物醫(yī)學的迅速發(fā)展，共同促進了FLIM技術(shù)及其應(yīng)用的巨大進步。盡管經(jīng)過幾十年的技術(shù)發(fā)展，F(xiàn)LIM技術(shù)在實際應(yīng)用中仍然面臨著一些挑戰(zhàn)，例如：FLIM的成像分辨率也會受到光衍射的限制，因此，在實際應(yīng)用中，我們經(jīng)常需要在成像速度、圖像質(zhì)量和微環(huán)境壽命精度之間進行權(quán)衡。熒光壽命成像不需要考慮跳色的影響，從而免去了計算和去除跳色雜質(zhì)信號的麻煩。北京單分子熒光壽命成像報價

熒光壽命成像的原理：如果分子環(huán)境刺激激發(fā)態(tài)衰變而不發(fā)射光子，則熒光強度會降低（淬滅）。熒光淬滅是一條單獨的發(fā)射路徑，因此在動力學上與熒光過程形成競爭關(guān)系。激發(fā)態(tài)存儲現(xiàn)在可以通過一個以上的過程衰變，從而縮短熒光壽命。這種壽命的改變可用于收集分子環(huán)境的信息。一種特殊類型的淬滅是將激發(fā)能量以非輻射的方式傳遞到相鄰的不同熒光染料中：“熒光共振能量轉(zhuǎn)移”，F(xiàn)RET。此時，不只第1個熒光染料（供體）變暗，壽命變短，而且第二個熒光染料（受體）在“錯誤的”激發(fā)顏色下開始發(fā)光。由于這種效果的產(chǎn)生需要兩種熒光染料（小于10 nm）的密切接觸，因此將其用作研究分子相互作用的“分子標尺”。湖北分子熒光壽命成像哪個品牌好熒光壽命成像通常用于研究生物分子間相互作用、細胞中的信號事件或區(qū)分光譜重疊的熒光團。

熒光壽命取決于熒光分子所處的微環(huán)境，通過對樣品熒光壽命的測量和成像可以定量獲取樣品的功能信息。熒光分子受激發(fā)后發(fā)光，熒光壽命量化了發(fā)光的衰減率。該特征時間不但取決于特定的熒光團，還取決于其環(huán)境，分子相互作用影響弛豫過程并改變熒光團的壽命。熒光壽命是微環(huán)境的相對參數(shù)，不受環(huán)境吸收、樣本濃度等因素影響，因此能夠?qū)ι锝M織環(huán)境中的 p H 值水平、離子濃度、氧分子濃度等微環(huán)境狀態(tài)進行高精度檢測。熒光壽命顯微成像（FLIM），可以定位不同的分子及濃度分布，在生物，材料，半導體領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用價值。

熒光壽命成像主要應(yīng)用領(lǐng)域包括：用于樣品分離，如利用不同染料熒光壽命的差異將不同組織、正常與病變細胞等有效分離。熒光團在光譜上非常相似（max 580 vs 573）無法分離，但它們在熒光壽命上差異明顯。作為生物傳感器，如評價藥物/理化條件對細胞的影響、Ca+震蕩等。充分拓展了壽光命成像的使用范圍，實現(xiàn)可相互驗證的多維度樣品成像。實現(xiàn)真正的生物動力學分析和功能成像。熒光壽命成像的發(fā)展很好地彌補了基于強度成像的問題，對生物醫(yī)學檢測有著重要的意義。熒光壽命對依賴于熒光團結(jié)構(gòu)的內(nèi)部因素敏感。

熒光壽命成像技術(shù)能夠?qū)崟r監(jiān)控納米顆粒在細胞內(nèi)的穩(wěn)定性。FLIM不但具有其它熒光顯微鏡所具有的高靈敏度、可檢測生物生物樣品等優(yōu)點，它在監(jiān)控熒光納米材料的穩(wěn)定性上還具有以下幾個優(yōu)勢：（1）熒光壽命不受熒光探針的濃度的影響，可排除納米材料的胞吐及細胞分化導致的納米顆粒的稀釋等對測量的影響；（2）很多常見的發(fā)光材料的熒光壽命都遠遠大于細胞的自熒光的壽命，很易去除生物自熒光對熒光成像的干擾；（3）發(fā)光材料的熒光壽命和其材料的穩(wěn)定性密切相關(guān)，熒光壽命的改變可以靈敏地反映相應(yīng)材料的化學穩(wěn)定性?；谏鲜鲈恚麄兝肍LIM技術(shù)系統(tǒng)考察了半導體量子點和金納米簇在活的細胞（HeLa）里72小時內(nèi)的穩(wěn)定性，以及不同的表面配體對這一過程的影響。熒光壽命成像基于熒光團的熒光壽命取決于其分子環(huán)境而并非濃度的事實。北京單分子熒光壽命成像報價

熒光壽命成像（FLIM）對細胞信號傳導及調(diào)控，蛋白間的相互作用等生物研究發(fā)揮著很大作用。北京單分子熒光壽命成像報價

熒光壽命成像顯微術(shù)是一種利用熒光染料固有特性的成像技術(shù)。除了具有特有的發(fā)射光譜外，每個熒光分子還有特有的壽命，它反映了熒光基團在發(fā)射光子之前處于激發(fā)態(tài)的時間。除了標準的熒光強度測量外，壽命分析還可以提供其他信息。提高質(zhì)量，熒光壽命成像提供了額外的信息，有助提高共聚焦成像的質(zhì)量。 它非常適合用于區(qū)分熒光發(fā)射光譜重疊的熒光探針，或消除不需要的背景熒光信號。功能成像，F(xiàn)LIM 是一種用于測量和量化成像數(shù)據(jù)的重要應(yīng)用。 由于壽命信息與熒光基團濃度無關(guān)，因此它非常適合用于功能成像。功能成像超越了傳統(tǒng)的分子樣本位置和濃度記錄，通過該技術(shù)可以進一步研究分子功能、相互作用及其環(huán)境。北京單分子熒光壽命成像報價

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