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廣東三維熒光壽命成像供應

來源: 發(fā)布時間:2023-02-12

熒光壽命成像如何理解?熒光壽命成像主要通過TCSPC技術(shù)(Time-Correlated Single Photon Counting)實現(xiàn)。系統(tǒng)采用超短脈寬激光器作為激發(fā)光源,通過光路耦合器,將激光引入顯微光路。激光通過物鏡聚焦照射樣品池,利用光子探測裝置(PMT)對熒光信號進行探測,再用TCSPC計數(shù)器對每一個光子進行計數(shù),并將其放入一個對應的時間窗口,經(jīng)過一定時間的統(tǒng)計疊加后即得到熒光壽命曲線。幾十萬次重復以后,不同的時間通道累積下來的光子數(shù)目不同。以光子數(shù)對時間作圖可得到熒光衰減曲線。實現(xiàn)從百ps-ns-us的瞬態(tài)測試。綜上所述由于TCSPC系統(tǒng),一個激光脈沖只采集一個光子信號,所以激光器的重復頻率決定了系統(tǒng)的數(shù)據(jù)采集速度。重頻越高,采集速度越快,數(shù)據(jù)信噪比越好。熒光壽命成像技術(shù)是一種在顯微尺度下展現(xiàn)熒光壽命空間分布的技術(shù)。廣東三維熒光壽命成像供應

熒光壽命成像的原理:熒光壽命是熒光團在發(fā)射熒光光子返回基態(tài)之前保持其激發(fā)態(tài)的平均時間長度。這取決于熒光團的分子組成和納米環(huán)境。熒光壽命成像將壽命測量與成像相結(jié)合:對每個圖像像素以測得的熒光壽命進行顏色編碼,產(chǎn)生額外的圖像反差。因此,熒光壽命成像可以提供關于熒光分子空間分布的信息和有關其生化狀態(tài)或納米環(huán)境的信息。有很多技術(shù)可以在顯微鏡環(huán)境中檢測熒光壽命。常見的的是基于供體(受體光漂白,F(xiàn)RET AB)或受體(敏化發(fā)射,F(xiàn)RET SE)熒光強度的技術(shù)。重慶單分子熒光壽命成像供貨商熒光壽命成像一般不受諸如激光或熒光強度擾動、染料的光漂白以及其他有礙熒光強度的因素的影響。

為什么說熒光壽命成像技術(shù)是先進的?熒光壽命成像可以提供熒光強度(光子數(shù))和光子壽命的空間分布,具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。通過雙光子激發(fā)(結(jié)合飛秒脈沖和共焦顯微鏡)可以直接檢測熒光和時間分辨的熒光壽命。這種無損檢測技術(shù),無需解剖或?qū)iT制造分層樣品,不但可在樣品表面,還可在樣品表面以下實現(xiàn)深度解析測量。特別適用于新材料、光子學、光伏、光催化、生物材料、納米材料和納米復合材料以及其相關的原理探究和設計優(yōu)化。

熒光成像技術(shù)涉及精確測量已添加到組織中的自然熒光分子或熒光標簽的熒光衰減率或壽命。由于壽命取決于分子環(huán)境的特性,如溫度和pH,以及其與周圍分子的相互作用,因此可利用熒光成像技術(shù)獲得有關分子性質(zhì)及其微環(huán)境的信息。通常,使用激光掃描共聚焦顯微鏡進行熒光成像技術(shù),通過掃描激光束穿過熒光樣品以形成圖像,從而實現(xiàn)高分辨率。為了在宏觀尺度上獲得熒光成像的信息,研究人員開發(fā)了一種共焦的宏觀系統(tǒng),該系統(tǒng)結(jié)合了激光和非常短的脈沖,利用只有皮秒的長度和非常靈敏的檢測器來檢測熒光。該系統(tǒng)還包括計算光子的電子器件,并繪制它們相對于激光脈沖和樣品上激光束位置的時間分布。熒光壽命成像已用于骨骼和牙齒的診斷。

熒光壽命成像技術(shù)可以實時監(jiān)控納米顆粒在細胞內(nèi)的穩(wěn)定性,利用熒光壽命成像顯微鏡技術(shù)可實現(xiàn)可以實時監(jiān)控發(fā)光納米顆粒在活細胞內(nèi)的穩(wěn)定性。熒光壽命成像不但具有其它熒光顯微鏡所具有的高靈敏度、可檢測人體生物樣品等優(yōu)點,它在監(jiān)控熒光納米材料的穩(wěn)定性上還具有以下幾個優(yōu)勢:(1)熒光壽命不受熒光探針的濃度的影響,可排除納米材料的胞吐及細胞分化導致的納米顆粒的稀釋等對測量的影響;(2)很多常見的發(fā)光材料的熒光壽命都遠遠大于細胞的自熒光的壽命,很易去除生物自熒光對熒光成像的干擾;(3)發(fā)光材料的熒光壽命和其材料的穩(wěn)定性密切相關,熒光壽命的改變可以靈敏地反映相應材料的化學穩(wěn)定性。熒光壽命顯微成像具有高特異性、高靈敏度、可定量測量微環(huán)境變化。遼寧顯微熒光壽命成像訂購

熒光壽命是熒光基團在通過發(fā)射熒光光子返回基態(tài)之前在其激發(fā)態(tài)下保持平均多長時間的量度。廣東三維熒光壽命成像供應

熒光壽命的測量和熒光壽命成像主要有時間相關單光子計數(shù)法(time correlated single photon counting, TCSPC)、門控探測法(time-gated detection)、條紋相機測量法(streak-FLIM)、頻閃技術(shù)等四種常見的方法。TCSPC是目前測量熒光壽命的主要技術(shù),同軸脈沖光源發(fā)出的脈沖光引起起始光電倍增管產(chǎn)生電信號,該信號通過恒分信號甄別器1啟動時幅轉(zhuǎn)換器(time-amplitude converter,TAC),時幅轉(zhuǎn)換器產(chǎn)生一個隨時間線性增長的電壓信號。此外,同軸脈沖光源發(fā)出的脈沖光通過激發(fā)單色器后到達樣品池,樣品產(chǎn)生的熒光信號再經(jīng)過發(fā)射單色器到達終止光電倍增管,由此產(chǎn)生的電信號經(jīng)由恒分信號甄別器2到達時幅轉(zhuǎn)換器并使其停止工作。廣東三維熒光壽命成像供應

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