熒光壽命成像有幾點優(yōu)勢：1.不需要考慮跳色的影響，從而免去了計算和去除跳色雜質(zhì)信號的麻煩；去除跳色雜質(zhì)的準確性很大程度上依賴于信噪比、成像流程的設計和控制、以及跳色信號估算的算法，這些因素使得通過穩(wěn)態(tài)光強度測量熒光壽命成像的精確度在很多時候受到質(zhì)疑。2.穩(wěn)態(tài)光強度的熒光壽命成像測量很容易受熒光標記光漂白或是激發(fā)光散射背景的影響,而這些因素對FLIM-FRET的測量影響相對較低。3.熒光壽命成像可以定量的區(qū)分參與FRET和沒有參與FRET的分子數(shù)量，這樣深入的定量分析是穩(wěn)態(tài)光強度方法做不到的。熒光壽命成像具有200 nm的空間分辨率和皮秒量級的時間分辨率。佛山動物熒光壽命成像哪里有

熒光壽命成像裝置通常由激發(fā)光源、光電探測器、延遲儀器及圖像處理設備組成。門控儀器的光源通常為短脈沖的超快激光器，常見的成像設備是CCD，延遲儀器提供FLIM的控制信號。由于光電探測器和CCD等器件輸出的是光強度信息，熒光壽命圖像可以通過Rapid Lifetime Determination （RLD）和Weighted Nonlinear Least Square （WNLLS）兩種處理方法利用熒光強度圖像通過反演得出。熒光壽命成像（FLIM）有時域和頻域測量法，時域測量中主要有TCSPC技術、門控探測技術、條紋相機探測技術和頻閃技術；頻域測量法中主要是調(diào)制技術。每一種測量技術在測量樣品成像的過程中都有優(yōu)勢和劣勢，在實際測量樣品的熒光壽命時，需要根據(jù)實際的樣品裝填而綜合考慮選擇合適的熒光壽命測量技術。佛山動物熒光壽命成像哪里有熒光壽命成像（FLIM）對細胞信號傳導及調(diào)控，蛋白間的相互作用等生物研究發(fā)揮著很大作用。

熒光壽命成像技術（Fluorescence Lifetime ImagingMicroscopy，F(xiàn)LIM）是一種在顯微尺度下展現(xiàn)熒光壽命空間分布的技術，由于其不受樣品濃度影響，具有其他熒光成像技術無法代替的優(yōu)異性能，目前在生物醫(yī)學工程、光電半導體材料等領域是一種重要的表征測量手段。熒光和熒光壽命：分子包含多個單能態(tài)S0、S1、S2…和三重態(tài)T1…，每個能態(tài)都包含多個精細的能級。正常情況下，大部分電子處在*低能態(tài)即基態(tài)S0 的*低能級上，當分子被光束照射，會吸收光子能量，電子被激發(fā)到更高的能態(tài)S1 或S2 上，在S2 能態(tài)上的電子只能存在很短暫的時間，便會通過內(nèi)轉(zhuǎn)換過程躍遷到S1 上，而S1 能態(tài)上的電子亦會在極短時間內(nèi)躍遷到S1 的*低能級上，而這些電子會存在一段時間后通過震蕩弛豫輻射躍遷到基態(tài)，這個過程會釋放一個光子，即熒光。此外，亦會有電子躍遷至三重態(tài)T1 上，再由T1 躍遷至基態(tài)，我們稱之為磷光。

熒光壽命成像是一種新型的熒光成像技術，它能夠?qū)Σ煌N類或處于不同狀態(tài)的生物組織提供更好的對比度，并反映熒光團及其所處微環(huán)境參數(shù)的定量分布。熒光壽命成像一般不受諸如激光或熒光強度擾動、熒光染料分布不均勻、染料的光漂白以及其他有礙熒光強度的因素的影響,是熒光光譜分析法的有效補充。超快激光技術，高速、高靈敏度探測技術，以及圖像處理技術的發(fā)展，都促進了FLIM 技術的發(fā)展．尤其是將熒光壽命成像和共焦顯微技術以及多光子激發(fā)熒光顯微技術結合，進一步拓寬了FLIM在生物學領域的應用范圍。測量熒光壽命需要極快響應時間的探測器。

熒光壽命成像技術及其在生物醫(yī)學中的應用：熒光分子的壽命就像熒光分子的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜一樣是熒光分子的固有特性，隨著近年來對蛋白及分子功能研究的不斷深入，科研工作者除對多色成像、鈣成像等功能成像的需求日漸增多之外，對熒光壽命成像的需求也逐漸增加，而熒光壽命成像能提供除熒光強度、熒光光譜信息之外的熒光分子的壽命信息，可用于分子間相互作用（FRET）、分子所處微環(huán)境的離子濃度（如Ca2+、pH）及細胞代謝水平的改變等測量，并可拆分光譜重疊的熒光染料及染料和自發(fā)熒光，還可以結合熒光相關光譜對單分子實現(xiàn)熒光壽命相關光譜FLCS的測量。熒光壽命成像擴展了傳統(tǒng)熒光成像的維度，是功能成像的理想工具，在生物醫(yī)學領域有廣闊的應用前景。熒光壽命(FLT)是熒光團在發(fā)射光子并返回基態(tài)之前花費在激發(fā)態(tài)的時間。北京植物熒光壽命成像價錢

熒光壽命取決于熒光分子所處的微環(huán)境，通過對樣品熒光壽命的測量和成像可以定量獲取樣品的功能信息。佛山動物熒光壽命成像哪里有

熒光壽命可以在頻域或者時間域測量。時間域測量方法涉及用短光脈沖照射樣品（比色皿、細胞或組織），然后隨時間測量發(fā)射強度。FLT由衰減曲線的斜率確定。有幾種熒光檢測方法可用于壽命測量，其中時間相關單光子計數(shù)（TCSPC）可實現(xiàn)簡單的數(shù)據(jù)收集和增強的定量光子計數(shù)。頻域方法涉及高頻率入射光的正弦調(diào)制。在該方法中，發(fā)射發(fā)生在與入射光相同的頻率處，并且隨著激發(fā)光兼有相位延遲和振幅的變化（解調(diào)）。壽命測量不需要波長比率探針來提供眾多分析物的定量測定。壽命法通過使用光譜位移探針擴展了分析物濃度范圍的靈敏度。壽命測量可用于沒有直接探針的分析物。包括葡萄糖、抗原或基于熒光能量轉(zhuǎn)移轉(zhuǎn)導機制的任何親和力或免疫測定。佛山動物熒光壽命成像哪里有

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