熒光壽命成像技術有兩種：時間域和頻率域。（1）時域FLIM：需要脈沖光源，所以一般在雙光子的系統(tǒng)上比較常見FLIM（熒光壽命成像Fluorescence Life-time imaging Microcopy簡稱FLIM），理由一是激光是脈沖的，二是買雙光子的老師一般也搭配一個FLIM。（2）頻域FLIM：需要一個相位調(diào)制的光源，有用LED調(diào)制的。熒光壽命成像FLIM的應用：1）細胞體自身熒光壽命分析；2）自身熒光相對熒光標記的有效區(qū)分；3）具有相同頻譜性質(zhì)的不同熒光標記的區(qū)分；4）活細胞內(nèi)水介質(zhì)的PH值測量；5）局部氧氣濃度測量；6）活細胞內(nèi)鈣濃度測量；7）時間分辨Forster共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）：納米級尺度上的遠程測量，環(huán)境敏感的FRET探針定量測量。熒光壽命成像（FLIM）對細胞信號傳導及調(diào)控，蛋白間的相互作用等生物研究發(fā)揮著很大作用。重慶顯微熒光壽命成像原理

典型的熒光壽命成像包括從感興趣區(qū)域（ROI）的共焦圖像中提取1-，2-或3-衰減時間。限制熒光團的衰減速率可能是任意的，而且很復雜，因為在細胞環(huán)境中存在幾種衰減速率。對于相量圖，關于選擇哪種衰減模型以及評估擬合優(yōu)度的挑戰(zhàn)性決定已成為過去。在相量圖中，所有原始FLIM數(shù)據(jù)在向量空間中均表示為相位和幅度。圖像中的每個像素都轉(zhuǎn)換為相量圖中的一個點。單獨于其在圖像中的位置，具有相似衰減特征的像素在相量圖中形成群集?？梢栽诖岁嚵兄羞x擇不同的相量簇，并在標注中反向注釋對應的像素。重慶顯微熒光壽命成像原理由于熒光壽命成像不受樣品濃度影響，具有其他熒光成像技術無法代替的優(yōu)異性能。

熒光壽命成像在生物醫(yī)學研究和臨床診斷應用中的許多場合都對多光譜分辨提出特殊要求，如在FRET測量中，要求能同時測量供體和受體的熒光強度隨時間的衰減，多光譜分辨的熒光壽命成像提供了一種新的定量研究手段．目前，基于門控像增強器的多光譜寬場FLIM 技術一次只能獲得至多兩個譜段的熒光壽命圖像，而基于TCSPC的多光譜分辨FLIM的成像速度又很低，這些都限制了其應用范圍．目前的一個研究方向是，發(fā)展光譜分辨率高、成像速度快、價格低廉的多光譜分辨熒光壽命成像顯微技術。

熒光壽命成像可以應用到個性化化療：要針對患者所患的特殊病癥，找到較有效的抗病藥物至關重要。但是，病細胞對不同類型藥物的反應并不是完全可預測的。因此，進行活檢，將細胞培養(yǎng)并用不同的藥物處理。同時，它們被FLIM重復成像。熒光壽命表明治理后細胞代謝狀態(tài)的早期改變。因此，通過這些測量，只需幾天即可確定較有效的藥物。熒光壽命成像將時域多指數(shù)衰減分析與相量圖相結(jié)合。時域中熒光衰減的測量需要短的激發(fā)脈沖和快速的檢測電路。樣品中的每個點都被依次激勵。使用時域方法，壽命是從對衰減數(shù)據(jù)的指數(shù)擬合得出的。將熒光壽命成像與共聚焦成像技術結(jié)合起來，實現(xiàn)人體三維熒光壽命成像，實現(xiàn)人體三維功能成像奠定基礎。

熒光壽命是熒光分子在激發(fā)態(tài)停留的時間，這個時間可以反映熒光分子的內(nèi)在屬性和所處的微環(huán)境，是一個很有用的工具。以往，熒光壽命的測量和計算是件非常復雜和耗時的工作，只有少數(shù)專業(yè)的科學家關注和使用該工具。傳統(tǒng)的多色成像實驗根據(jù)光譜差異來設計，會有串色等限制，而且需要多次采集圖像，會造成樣品的光損傷。通過熒光壽命來進行成像，只需要拍攝一次就完成圖像采集，不但減少了成像時間，而且降低了激光對樣品的損傷。熒光壽命成像使用簡單，方便快捷，不需要進行參數(shù)調(diào)節(jié)。利用熒光壽命成像顯微鏡技術可實現(xiàn)可以實時監(jiān)控發(fā)光納米顆粒在活細胞內(nèi)的穩(wěn)定性。重慶植物熒光壽命成像供應

熒光壽命(FLT)是熒光團在發(fā)射光子并返回基態(tài)之前花費在激發(fā)態(tài)的時間。重慶顯微熒光壽命成像原理

熒光壽命成像顯微技術已在生命科學，臨床熒光壽命領域中得到了普遍的應用。成像，擴散光學層析成像，熒光相關光譜等等。使用我們專有的多維時間相關單光子計數(shù)技術（TCSPC），我們的FLIM和TCSPC系統(tǒng)具有超高光子效率的特點。因此，科學家，醫(yī)生，研究人員和其他用戶能夠進行TCSPC FLIM顯微鏡檢查，多波長FLIM，同時FLIM和快速獲取FLIM。生命科學是我們熒光壽命成像顯微（FLIM）設備的主要應用領域。我們的技術經(jīng)常用于以下領域：分子影像學、代謝成像、FRET成像、同時進行NAD(P)H和pO2成像。重慶顯微熒光壽命成像原理

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