Humancelldesign開發(fā)了創(chuàng)新且安全的人類β細胞系生產(chǎn)方法。首先,將每個轉(zhuǎn)導的人類胎兒胰腺芽移植到2或3只SCID小鼠的腎被膜下,因為該部位是人類胰腺發(fā)育的允許部位。在6到8個月內(nèi),所有移植的小鼠都發(fā)生了原發(fā)性胰島素瘤,這導致它們的血糖水平下降。與其他胰腺移植相比,原發(fā)性胰島素瘤是高度血管化的。然后將原發(fā)性胰島素瘤中這些高度血管化的區(qū)域分離,用在大鼠胰島素啟動子控制下表達hTERT的慢病毒進行轉(zhuǎn)導,并移植到其他SCID小鼠中。這些小鼠在2至3個月內(nèi)出現(xiàn)低血糖,胰島素陽性細胞大量擴增。這種體內(nèi)擴增有助于維持大量增殖的胰島素細胞,并允許定義允許的培養(yǎng)條件,在這種條件下,可以在體外建立永生化細胞系。曼聯(lián)是Human cell design在中國區(qū)的官方代理。湖南糖尿病細胞模型糖尿病研究新靶點
根據(jù)嚙齒動物β細胞獲得的數(shù)據(jù),葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白SLC2A2頭次被認為是葡萄糖傳感器蛋白。SLC2A2在人胰島細胞中的表達水平極低,表明葡萄糖在大鼠β細胞中通過SLC2A2轉(zhuǎn)運,而在人β細胞中主要通過SLC2A1和/或SLC2A3轉(zhuǎn)運。研究表明SLC2A2mRNA在EndoC-βH1細胞中表達,因此,EndoC-βH1細胞應該是一個有用的模型,用于解剖不同葡萄糖轉(zhuǎn)運體在人β細胞中的特定作用。Humancelldesign構(gòu)建了EndoC-BH1,En-doC-BH3,EndoC-βH5,GLTxEndoC-βH5,HLA-A2EndoC-βH5等一系列的胰島B細胞模型.胰島制劑糖尿病細胞模型600+文獻驗證HLA-A2同種異體反應性T細胞與EndoC-BH5細胞共培養(yǎng)顯示出強烈的HLA-A2特異性反應,通過IFNg/IL1b刺激而放大.
Human Cell Design 的科學家們通過不斷的實驗和優(yōu)化,成功開發(fā)出了一系列高效的人源胰島β細胞模型。這些模型不僅在胰島素分泌方面表現(xiàn)出色,還能夠在不同的實驗條件下穩(wěn)定生長,為研究人員提供了可靠的實驗工具。HCD 的細胞模型已經(jīng)在全球多個實驗室中被廣泛應用,為糖尿病研究和治療帶來了新的可能。HumanCellDesign的EndoC-BH5細胞系通過先進的基因編輯技術(shù),成功模擬了天然胰島細胞的功能和結(jié)構(gòu)。這些細胞不僅能夠在高葡萄糖環(huán)境下表現(xiàn)出胰島素分泌反應,還能夠響應不同的胰島素刺激劑,模擬人體胰島細胞的生理狀態(tài)。這些細胞模型為科學家們提供了寶貴的研究資源,推動了糖尿病研究的進展。
HumanCellDesign以其技術(shù)和創(chuàng)新能力,在人源細胞模型領域樹立了榜樣。其開發(fā)的人源胰島β細胞模型不僅為糖尿病研究提供了強有力的支持,還為藥物開發(fā)和細胞治療帶來了新的希望。隨著技術(shù)的不斷進步和應用的不斷擴展,HCD將繼續(xù)致力于推動人源細胞模型的前沿研究,為人類健康事業(yè)做出更大的貢獻。HumanCellDesign的EndoC-BH5細胞系通過先進的基因編輯技術(shù),成功模擬了天然胰島細胞的功能和結(jié)構(gòu)。這些細胞不僅能夠在高葡萄糖環(huán)境下表現(xiàn)出明顯的胰島素分泌反應,還能夠響應不同的胰島素刺激劑,模擬人體胰島細胞的生理狀態(tài)。這些細胞模型為科學家們提供了寶貴的研究資源,推動了糖尿病研究的進展。更多關于HumanCellDesign的產(chǎn)品信息,歡迎咨詢AlibioBuy。糖尿病細胞模型如何進行病毒載體構(gòu)建?
在胰島細胞刺激中,基礎和高D-葡萄糖條件之間的刺激指數(shù)為11.6±1.8。通過應用不引起胰島素分泌的L-葡萄糖(20mM)或完全阻斷D-葡萄糖誘導的鉀通道開放劑二氮嗪(100mM),驗證了胰島素分泌對D-葡萄糖的特異性。胰島素分泌以D-葡萄糖濃度依賴性方式增加,從0mMD-葡萄糖時的68.827.3增加到16.7mMD-葡萄糖時的679.2±39.5ng/h/106細胞。胰島素分泌增加Zui快的是5.5至8mMD-葡萄糖,分別有204.7±51.3和414.9±94.8ng/h/106細胞。Human cell design 構(gòu)建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰島B細胞模型。通過多輪次優(yōu)化改良,獲得的功能胰腺B細胞,無限接近天然人源胰島B細胞,其胰島素分泌功能與天然細胞類似,基于PDX1/NKX6.1關鍵基因驗證的細胞均一性達到90%以上(左圖),在2.8 mM and 11 mM葡萄糖劑量下表現(xiàn)出10倍的胰島素分泌反應(右圖),對GLP-1R激動劑, Exendin4刺激產(chǎn)生明細那反饋, 且可實現(xiàn)批量化生成,實現(xiàn)穩(wěn)定供應。
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糖尿病細胞模型EndoC-BH5 細胞以 1e2 105 細胞/孔接種到 BCoat包被的8 孔 IBIDI 室載玻片上。湖南糖尿病細胞模型糖尿病研究新靶點
EndoC-βH1使用慢病毒介導的基因轉(zhuǎn)移從人類胎兒胰腺中產(chǎn)生功能性β細胞,這些胰腺處于發(fā)育的早期階段,即9至11周,這段時間與β細胞分化的開始相吻合(33)。整合的轉(zhuǎn)基因SV40LT受大鼠胰島素啟動子控制,在胰島素陽性細胞中特異性表達。通過使用這種靶向方法,SV40LT在新形成的β細胞中表達,同時這些細胞頭次產(chǎn)生胰島素。因此,我們成功地模仿了用于產(chǎn)生功能性嚙齒動物β細胞系的轉(zhuǎn)基因方法(7,8,34),用于從人胎兒胰腺中開發(fā)功能性人β細胞系。湖南糖尿病細胞模型糖尿病研究新靶點