個(gè)性化需求,專(zhuān)屬服務(wù):海綿定制如何滿(mǎn)足多樣化市場(chǎng)-海綿定制
如何選擇合適的過(guò)濾綿:提升過(guò)濾效率與延長(zhǎng)使用壽命-過(guò)濾綿
揭秘物流網(wǎng)格海綿:如何在運(yùn)輸中提供良好緩沖效果-網(wǎng)格海綿
寵物海綿爬梯:為寵物量身定制的沙發(fā)與床間通行神器-海綿爬梯
寵物友好家居設(shè)計(jì):海綿爬梯讓沙發(fā)、樓梯、床觸手可及-海綿爬梯
如何挑選高效耐用的杯刷海綿:一份實(shí)用的購(gòu)買(mǎi)指南-杯刷海綿
淘氣堡海綿材質(zhì)對(duì)比,哪種更適合你家孩子-淘氣堡海綿
海綿鞋擦:輕松去除鞋面污漬-海綿鞋擦
高效去除洗衣機(jī)內(nèi)毛發(fā):洗衣球海綿的神奇功效-洗衣球海綿
寵物海綿爬梯:安全、舒適且有趣-小型寵物海綿爬梯輔助器報(bào)價(jià)
外泌體通常被認(rèn)為是細(xì)胞間信號(hào)分子,包含許多蛋白質(zhì)、核酸、細(xì)胞因子、轉(zhuǎn)錄因子和其他細(xì)胞來(lái)源的顆粒。外泌體不只可以向局部環(huán)境傳遞信息,還可以向距離很遠(yuǎn)的細(xì)胞和組織傳遞信息。這可能作為一般信號(hào)和通信通路,但也可能參與致病基因擴(kuò)散和惡性疙瘩進(jìn)一步惡化。迄今為止,已證實(shí)外泌體存在于體液中,例如羊水、血清、母乳、附睪液、唾液、尿液、腹水和胸腔積液、支氣管肺泡灌洗液、滑液和體外細(xì)胞培養(yǎng)上清液中。細(xì)胞排出的外泌體也可作為去除不必要的蛋白質(zhì)和核酸的一種方式,例如,在細(xì)胞成熟(網(wǎng)織紅細(xì)胞)或排泄系統(tǒng)(腎的內(nèi)臟和小管)期間的外泌體。外泌體被發(fā)現(xiàn)在各種生物體中,包括哺乳動(dòng)物、植物和微生物。深圳腦脊液外泌體
當(dāng)外泌體在1983年頭次被發(fā)現(xiàn)后,其被認(rèn)為是細(xì)胞排泄廢物的一種方式,如今隨著大量對(duì)其生物來(lái)源、其物質(zhì)構(gòu)成及運(yùn)輸、細(xì)胞間信號(hào)的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能。外泌體的功能取決于其所來(lái)源的細(xì)胞類(lèi)型,其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、疙瘩侵襲等方方面面。有研究表明疙瘩來(lái)源的外泌體參與到疙瘩細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進(jìn)了疙瘩的生長(zhǎng)與侵襲。濟(jì)南腦脊液外泌體多少錢(qián)外泌體分離是外泌體研究中的重要步驟。
外泌體是由正常或病理?xiàng)l件下的細(xì)胞所分泌,含有各種膜蛋白和胞質(zhì)蛋白。因此,外泌體蛋白也可以作為生物試劑潛在地用于蛋白診斷。外泌體中發(fā)現(xiàn)的十種蛋白質(zhì)主要包括熱休克蛋白8(HSPA8)、CD63抗原(CD63)、β肌動(dòng)蛋白(ACTB)、甘油醛-3-磷酸脫氫酶、烯醇化酶1α、細(xì)胞溶質(zhì)熱休克蛋白90α(HSP90AA1)、CD9、CD81、酪氨酸3-單加氧酶/色氨酸5-單加氧酶打開(kāi)蛋白、zeta多肽(YWHAZ)、肌肉酸激酶(PKM2)。外泌體蛋白屬于各種功能組,例如四跨膜蛋白(CD9、CD63和CD81)、熱休克蛋白(HSC70和HSC90)、膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(GTPases)和脂質(zhì)結(jié)合蛋白。外泌體標(biāo)記物及其在免疫組織化學(xué)、免疫細(xì)胞化學(xué)、流式細(xì)胞術(shù)和ELISA等抗體應(yīng)用中的常用的單克隆抗體。
外泌體分離方法優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比:差速離心法:差速離心法仍是實(shí)驗(yàn)中常用的外泌體分離技術(shù)。主要步驟如下:1.使用離心機(jī)低速離心來(lái)去除細(xì)胞與細(xì)胞碎片。2.而后增加轉(zhuǎn)速通過(guò)離心來(lái)消除樣本中較大的細(xì)胞囊泡。3.再使用高速離心機(jī)進(jìn)行高速離心,通過(guò)離心沉淀的方式提取外泌體。在這里,需要注意的是生物流體的粘度與分離的外泌體的純度有較強(qiáng)的相關(guān)性。所以,對(duì)于高粘度的生物樣品需要超速離心機(jī)進(jìn)行較長(zhǎng)時(shí)間的離心操作。外泌體分離方法之免疫分離法:免疫芯片方法基于表面外泌體受體,用于根據(jù)來(lái)源分離外泌體。獲得的外泌體可直接分析或用于DNA或總RNA分離。外泌體胞內(nèi)蛋白可用作分離外泌體的特異性標(biāo)志物。此外,基于ELISA的ExoTEST也可以用于有效分離外泌體。其原理是:使用涂有外泌體抗體的ExoTEST板,可以從各種生物體液中分離出外泌體。該方法適用于常見(jiàn)和細(xì)胞類(lèi)型特異性外泌體蛋白的檢測(cè)、分析和定量。外泌體可作為一種新型的疙瘩治著策略,例如外泌體特異性L(fǎng)ncRNA干擾RNA技術(shù)。
外泌體的表征方法之非光學(xué)方法:非光學(xué)方法主要包括掃描電子顯微鏡(SEM)、透射電子顯微鏡(TEM)、冷凍電子顯微鏡(Cryo-EM)、原子力顯微鏡(AFM)、免疫檢測(cè)方法(ELISA)、傅立葉變換紅外光譜(FTIR)、可調(diào)諧電阻脈沖傳感(TRPS)和單粒子干涉反射成像傳感器(SP-IRIS)。SEM、TEM和AFM方法通常用于直接膜結(jié)構(gòu)和形態(tài)測(cè)定,而ELISA檢測(cè)提供各種結(jié)構(gòu)顆粒(主要是蛋白質(zhì)和受體)的檢測(cè)和量化,例如,用于外泌體形態(tài)的確認(rèn)。單粒子干涉反射成像傳感器(SP-IRIS)也用于外泌體定量,但也可用于檢測(cè)特定標(biāo)記物和確定外泌體亞群。分離過(guò)程中避免對(duì)外泌體結(jié)構(gòu)和功能造成影響至關(guān)重要。濟(jì)南腦脊液外泌體多少錢(qián)
現(xiàn)有的外泌體分離方法可能存在樣品丟失和樣品污染的問(wèn)題。深圳腦脊液外泌體
外泌體的構(gòu)成:外泌體富含膽固醇和鞘磷脂。2007年,Valadi等發(fā)現(xiàn)鼠的肥大細(xì)胞分泌的exosome可以被人的肥大細(xì)胞捕獲,并且其攜帶的mRNA成分可以進(jìn)入細(xì)胞漿中可以被翻譯成蛋白質(zhì),不只是mRNA,exosomes所轉(zhuǎn)移的microRNA同樣具有生物活性,在進(jìn)入靶細(xì)胞后可以靶向調(diào)節(jié)細(xì)胞中mRNA的水平。這一發(fā)現(xiàn)使得研究人員對(duì)exosome的研究熱情激增,截止已經(jīng)通過(guò)286項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)了41860種蛋白質(zhì)、2838種microRNA、3408種mRNA。一類(lèi)外泌體中常見(jiàn)的細(xì)胞質(zhì)蛋白是Rabs蛋白,是鳥(niǎo)苷酸三磷酸酶家族的一種。它可以調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合,有文獻(xiàn)報(bào)道稱(chēng)RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內(nèi)體中,RAB7和RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內(nèi)體?,F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。深圳腦脊液外泌體