莖環(huán)法試劑盒使用注意:1)較佳RT引物濃度依據(jù)具體實(shí)驗(yàn)而定,引物濃度范圍可在200nM~800nM之間優(yōu)化;2)RT反應(yīng)結(jié)束后請(qǐng)立即將cDNA產(chǎn)物取出,快速置于冰上冷卻;3)內(nèi)參引物(U6,5S等)的使用與miRNA的檢測(cè)方法一致。miRNAqPCR反應(yīng):1)SYBRGreenMix:包括Taq酶、dNTPmix、PCRBuffer、SYBRGreenⅠ等。推薦以20μlqPCR反應(yīng)體系進(jìn)行實(shí)驗(yàn):注:1)正反向引物初始反應(yīng)濃度推薦使用200nM,較佳濃度可以在100nM~500nM之間優(yōu)化;2)Bulge-LoopTMReversePrimer為通用引物,與Bulge-LoopTMRTPrimer的特異序列相匹配,與miRNA無(wú)關(guān)。U6或5S內(nèi)參需選用各自特異的U6RTPrimer或5SRTPrimer。3)本試劑盒不含ROX染料,使用ABIPRISM?7000/7700/7900HT,7300/7500/7500FastReal-TimePCRSystem等需額外添加ROX染料作為校正熒光的儀器,請(qǐng)用戶自行準(zhǔn)備所需的ROX染料。DNA試劑盒中的試劑和材料可能存在差異,因此需要嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行操作。徐州細(xì)胞RNA提取試劑盒
DNA檢測(cè)試劑盒操作步驟:1、加入130μLPrecipitant和950μL冷乙醇,混勻,置—20℃,1小時(shí)以上或過(guò)夜;2、4℃,12,000-14,000rpm離心15-30min,小心地棄去上清,收集沉淀的DNA;3、加入0.5mL70%的冷乙醇,洗DNA沉淀,再12,000-14,000rpm離心20min;4、棄上清,DNA沉淀于室溫干燥10min后,加入10-15μLTEBuffer,充分?jǐn)嚢枞芙釪NA;5、取上述10-15μL樣品加入2-3μLLoadingBuffer,1.5%瓊脂糖凝膠電泳(凝膠和電泳緩沖液TBE均加入0.5μg/mL的溴化乙啶);6、5V/cm電泳1小時(shí),紫外燈下觀察并拍照。徐州細(xì)胞RNA提取試劑盒細(xì)胞試劑盒能夠幫助研究者更準(zhǔn)確地了解細(xì)胞的生理和病理過(guò)程。
植物蛋白提取試劑盒在利用液氮充分磨碎植物組織的同時(shí),采用特殊的試劑對(duì)植物細(xì)胞釋放出來(lái)的蛋白進(jìn)行沉淀,并使用蛋白酶抑制劑抑制蛋白酶活性,很大程度地保持所抽提蛋白質(zhì)的完整性;而且蛋白抽提物呈干粉狀,有利于蛋白質(zhì)的長(zhǎng)期保存。植物蛋白提取試劑盒特點(diǎn):1、提取的蛋白質(zhì)是包括稀有蛋白在內(nèi)的植物細(xì)胞的全蛋白質(zhì);2、可以進(jìn)行50×100mg植物組織樣品的提??;3、經(jīng)過(guò)適當(dāng)處理后,可以用于2D電泳、等電點(diǎn)聚焦等實(shí)驗(yàn);4、對(duì)植物細(xì)胞的裂解效果和植物細(xì)胞的非蛋白質(zhì)成分去除效果好;5、不需要超速度離心,可以同時(shí)處理多個(gè)樣品。
探針?lè)╭PCR試劑盒使用方法:稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)1.由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在單獨(dú)的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性的病原本產(chǎn)品不提供活的體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供無(wú)傳染性的DNA的片段作為陽(yáng)性對(duì)照1.標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。2.用帶芯頭頭分別加入45μL熒光PCR專門模板稀釋液,較好用帶芯頭頭下同)。3.在7號(hào)管中加入5μL1×10E8拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。4.換頭頭,在6號(hào)管中加入5μL1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。5.換頭頭,在5號(hào)管中加入5μL1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。試劑盒的使用需要注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境和溫度。
莖環(huán)法試劑盒:產(chǎn)品需低溫運(yùn)輸。收到產(chǎn)品后,請(qǐng)于-20℃保存,可以穩(wěn)定保存一年。使用前請(qǐng)瞬時(shí)離心。實(shí)驗(yàn)方法:miRNART反應(yīng):1)取Bulge-LoopTMmiRNARTPrimer(20μM),加入適量RNase-freeH2O,配置成Bulge-LoopTMmiRNARTPrimer(5μM)。2)推薦以10μlRT反應(yīng)體系進(jìn)行實(shí)驗(yàn):以上體系混勻后,瞬時(shí)離心,RT反應(yīng)程序?yàn)椋?2℃60min,70℃10min。建議使用標(biāo)準(zhǔn)三步法進(jìn)行檢測(cè),請(qǐng)?jiān)诙縋CR儀(以Bio-RadCFX96為例)上設(shè)定如下程序:注:部分儀器如ABI系列儀器收集熒光信號(hào)需要較長(zhǎng)的恒溫時(shí)間方能收集信號(hào),使用此類儀器請(qǐng)將反應(yīng)程序更改為兩步法,將退火及延伸反應(yīng)合并,時(shí)間設(shè)置為儀器收集信號(hào)所需的較短時(shí)間。對(duì)于用SYBRGreenⅠ染料法進(jìn)行的qPCR的檢測(cè)反應(yīng)都需要在循環(huán)結(jié)束后立即進(jìn)行融解曲線分析,檢測(cè)溫度為70℃~95℃,升溫速率為0.5℃/次,恒溫時(shí)間為5sec/次。試劑盒是一種方便、快捷的實(shí)驗(yàn)工具。徐州細(xì)胞RNA提取試劑盒
DNA試劑盒中通常包含了DNA提取所需的試劑和材料,例如細(xì)胞裂解液、蛋白酶、鹽溶液等。徐州細(xì)胞RNA提取試劑盒
現(xiàn)在都有哪些類型的試劑盒?首先是按檢測(cè)原理區(qū)分,主流的有生化試劑、免疫試劑和分子試劑。首先生化試劑的原理一般是按待測(cè)物質(zhì)的生化性質(zhì),與試劑組分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)(也有如酶催化化學(xué)反應(yīng)的生化反應(yīng);但是生化試劑中也包含以抗原-抗體反應(yīng)為原理的免疫比濁試劑),然后根據(jù)生化反應(yīng)的結(jié)果,選用一種指示試劑來(lái)指示出待測(cè)物質(zhì)的含量。免疫試劑的原理是通過(guò)抗原-抗體反應(yīng),使待測(cè)物質(zhì)(一般是抗原或抗體)與試劑組分發(fā)生免疫學(xué)反應(yīng),然后通過(guò)指示試劑指標(biāo)出含量。徐州細(xì)胞RNA提取試劑盒
蘇州英澤生物醫(yī)藥科技有限公司是以提供RNA\DNA試劑盒,外泌體提取試劑盒,逆轉(zhuǎn)錄試劑盒,熒光定量PCR為主的有限責(zé)任公司(自然),公司成立于2016-10-20,旗下EZB,EZBioscience,EZMED,已經(jīng)具有一定的業(yè)內(nèi)水平。英澤生物致力于構(gòu)建醫(yī)藥健康自主創(chuàng)新的競(jìng)爭(zhēng)力,英澤生物將以精良的技術(shù)、優(yōu)異的產(chǎn)品性能和完善的售后服務(wù),滿足國(guó)內(nèi)外廣大客戶的需求。