配制標(biāo)準(zhǔn)溶液配制濃度為80g/mL的左旋肉堿標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:將左旋肉堿標(biāo)準(zhǔn)品在(102±2)℃的烘箱中烘干2h后冷卻至室溫,稱取20mg(精確至0.1mg)放入小燒杯中,用三級(jí)水溶解放入250mL容量瓶中并定容搖勻。配制左旋肉堿標(biāo)準(zhǔn)工作液:分別吸取0.5mL、1mL、2mL、3mL、5mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液放入25mL的容量瓶中,用三級(jí)水定容混勻。注意現(xiàn)用現(xiàn)配。1.3儀器和設(shè)備分析天平(型號(hào):AL207-IC):購(gòu)于梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司,感量為0.1mg;pH計(jì)(型號(hào):PB-10):購(gòu)于賽多利儀器(北京)有限公司,精度為0.01;離心機(jī):轉(zhuǎn)速≥1500r/min;恒溫水浴鍋:溫度可控制在(40±2)℃;分光光度計(jì)(型號(hào):TU-1901)。上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司致力于提供 左旋肉堿測(cè)定用,價(jià)格實(shí)惠,有想法的可以來(lái)電咨詢!江蘇乳品用左旋肉堿測(cè)定用試劑乙酰輔酶A
GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測(cè)定
酶技術(shù)法
該方法也有不足,由于DTNB 還能與待測(cè)樣品中其他的硫醇類(-SH)物質(zhì)起反應(yīng)DTNB與CoASH不能完全反應(yīng),從而影響測(cè)定的準(zhǔn)確度。因此為了消除-SH物質(zhì)的干擾Marquis 在測(cè)定前將樣品置于90CpH85的環(huán)境中處理5min;也有人用H20,化樣品中含硫醇基的物質(zhì)8(2)2-酮戊二酸脫酶(0GDH)法。JochenSchafer 和Heinz Reichmann(1989)對(duì)原方法進(jìn)行改進(jìn),在測(cè)定游離輔酶A時(shí)用2- 戊二酸取代DTNB,在2-酮戊二酸脫酶(OGDH)催化下與COASH反應(yīng)生產(chǎn)珀酷輔酶A和還原型輔酶I(NADH)NADH在340m 處有強(qiáng)吸收。與原方法相比,OCDH與 COASH反應(yīng)的專一性更強(qiáng),反應(yīng)更加完全,且不受其他-SH 的影響。該方法靈敏度高至nmol級(jí),肉堿回收率在103%~115%之間適合低肉堿含量的樣品。 江蘇乳品用左旋肉堿測(cè)定用試劑乙酰輔酶A上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司是一家專業(yè)提供 左旋肉堿測(cè)定用的公司,歡迎新老客戶來(lái)電!
采用分光光度法測(cè)定嬰幼兒奶粉中左旋肉堿的含量.通過(guò)對(duì)嬰幼兒奶粉中左旋肉堿的測(cè)定進(jìn)行不確定度的評(píng)估,表達(dá)出了合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度和擴(kuò)展不確定度,為評(píng)價(jià)左旋肉堿測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確和可靠性提供技術(shù)依據(jù).
依據(jù)CNAS-CL07:2011《測(cè)量不確定度的要求》,JJF1059.1-2012《測(cè)量不確定度評(píng)定與表示》和GB29989-2013《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測(cè)定》,建立嬰幼兒配方食品中左旋肉堿的測(cè)量不確定度的測(cè)量模型.根據(jù)模型分析并計(jì)算不確定度各個(gè)分量,結(jié)果的不確定度以及擴(kuò)展不確定度.計(jì)算得到在嬰幼兒奶粉中左旋肉堿含量為11.2mg/100g時(shí),擴(kuò)展不確定度為1.21mg/100g,包含因子k為2.
乙酰輔酶A是輔酶A的乙?;问剑梢钥醋魇腔罨说囊宜??;鶊F(tuán)(CH3CO-=乙?;?與輔酶A的半胱氨酸殘基的SH-基團(tuán)相連。這其實(shí)是高能鍵硫酯鍵。它是脂肪酸的β-氧化及糖酵解后產(chǎn)生的**酸氧化脫羧的產(chǎn)物。在許多代謝過(guò)程中起著關(guān)鍵的作用。
乙酰輔酶A是人體內(nèi)重要的化學(xué)物質(zhì)。首先,它是**酸脫羧,脂肪酸的β-氧化的產(chǎn)物。當(dāng)**酸激進(jìn)入線粒體的基質(zhì)后,它會(huì)被**酸脫氫酶復(fù)合體轉(zhuǎn)化為乙酰輔酶A,因?yàn)樵诖诉^(guò)程中,**酸會(huì)被氧化(氫原子轉(zhuǎn)移到NADH+)及其羧基會(huì)以二氧化碳的形式離開(kāi),故此過(guò)程被稱為**酸脫羧。同時(shí),它是脂肪酸合成,膽固醇合成和生酮作用的碳來(lái)源。三大營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的徹底氧化殊途同歸,都會(huì)生成乙酰輔酶A以進(jìn)入三羧酸循環(huán)。 上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司致力于提供 左旋肉堿測(cè)定用,有需求可以來(lái)電咨詢!
乙酰輔酶A羧化酶acetyl-CoAcatboxyla-se 乙酰輔酶A羧化酶(AcetylCoAcarboxylase)催化乙酰輔酶A+ATP+HCO3-→丙二酰輔酶A+ADP+Pi反應(yīng)的生物素酶。***存在于生物界。此反應(yīng)制約著脂肪酸合成第一階段的速度。本反應(yīng)由二個(gè)步驟組成,即利用ATP把CO2固定在酶所結(jié)合的生物素上和把CO2轉(zhuǎn)移給乙酰輔酶A的反應(yīng)。大腸桿菌或植物中的這種酶可以區(qū)分為催化這二個(gè)反應(yīng)的蛋白質(zhì)和結(jié)合生物素的蛋白質(zhì),而動(dòng)物或酵母中的這種酶則不能分開(kāi),動(dòng)物的酶是一種變構(gòu)酶,原體不顯示活性,而聚合成纖維狀的多聚體則呈現(xiàn)活性。動(dòng)物由于營(yíng)養(yǎng)條件、***條件的不同使脂肪酸的合成速度發(fā)生變化,在這種變化調(diào)節(jié)中此酶起著主要作用。即一方面酶量在變化,另一方面每一分子酶的催化力可為檸檬酸等所***的長(zhǎng)鏈脂肪酸輔酶A等所阻抑(原體即多聚體的轉(zhuǎn)換)。左旋肉堿測(cè)定用,就選上海普譽(yù)科貿(mào)有限公司,有需求可以來(lái)電咨詢!嬰幼兒食品用左旋肉堿測(cè)定用試劑乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶
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法驗(yàn)證參數(shù)
線性和線性范圍左旋肉堿標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液濃度為80μg/mL。吸取0.5mL、1mL、2mL、3mL、5mL的左旋肉堿標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液定容到25mL,經(jīng)過(guò)計(jì)算,該系列標(biāo)準(zhǔn)溶液中左旋肉堿的質(zhì)量濃度分別為1.6μg/mL、3.2μg/mL、6.4μg/mL、9.6μg/mL、16μg/mL。以左旋肉堿標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度為橫坐標(biāo),吸光值為縱坐標(biāo),制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程結(jié)果見(jiàn)表1。2.2檢出限和定量限左旋肉堿的檢出限采用空白標(biāo)準(zhǔn)偏差法評(píng)估,即通過(guò)分析大量(n≥10)樣品空白確定檢出限(LOD)。本次實(shí)驗(yàn)通過(guò)10次樣品空白**測(cè)試,計(jì)算出檢測(cè)結(jié)果的算數(shù)平均值(X)和標(biāo)準(zhǔn)偏差(S)確定檢出限(LOD)。計(jì)算公式如下:LOD=X+3S上式中:LOD為方法檢出限(mg/100g);X為10次**空白平均值;S為10次**空白標(biāo)準(zhǔn)偏差。定量限(LOQ)的確定主要是從其可信性考慮,為了增加數(shù)據(jù)的可信性,將10倍的檢出限作為本檢驗(yàn)方法的定量限。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。當(dāng)樣品稱樣量為5.0000g時(shí),該方法的檢出限為0.187mg/100g,定量限為1.87mg/100g。 江蘇乳品用左旋肉堿測(cè)定用試劑乙酰輔酶A