GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定

酶技術(shù)法酶技術(shù)法是目前測定左旋肉堿較為常用的方法,主要包括酶技術(shù)的分光光度法、放射酶法、自動分析儀法、熒光光度法、酶循環(huán)法等。1.1(1)酶顯色法。酶顯色法也被稱為2-基甲酸(DTNB)法，是目前測定左旋肉堿較為常用的方法。該方法**開始是由Marquis和Fritz于1964年建立,檢測了小鼠組織中的游離肉堿后經(jīng)進一步完善成為現(xiàn)在的方法。該方法的機理為:左旋肉堿與乙酷輔酶A(乙酷COA)在乙肉堿轉(zhuǎn)移酶(CAT)的催化下反應(yīng)生成乙酷肉堿和游離輔酶A(COASH。COASH和2-硝基苯甲酸(DTNB)反應(yīng)生成黃色物質(zhì)其顏色深淺與COASH的含量成正比。因COASH與左旋肉堿是等摩爾反應(yīng)關(guān)系,通過分光光度法測定COASH生成量即可間接測定左旋肉堿的含量。該方法操作經(jīng)濟、快捷，且該方法中催化全CAT酶對于左旋肉堿和乙酷輔酶A之間的反應(yīng)具有專一性,從而可以排除右旋肉堿的干擾,故靈√下高檢出限為0.6mg/100g重復性和回收率較收率在96.2%~104.7%之間口。而且與化學法(通過比色法測定肉堿和澳酚藍反應(yīng)生成的有色物質(zhì)來測定肉堿)相比,此法不受樣品中所含季胺類物質(zhì)的影響。國家標準《GB29989嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定》中使用的便是此方法。 左旋肉堿測定用，就選上海普譽科貿(mào)有限公司，有想法的不要錯過哦！上海實驗室用左旋肉堿測定用試劑HEPES

乙酰輔酶A的提取1、細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g4℃離心10min，取上清，置冰上待測。2、組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一），進行冰浴勻漿。8000g4℃離心10min，取上清，置冰上待測。測定步驟1、分光光度計預熱30min，用蒸餾水于340nm處調(diào)零。2、取920μL工作液和100μL樣本至1mL石英比色皿，混勻，立即記錄340nm處20s的吸光值A(chǔ)1和80s時的吸光值A(chǔ)2，計算ΔA=A2-A1陜西PUYU左旋肉堿測定用試劑硝基苯甲酸左旋肉堿測定用，就選上海普譽科貿(mào)有限公司，讓您滿意，歡迎新老客戶來電！

乙酰輔酶A羧化酶（Acetyl-CoAcarboxylase，ACC）在生物體內(nèi)催化乙酰輔酶A羧化生成丙二酰輔酶A，是脂肪酸和許多次生代謝產(chǎn)物合成的關(guān)鍵酶。ACC的活性在一定程度上決定了脂肪酸的合成速度和含油量的高低。ACC能夠催化乙酰輔酶A、NaHCO3和ATP生成丙二酰輔酶A、ADP和無機磷，鉬藍與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質(zhì)，通過鉬酸銨定磷法測定無機磷的增加量來測定ACC活性。可見分光光度法

溶液的配制：試劑二：臨用前將試劑二 B、試劑二 C 倒入試劑二 A，充分溶解待用；可分裝后-20℃保存，避免反復凍融；試劑三：臨用前加入 6 mL 雙蒸水，充分溶解待用；可分裝后-20℃保存，避免反復凍融；試劑四：臨用前加入 15 mL 雙蒸水，溶解后 4℃保存一周；試劑五：臨用前加入 15 mL 雙蒸水，溶解后 4℃保存一周；標準品：10 μmol/mL 標準磷貯備液；提取液的配制：按提取液一：提取液二=990：10（V：V）的比例配制，根據(jù)樣本量現(xiàn)配現(xiàn)用，禁止將提取液二一次性全部加入提取液一混勻分裝待用；工作液（定磷劑）的配制：按 H2O：試劑四：試劑五：試劑六=2:1:1:1 的比例配制，配好的工作液應(yīng)為淺黃色；若變色則試劑失效，若是藍色則為磷污染，工作液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用；

一般描述乙酰輔酶A，三鋰鹽應(yīng)用乙酰輔酶A用于使用放射性同位素測定細胞提取物中的CAT酶活性。細胞提取物中的CAT酶活性催化乙酰基從乙酰輔酶A轉(zhuǎn)移到氯霉素。已經(jīng)開發(fā)了許多測定來測量細胞提取物中的CAT活性。乙酰輔酶A也已用于測定檸檬酸合酶活性。生化/生理作用乙酰輔酶A（Ac-CoA）是糖酵解的**終產(chǎn)物，參與Ac-CoA途徑，這是碳化合物的代謝途徑。Ac-CoA在膽固醇合成中十分重要。它還參與脂肪酸的生物合成和多胺（如精胺和亞精胺）的分解代謝。低水平的Ac-CoA導致神經(jīng)膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元功能的喪失。酮體和甘油三酯在水解時產(chǎn)生Ac-CoA，這間接導致組蛋白乙?；黾?。制備說明工作溶液：比較好溶劑：具有弱酸性pH（4至5）的水或水溶液。儲存條件（工作溶液）：-15至-25°C50mg/ml磷酸鹽緩沖液，pH7，在-15至-25℃下，可穩(wěn)定保存3周。未凍存的溶液應(yīng)立即使用。其他說明*用于生命科學研究。不可用于診斷。上海普譽科貿(mào)有限公司是一家專業(yè)提供 左旋肉堿測定用的公司，歡迎新老客戶來電！

GB 29989 嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定

標準曲線的繪制吸取左旋肉堿標準工作液2.0mL于1cm比色皿中，加入0.8mL顯色工作液和100μL乙酰輔酶A溶液，蓋上比色皿蓋，混合均勻后放入分光光度計中，分光光度計的波長調(diào)為412nm，5min后歸零。迅速加入100μL乙酰肉堿轉(zhuǎn)移酶溶液，混合均勻后放入分光光度計中，反應(yīng)10min后記錄吸光值。以左旋肉堿標準工作液的濃度為橫坐標，以吸光值為縱坐標，制作標準曲線。

試樣測定取2.0mL試樣處理液按上述的步驟測定其吸光值。在標準曲線上查得試樣待測液的濃度。

分析結(jié)果的表述試樣中的左旋肉堿的含量X，以質(zhì)量分數(shù)mg/100g表示7精密度在重復性條件下獲得的兩次**測定結(jié)果的***差值不應(yīng)超過算術(shù)平均值的10%。

其他方法檢出限0.6mg/100g，定量限為2mg/100g。 上海普譽科貿(mào)有限公司致力于提供 左旋肉堿測定用，價格實惠，歡迎您的來電！普譽公司左旋肉堿測定用試劑肉堿乙酰轉(zhuǎn)移酶

左旋肉堿測定用，就選上海普譽科貿(mào)有限公司，有需要可以聯(lián)系我司哦！上海實驗室用左旋肉堿測定用試劑HEPES

GB29989 食品安全國家標準嬰幼兒食品和乳品中左旋肉堿的測定

試劑配制

高氯酸溶液（13%）：13mL高氯酸稀釋至100mL。

氫氧化鈉溶液（10mol/L）：稱取40g氫氧化鈉用水溶解，冷卻后稀釋至100mL。3.2.3氫氧化鉀溶液（4.0mol/L）：稱取22.4g氫氧化鉀用水溶解，冷卻后稀釋至100mL。

顯色儲備液：分別稱取50mg2-硝基苯甲酸、5.96gN-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸、185mg乙二胺四乙酸二鈉溶于30mL去離子水中，用10mol/LNaOH溶液調(diào)pH至7.4～7.6，然后用水定容至50mL。此液置于4℃冰箱中可保存3個月。

顯色工作液：吸取5.0mL顯色儲備液用水定容至25mL。

乙酰輔酶A（AcetylCoA）溶液：稱取20.0mg乙酰輔酶A溶于2.0mL水中。臨用時配制。 上海實驗室用左旋肉堿測定用試劑HEPES

普譽科貿(mào)，2009-07-30正式啟動，成立了標準品，試劑，實驗室耗材，實驗室設(shè)備等幾大市場布局，應(yīng)對行業(yè)變化，順應(yīng)市場趨勢發(fā)展，在創(chuàng)新中尋求突破，進而提升PUYU的市場競爭力，把握市場機遇，推動儀器儀表產(chǎn)業(yè)的進步。業(yè)務(wù)涵蓋了標準品，試劑，實驗室耗材，實驗室設(shè)備等諸多領(lǐng)域，尤其標準品，試劑，實驗室耗材，實驗室設(shè)備中具有強勁優(yōu)勢，完成了一大批具特色和時代特征的儀器儀表項目；同時在設(shè)計原創(chuàng)、科技創(chuàng)新、標準規(guī)范等方面推動行業(yè)發(fā)展。我們在發(fā)展業(yè)務(wù)的同時，進一步推動了品牌價值完善。隨著業(yè)務(wù)能力的增長，以及品牌價值的提升，也逐漸形成儀器儀表綜合一體化能力。公司坐落于上海市閔行區(qū)虹梅南路4999弄25號615室，業(yè)務(wù)覆蓋于全國多個省市和地區(qū)。持續(xù)多年業(yè)務(wù)創(chuàng)收，進一步為當?shù)亟?jīng)濟、社會協(xié)調(diào)發(fā)展做出了貢獻。