然后5％的nds。含有％triton)封閉通透2h，孵育一抗，4℃過(guò)夜。第二天，pbs清洗三次后，孵育相應(yīng)的熒光二抗，然后再用pbs清洗三次，封片，觀察。結(jié)果見(jiàn)圖8，在小鼠4月齡時(shí)，通過(guò)視網(wǎng)膜冰凍組織切片染色外節(jié)抗體rhodopsin以及內(nèi)節(jié)抗體nak-atpase后發(fā)現(xiàn)，相較于野生型小鼠，gm20541基因敲除純合子小鼠(圖中sixko)視網(wǎng)膜外節(jié)明顯縮短，表現(xiàn)出了明顯退化表征。綜上，可以看出，本發(fā)明實(shí)施例以小鼠為例，通過(guò)cre-loxp基因敲除技術(shù)，在小鼠視網(wǎng)膜前體細(xì)胞中特異性敲除gm20541基因，小鼠表現(xiàn)出了視力受損，視細(xì)胞外節(jié)變短退化以及視細(xì)胞丟失等視網(wǎng)膜色素變性疾病典型表征。由此充分說(shuō)明，在視網(wǎng)膜前體細(xì)胞敲除gm20541基因，可以使目標(biāo)動(dòng)物表現(xiàn)出視網(wǎng)膜色素變性疾病。視網(wǎng)膜前體細(xì)胞敲除gm20541基因的動(dòng)物，可以作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型。該疾病模型可以用于視網(wǎng)膜色素變性疾病研究等領(lǐng)域中，為該疾病的研究例如發(fā)病過(guò)程、機(jī)制以及相關(guān)藥物的篩選提供一種新的模型。雖然本發(fā)明實(shí)施例展示了在小鼠的視網(wǎng)膜前體細(xì)胞敲除gm20541基因后的表型，但本領(lǐng)域技術(shù)人員容易理解到，小鼠作為哺乳動(dòng)物的代表性動(dòng)物，在其他的哺乳類(lèi)動(dòng)物中敲除gm20541基因或其同源基因也應(yīng)當(dāng)具有相似的表型。面神經(jīng)受損而致面部表情肌群的運(yùn)動(dòng)功能障礙,對(duì)患者的心理和日常生活造成很大的影響。寧夏高脂高糖動(dòng)物模型手術(shù)

    放血致失血性貧血小鼠模型一、服務(wù)信息1、動(dòng)物模型名稱(chēng)：放血致失血性貧血小鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：KM小鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：約4周齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：18~22g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí)二、服務(wù)項(xiàng)目服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)周期價(jià)錢(qián)DH2014放血致失血性貧血小鼠模型3個(gè)工作日詢價(jià)1、實(shí)驗(yàn)方法：眼眶靜脈叢放血法。小鼠通過(guò)眼眶靜脈叢放血，，并測(cè)外周血紅細(xì)胞總數(shù)（RBC）及血紅蛋白含量（Hb）。24h后所有小鼠眼眶靜脈叢檢測(cè)外周血RBC總數(shù)及Hb含量。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：模型組小鼠放血后24小時(shí)的外周血RBC總數(shù)及Hb含量較放血前明顯下降，低于正常值參考值，且與正常對(duì)照組比較具**性差異（P<），表明成功構(gòu)建了失血性貧血?jiǎng)游锬Ｐ驮炷?。三、交付?biāo)準(zhǔn):1.提供動(dòng)物模型構(gòu)建過(guò)程中的原始實(shí)驗(yàn)記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動(dòng)物或相關(guān)組織材料。四、服務(wù)項(xiàng)目說(shuō)明：1、如有特殊要求，請(qǐng)另詢價(jià)。2、雙方簽訂合同后，收取70%首付后啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)。湖南模式動(dòng)物模型C57BL/6成年鼠肺部通過(guò)呼吸機(jī)過(guò)量通氣損傷模型的建立；

    痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型【目的】痙攣型腦性癱瘓(SCP)大鼠模型建立【動(dòng)物】SPF級(jí)SD大鼠，雄性，周齡6~8W，體重：200~250g【方法】1、大鼠麻醉，顱頂脫毛備皮；2、大鼠腦定位儀固定大鼠，顱頂正中切口，長(zhǎng)度約2cm開(kāi)口暴露前囟及矢狀縫；3、縫線將皮膚左右分開(kāi)固定，前囟后10mm、矢狀縫左側(cè)；4、微量注射器移至開(kāi)孔處修正骨孔，注射器垂直向顱內(nèi)插入，緩慢注射無(wú)水乙醇15ul，注射完移除注射器，棉球壓迫止血；5、縫合創(chuàng)口后維持25°體溫，等待蘇醒，觀察大鼠狀態(tài)。【觀察】術(shù)后3天模型大鼠攝食減少、右側(cè)肢體跛行、右前肢不負(fù)重、右前肢及右前爪屈曲痙攣明顯，順時(shí)針繞圈前行，2周后癥狀減輕，大鼠于術(shù)后4周開(kāi)始給予動(dòng)物行為學(xué)觀察【檢測(cè)】HE檢測(cè)對(duì)比觀察腦組織是否出現(xiàn)細(xì)胞水腫,排列不規(guī)則,結(jié)構(gòu)紊亂,核固縮,染色體分布不均勻,變性壞死,核糖體消失,白質(zhì)軟化灶和空囊形成,小膠質(zhì)細(xì)胞浸潤(rùn),星形膠質(zhì)細(xì)胞肥大、增生等病理表現(xiàn)。曠場(chǎng)測(cè)試（OpenFieldTest）：實(shí)驗(yàn)用于評(píng)估大小鼠的活動(dòng)性和探索性行為。動(dòng)物被放置在一個(gè)較大的開(kāi)放性場(chǎng)地內(nèi)，然后記錄它們的運(yùn)動(dòng)軌跡和停留時(shí)間。用來(lái)評(píng)估動(dòng)物的活動(dòng)性、焦慮程度、壓力反應(yīng)等。水迷宮測(cè)試。

    結(jié)果發(fā)現(xiàn)在這些組織中，gm20541均有表達(dá)，說(shuō)明該基因可能在體內(nèi)發(fā)揮重要功能。2采用免疫印跡(westernblot)的方法檢測(cè)gm20541基因在不同組織中的表達(dá)。方法：(1)分別獲取小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、心臟、腎臟以及脾，充分研磨后加入200μl蛋白裂解液ripa。(2)超聲破碎細(xì)胞后，在冰上裂解20min。(3)4℃，16000g離心10min后，取上清轉(zhuǎn)移至另一干凈離心管，加入50μl的蛋白上樣液，混勻后95℃加熱5min。(4)待樣本冷卻后，分別取20μl，160v電壓進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳(sds-page)以分離蛋白。(5)sds-page結(jié)束后，根據(jù)需要，裁剪適當(dāng)大小的硝酸纖維素膜，按順序鋪上濾紙、膠、硝酸纖維素膜及濾紙，并趕去氣泡，轉(zhuǎn)膜槽放入冰水浴中，采用恒流，轉(zhuǎn)膜2h。(6)轉(zhuǎn)膜完畢后，純水沖洗硝酸纖維素膜一遍，晾干并標(biāo)記。然后用8％的脫脂牛奶封閉2h。(7)封閉完成后，加入一定量的按一定比例(按照抗體使用說(shuō)明書(shū))稀釋于封閉液的一抗，4℃孵育過(guò)夜。(8)回收一抗，1×tbst緩沖液洗膜4次，每次10min，根據(jù)一抗來(lái)源，選擇合適二抗，用1×tbst稀釋辣根過(guò)氧化氫酶(hrp)標(biāo)記的二抗，室溫于搖床上孵育2h。(9)二抗孵育結(jié)束后，用1×tbst洗膜3次，每次10min，用thermo的elc發(fā)光試劑盒檢測(cè)蛋白。動(dòng)物模型的優(yōu)越性主要表現(xiàn)在以下幾下方面。

    其也是可以作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的。以上所述為本發(fā)明的實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。sequencelisting四川省人民醫(yī)院利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法和應(yīng)用111406dna人工序列1gaatgcagtgacctatgatgatgtgtgtgtgaacttcactctggaagaatggactttact60ggatccttcacagaagagtctctacagagatgtgatgcaggaaacctacaggaatctcac120tgctataggctacaattgggaagatgacaatattgaagactattttcaaagttctagaag180acatggaaggcatgaaagaaatcatagtggagagaaaccttatgcttgtaaccaatgtga240taaagccttttcatgtcatcatagtctccaaatacataaaagaagacatactggagagaa300actctatgaatgtaaccgttgtaataaaggctttccatatcccagtgctctacaaataca360taaaaggatacacagtggagagaaaccctatgaatgtaaacaatgtggtaaagcctttgc420atgtcacagttctcttcaaaggcatgaaagaatacatactggtgagaaaccttatgaatg480tagccaatgtggtaaagcctttacacatcaaaagagtctccaaatacataaaagaactca540cagtggagaaaaaccatatgggtgtagtcagtgtggaaaagactttgtaagtcagagtcg600tcttctagaacataaaaggacacatactgga。通過(guò)建立腦缺血-再灌注動(dòng)物模型，模擬人類(lèi)ICVD的病理過(guò)程。湖北大鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)

建立SD大鼠頸動(dòng)脈損傷（結(jié)扎套管）模型。寧夏高脂高糖動(dòng)物模型手術(shù)

    指明方向。盡管現(xiàn)在基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組、蛋白質(zhì)組等組學(xué)已經(jīng)取得了非凡的突破，但人類(lèi)對(duì)于組學(xué)的整體性和復(fù)雜性認(rèn)識(shí)還是很初級(jí)，也就比開(kāi)始高明那么一點(diǎn)點(diǎn)，對(duì)橫亙?cè)诮M學(xué)和個(gè)體之間的裂隙毫無(wú)辦法——這也是目前生物研究被黑的重要原因之一：由于目前還不存在什么生物根本性原理，很多研究還是得靠盲人摸象式的實(shí)驗(yàn)、觀察和歸納。當(dāng)年山中伸彌找到誘導(dǎo)分化細(xì)胞核重編程（也就是IPSc技術(shù)）的四個(gè)基因，可不是用理論算出來(lái)的，是大海撈針般地從成百上千個(gè)轉(zhuǎn)錄因子基因組合中篩選出來(lái)的。盡管以前的研究能有所幫助，但本質(zhì)還是差別不大，這也是為什么分子生物學(xué)科研常常被類(lèi)比成民工搬磚。明白了這個(gè)背景，你大概就能理解小鼠的意義。既然我們對(duì)復(fù)雜系統(tǒng)的架構(gòu)原理毫無(wú)辦法，那我們不妨就建立一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)模型，自上而下地研究問(wèn)題。誠(chéng)然，動(dòng)物模型和人類(lèi)差別巨大，小鼠、大鼠、兔、猴身上做的好好的實(shí)驗(yàn)，放在人身上就不靈了（有時(shí)候，即使是針對(duì)某一個(gè)人群成功的實(shí)驗(yàn)，換一個(gè)人群就不靈了，人類(lèi)內(nèi)部的多樣性都不容小覷）。但是，同在哺乳動(dòng)物大家庭，大家的系統(tǒng)架構(gòu)應(yīng)該是差不多的，差別只在細(xì)節(jié)，問(wèn)題已經(jīng)從大海撈針變成了池塘撈針。為什么藥物會(huì)失效呢？如果是靶點(diǎn)有差異。寧夏高脂高糖動(dòng)物模型手術(shù)