e：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網(wǎng)膜電圖b波統(tǒng)計；scotopicamplitude：暗光測定峰值；flashintensity：閃光強度；a-wave：a波；b-wave：b波。圖6：光適應視網(wǎng)膜電圖(erg)檢測結(jié)果；圖中：a-b：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網(wǎng)膜電圖軌跡圖；c：20cd·s/m2光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應閃爍(flicker)視網(wǎng)膜電圖軌跡圖；d：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網(wǎng)膜電圖a波統(tǒng)計；e：不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網(wǎng)膜電圖b波統(tǒng)計；f：20cd·s/m2光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應閃爍(flicker)視網(wǎng)膜電圖統(tǒng)計。sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠；ctr是指野生型；het是指雜合子。圖7：視網(wǎng)膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠視網(wǎng)膜切片免疫組化染色結(jié)果；小鼠年齡：4個月；os：outer-segment(外節(jié))；is：inner-segment(內(nèi)節(jié))；onl：outernuclearlayer(外核層)；inl：innernuclearlayer(內(nèi)核層)；圖中：a：視網(wǎng)膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠視網(wǎng)膜石蠟切片的h&e染色結(jié)果，外核層及內(nèi)核層均變??；b：對不同部位的gm20541敲除鼠視網(wǎng)膜外核層厚度統(tǒng)計。圖8：視網(wǎng)膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠ihc染色結(jié)果。鹽酸阿霉素誘導心衰小鼠模型。江蘇基因敲除動物模型造模

    導師給我們上的堂課往往就是交代我們要詳細記好實驗記錄，只要是和實驗相關的，無論是照片，還是文字，必須要及時事無巨細地詳細記錄。并且要備份好每一份實驗記錄。我個人一般喜歡每天及時地記在「科研實驗記錄本」上面，然后拍照掃描成電子版儲存在電腦和云端。時間規(guī)劃首先，個人是不贊同每天24小時泡在實驗室的，高效率是關鍵。建議提前一天規(guī)劃好第二天需要做的事情，按照代辦事項的格式逐條列出，哪一個時間段需要做什么事情？這樣的好處有兩點，一個是自己提前把時間預約好，可以留出足夠的時間休息和娛樂；另一個是在執(zhí)行計劃的時候往往會有一種時間緊迫感，辦事起來往往更高效且不會遺漏?？傊?，預實驗就是迷你版正式實驗，希望小伙伴們在進行預實驗的時候一定要盡可能地準備周全，這樣才能快的推進正式實驗。云南小鼠動物模型建模膽管結(jié)扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型。

    但是目前對znf124的研究還處于初期階段，其小鼠同源基因為gm20541(predictedgene20541，mgi：5142006)，該基因位于小鼠17號染色體3，全長2750kb，其cdna全長1406bp，包含3個外顯子，其cdna序列如seqid所示，如下：gaatgcagtgacctatgatgatgtgtgtgtgaacttcactctggaagaatggactttactggatccttcacagaagagtctctacagagatgtgatgcaggaaacctacaggaatctcactgctataggctacaattgggaagatgacaatattgaagactattttcaaagttctagaagacatggaaggcatgaaagaaatcatagtggagagaaaccttatgcttgtaaccaatgtgataaagccttttcatgtcatcatagtctccaaatacataaaagaagacatactggagagaaactctatgaatgtaaccgttgtaataaaggctttccatatcccagtgctctacaaatacataaaaggatacacagtggagagaaaccctatgaatgtaaacaatgtggtaaagcctttgcatgtcacagttctcttcaaaggcatgaaagaatacatactggtgagaaaccttatgaatgtagccaatgtggtaaagcctttacacatcaaaagagtctccaaatacataaaagaactcacagtggagaaaaaccatatgggtgtagtcagtgtggaaaagactttgtaagtcagagtcgtcttctagaacataaaaggacacatactggagagaaaccctatgaatgtaaccaatgtggtaaagcctttgcatattccaacagtctccaaatacatcaaagaacacacactggagagaaaccctatgaatgtaaccagtgtggtaaagcctttgcatatcacaatagtctccaaatacata。

    缺點：該移植模型的原發(fā)出現(xiàn)與轉(zhuǎn)移發(fā)生之間時間間隔短，不利于藥物藥效研究;且細胞為鼠源，與人類有一定的差異。2異種移植模型異種移植模型是將人類的細胞或組織移植入免疫缺陷型實驗動物體內(nèi)。此模型一般采用免疫缺陷型小鼠，例如無胸腺裸鼠、CB17-SCID小鼠、NOD/SCID小鼠、NSG小鼠。一般來說，免疫缺陷程度越高，成瘤性越好。的相關研究中，人源細胞系異種移植(cell-line-derivedxenograft，CDX)模型和患者組織異種移植(patient-derivedxenograft，PDX)模型已得到廣泛應用。CDX模型方法：將5×106的人A375黑色素瘤細胞皮下注射NOD/SCID小鼠腹側(cè)的雙側(cè)，成功構(gòu)建黑色素瘤CDX模型。PDX模型方法：有研究者將93個新鮮的患者組織切成2×2×2mm3碎片的大小，皮下接種6周大的NOD/SCID雌性小鼠，建立PDX模型。優(yōu)點：保留了病人的組織學和遺傳學特征，可模擬潰瘍狀態(tài)對人類黑色素瘤預后的影響。缺點：此模型移植后的潛伏期長，連續(xù)傳代后鼠基質(zhì)被人類基質(zhì)替代，移植率可變，免疫系統(tǒng)受損，有移植物抗宿主病的可能性以及某些免疫細胞功能的缺乏。三、轉(zhuǎn)基因小鼠模型可以通過異位表達基因，引入特定的致突變或滅活抑制基因來對小鼠進行轉(zhuǎn)基因黑色素瘤模型的構(gòu)建。卵巢切除致骨質(zhì)疏松大鼠模型。

    3）基因/蛋白質(zhì)表達定性或定量檢測在進行分子檢測的過程中，保持核酸和蛋白質(zhì)的完整性至關重要，因此在取樣過程中，應盡量避免核酸及蛋白質(zhì)的降解。如不注意采樣過程，將會導致樣本中的核酸及蛋白質(zhì)的無差別降解，嚴重影響后續(xù)分子檢測結(jié)果。在條件允許的情況下，組織樣本在離體后應立刻裝入凍存管內(nèi)，并立即放入液氮中進行冷凍。在RNA提取樣本的保存過程中，可以選擇非冷凍型RNA保存液或Trizol試劑進行RNA酶的抑制。針對蛋白質(zhì)提取樣本的保存，我們同樣可以使用商品化的蛋白酶抑制劑進行短期處理。聚合酶鏈式反應（PolymeraseChainReaction，PCR）及免疫印跡（Westernblotting，WB），這兩種實驗手段是分子生物學檢測中不可或缺的一部分，也是發(fā)表論文至關重要的分子檢測數(shù)據(jù)。PCR主要用來對基因在基因組層面或轉(zhuǎn)錄層面的變化進行定性或定量檢測，而WB則主要用來對某一蛋白質(zhì)的表達進行定量檢測。（4）轉(zhuǎn)錄組學、蛋白質(zhì)組學及代謝組學檢測隨著檢測水平及相關產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展，各類組學檢測的價格降低，實驗設計中也常常運用組學檢測來提升實驗設計的檔次。在我們進行轉(zhuǎn)錄組學及蛋白質(zhì)組學的檢測過程中，同樣是要首先確保目標RNA或蛋白質(zhì)的片段完整性。面神經(jīng)受損而致面部表情肌群的運動功能障礙,對患者的心理和日常生活造成很大的影響。動物模型實驗

可以嚴格控制實驗條件，增強實驗材料的可比性。江蘇基因敲除動物模型造模

    準備碎冰和。把膜置于甲醇溶液中活化1分鐘，然后轉(zhuǎn)移至轉(zhuǎn)膜液中平衡3分鐘后備用。2、轉(zhuǎn)膜組裝轉(zhuǎn)膜三明治夾，這一步很關鍵，重要的是膠和膜之間不能有氣泡且膜與膠要保證貼合緊密(否則會翻車)，可以加多點轉(zhuǎn)膜液泡著。組裝好后加滿轉(zhuǎn)膜液，設置電源參數(shù)，我習慣恒流轉(zhuǎn)膜，200-280毫安，1-2小時，根據(jù)分子量定，如50KD的分子用60分鐘就夠了。如果一個電源帶兩個轉(zhuǎn)膜大槽即四塊膠，我就會用恒壓70-110V。這個過程重要的是做好降溫。這里簡單說一下蛋白分子量與玻璃板厚度，分離膠的濃度，轉(zhuǎn)膜電源參數(shù)的選擇問題。如果是能用1毫米的玻璃板就不用，因為轉(zhuǎn)膜是在電場的作用下蛋白分子從膠上遷移到膜上，1毫米膠的蛋白遷移距離要比。選擇更薄的膠蛋白轉(zhuǎn)膜時間可以減少，從而減少發(fā)熱，以免膠變形，條帶也會更好看。然后是分離膠的濃度，如果是150—200KD的分子選10%以下的的分離膠，200—300KD的選8%的,300KD以上的選6%的，小于30KD的200mA30分鐘，30-100KD的按分子量的數(shù)值算，如70KD，250mA70分鐘;100-150KD的250mA100分鐘;150—300KD的分子轉(zhuǎn)膜條件用280毫安(以上均是對于，)，120分鐘足矣，前提是膠的濃度相適應。五、封閉孵一抗1、封閉轉(zhuǎn)膜結(jié)束后。江蘇基因敲除動物模型造模