所用儀器為bio-rad的化學(xué)發(fā)光凝膠成像系統(tǒng)。結(jié)果見圖1中c和d,可以看出,通過免疫印跡(westernblot)的方法證明了gm20541蛋白在小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、心臟、腎臟以及脾中均有表達(dá)。實(shí)施例2本實(shí)施例以小鼠為目標(biāo)動(dòng)物,對本發(fā)明提供的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的構(gòu)建方法進(jìn)行說明,gm20541基因敲除的路線如圖2所示,具體操作如下:基因敲除小鼠獲取步驟:1將與小鼠gm20541基因同源的5’臂、含有報(bào)告基因gfp的表達(dá)框、有neo抗性基因的表達(dá)框、兩端有同向排列l(wèi)oxp位點(diǎn)的第3外顯子和3’端臂克隆到bac載體(圖2)以用于替換欲敲除的gm20541基因第3個(gè)外顯子;2利用dna同源重組技術(shù)將gm20541基因中的第3個(gè)外顯子替換,得到gm20541基因條件性敲除的小鼠胚胎干細(xì)胞;3利用步驟2得到的胚胎干細(xì)胞制備得到含gm20541基因敲除細(xì)胞的嵌合體小鼠(圖2);4將步驟3得到的嵌合體小鼠和野生型小鼠交配繁育,在后代中篩選出gm20541基因敲除的雜合子小鼠(圖2)。鑒定:實(shí)施例2中長距離pcr鑒定陽性子一代鼠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,擴(kuò)增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r,擴(kuò)增產(chǎn)物為。gm5’lrf:5’-ggcaggatcttcacctgttgaccaacatgcct-3’;sa3’r:5’-ccaaccccttcctcctacatagttggcagt-3’。結(jié)果見圖3中a。小鼠卵巢早衰POF模型。北京乳鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)
然后再入固定液,但要注意防止組織損傷。要熟悉采集部位。要能準(zhǔn)確的按解剖部位采集,如胰腺,一般取胰島較多的胰腺尾部;肺應(yīng)取有細(xì)支氣管及帶有軟骨片的小支氣管部。如果實(shí)驗(yàn)需進(jìn)行多組織樣本的采集,采集順序應(yīng)按照:消化,神經(jīng)系統(tǒng),皮膚,肌肉等的順序進(jìn)行。選好組織塊的切面。熟悉某些組織成分安排,然后決定其切面的走向;如一長管狀以橫切面較好。切除不需要的部分。特別是組織周圍的脂肪等,應(yīng)盡可能掉,否則給固定、脫水、浸蠟、切片等帶來一些不必要的問題。組織樣品的固定(1)固定的方法:①小塊組織固定法:從動(dòng)物取下的小塊組織,立即置入液態(tài)固定劑(這是應(yīng)用經(jīng)常的方法)。②注射/灌注固定法:某些組織塊由于體積過大或固定液極難滲入內(nèi)部或需要對整個(gè)臟器或整個(gè)動(dòng)物進(jìn)行固定,這時(shí)宜采用注射固定法,將固定液注入血管,經(jīng)血管分支到達(dá)整個(gè)組織和全身,從而得到充分的固定。另,空腔組織比如肺,肺內(nèi)含有空氣,固定液難以滲入,建議先做肺灌注,使得肺充盈滿固定液以后再進(jìn)行保存,如果空腔中氣體沒有有效排出,后續(xù)可能影響固定效果(沒有灌注的肺組織會(huì)浮在液體表面不利于固定,切片以后也會(huì)看到很多的空泡)。③蒸汽固定法:比較細(xì)小而薄的標(biāo)本。湖北動(dòng)物模型造模IgA腎病小鼠模型IgA 腎病是常見的原發(fā)性腎小球疾病,約占原發(fā)性腎小球疾病的 1/3。
或者是還包括為這種過程、方法、物品或者設(shè)備所固有的要素。在沒有更多限制的情況下,由語句“包括一個(gè)……”限定的要素,并不排除在包括所述要素的過程、方法、物品或者設(shè)備中還存在另外的相同要素。以下結(jié)合實(shí)施例對本實(shí)用新型的特征和性能作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。實(shí)施例1本實(shí)用新型提供一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng),包括功能設(shè)備集成底座1和設(shè)置在功能設(shè)備集成底座1上的飼養(yǎng)倉2,所述飼養(yǎng)倉2具有無極調(diào)控微負(fù)壓裝置、高原低氧環(huán)境模擬裝置、高原光照環(huán)境模擬裝置15、高原溫度環(huán)境模擬裝置16、高原濕度環(huán)境模擬裝置17、動(dòng)物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察單元18,所述飼養(yǎng)倉2內(nèi)設(shè)置有若干代謝籠3,飼養(yǎng)倉2前后箱體上設(shè)置有觀察窗4和若干操作窗5,飼養(yǎng)倉2左右箱體上分別設(shè)置有小物件傳遞窗6和大物件傳遞窗7,所述代謝籠3還包括設(shè)置在代謝籠3上的投料斗8、飲水瓶9和設(shè)置在代謝籠3下方的聚糞斗10、尿液排出口11、糞便排出口12。本實(shí)施例的工作原理:本裝置的各個(gè)功能均通過設(shè)置在飼養(yǎng)倉2上的功能控制面板19控制,本裝置外形采用304不銹鋼,具有良好的氣密性。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物送入飼養(yǎng)倉2內(nèi)部后,關(guān)閉小物件傳遞窗6和大物件傳遞窗7,通過功能控制面板19實(shí)現(xiàn)飼養(yǎng)倉2內(nèi)部環(huán)境模擬。
通過無極調(diào)控微負(fù)壓裝置來調(diào)節(jié)飼養(yǎng)倉2內(nèi)的壓力,通過高原低氧環(huán)境模擬裝置來調(diào)整飼養(yǎng)倉2內(nèi)氧含量,當(dāng)需要燈光時(shí),通過高原光照環(huán)境模擬裝置15開啟紫外燈以及照明燈,通過高原溫度環(huán)境模擬裝置16來進(jìn)行調(diào)溫,通過高原濕度環(huán)境模擬裝置17調(diào)節(jié)飼養(yǎng)倉2內(nèi)濕度,通過動(dòng)物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察單元18可以監(jiān)控動(dòng)物的行為,飼養(yǎng)倉2內(nèi)若干代謝籠3配備投料斗8、飲水瓶9可以進(jìn)行攝食量、飲水量測定,聚糞斗10、尿液排出口11、糞便排出口12便于模型動(dòng)物的尿液和糞便常規(guī)檢測,并且本系統(tǒng)設(shè)置的多個(gè)代謝籠3可以同時(shí)培養(yǎng)多種動(dòng)物,造模動(dòng)物多。實(shí)施例2在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng),所述無極調(diào)控微負(fù)壓裝置包括進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)13、排風(fēng)系統(tǒng)14和霍尼威爾或西門子調(diào)控模塊,所述進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)13設(shè)置在功能設(shè)備集成底座1內(nèi),所述排風(fēng)系統(tǒng)14設(shè)置在飼養(yǎng)倉2頂部。本實(shí)施例的工作原理:本系統(tǒng)進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)13內(nèi)集成有進(jìn)風(fēng)風(fēng)機(jī)單元、排風(fēng)系統(tǒng)14集內(nèi)成有排風(fēng)風(fēng)機(jī)單元。由于飼養(yǎng)倉2能夠密封,通過改變風(fēng)機(jī)風(fēng)量的方式來調(diào)節(jié)壓差,進(jìn)風(fēng)風(fēng)機(jī)單元和排風(fēng)風(fēng)機(jī)單元均與飼養(yǎng)倉2連通,通過調(diào)節(jié)進(jìn)、排風(fēng)的壓力差值,系統(tǒng)內(nèi)環(huán)境能夠形成(~)微負(fù)壓,系統(tǒng)配置霍尼威爾或西門子調(diào)控模塊。小鼠CLP盲腸穿孔致膿毒血癥模型。
實(shí)施例7在實(shí)施例6的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng),所述動(dòng)物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察單元18包括coms高清圖像采集系統(tǒng)、數(shù)字視頻傳輸系統(tǒng)、頻硬件解壓卡、視頻顯示系統(tǒng)。本實(shí)施例的工作原理:系統(tǒng)內(nèi)配置coms高清圖像采集系統(tǒng)(支持icp/ip網(wǎng)絡(luò)通訊協(xié)議)、數(shù)字視頻傳輸系統(tǒng)、頻硬件解壓卡(usb或pci接口用戶自選)、視頻顯示系統(tǒng)(用戶自備),保障了實(shí)驗(yàn)過程中實(shí)時(shí)監(jiān)控與實(shí)驗(yàn)結(jié)束后操作過程的溯源。例如,在飼養(yǎng)倉2上方裝高精密攝像頭,搭載手機(jī)app,可360°監(jiān)控動(dòng)物的行為,并能實(shí)時(shí)錄像,圖像采集等,通過監(jiān)控錄像來實(shí)現(xiàn)動(dòng)物學(xué)行為觀察。以上所述為本實(shí)用新型的較佳實(shí)施例而已,并不用以限制本實(shí)用新型,凡在本實(shí)用新型的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等,均應(yīng)包含在本實(shí)用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。博來霉素誘導(dǎo)急性肺損傷小鼠模型。云南腦定位動(dòng)物模型技術(shù)
用血管內(nèi)線栓阻斷法制備大鼠 MCAO模型。已被腦血管病研究者接受和采用。北京乳鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)
小鼠尾尖用酒精擦拭尾巴,引起輕微的血管擴(kuò)張;用無菌手術(shù)刀、刀片或鋒利的剪刀,快速截?cái)嘈∈笪布?-2毫米。如果需要多次采,之后每次需截除2-3毫米;從尾部像尾尖方向按摩,增加血流;用采集血液;結(jié)束后,按壓傷口或使用止血?jiǎng)﹣碇寡?;每次量大約可達(dá)。小鼠眼球取血單手保定好小鼠;必要時(shí)剪掉小鼠胡須,防止污染血液;輕壓取血側(cè)眼部皮膚,使眼球充血突出;用彎頭鑷夾取眼球并快速在摘?。煌瑫r(shí)用左手中指輕按小鼠心臟部位,以加快心臟泵血速度;當(dāng)血液流盡時(shí),用脫臼法處死小鼠;大鼠眼眶取血先將小鼠進(jìn)行麻醉,大鼠翻正反射消失時(shí)不在繼續(xù)麻醉;抗凝處理過的玻璃毛細(xì)采樣管,掰成2-3厘米長度;右手食指和拇指輕按眼眶兩側(cè)皮膚,使眼球突出,毛細(xì)管從內(nèi)側(cè)的眼球與眼瞼的縫隙處進(jìn)入,輕輕旋轉(zhuǎn)毛細(xì)管,稍微深入眼球后上方,血液流速快的時(shí)候4-5滴即可,溫柔的將毛細(xì)管取出;用棉簽按壓大鼠眼眶止血,每次可取血50-100微升,將血液放入冰盒中保存。小鼠心臟取血先將小鼠麻醉,稍靠右側(cè)平躺在手術(shù)板上固定;左側(cè)第三四根肋骨間觸摸心臟,跳動(dòng)明顯,慢慢進(jìn)針;針有回血停止進(jìn)針,開始取血;一次可以300到500微升,小鼠存活,放到加熱墊上待小鼠蘇醒后放入籠中。北京乳鼠動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)