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湖南兔動物模型培養(yǎng)

來源: 發(fā)布時間:2024-02-22

    所述外顯子序列為第3外顯子序列。進(jìn)一步地,在本發(fā)明的一些實施方案中,利用cre-loxp基因敲除技術(shù)敲除gm20541基因上的第3外顯子序列。上述敲除策略是采用cre-loxp敲除技術(shù)敲除gm20541基因。但在其他的實施例中,實現(xiàn)基因敲除的技術(shù)手段有很多,例如crispr/cas9技術(shù)、人工核酸酶介導(dǎo)的鋅指核酸酶技術(shù)(zinc-fingernucleases,zfn)、轉(zhuǎn)錄因子樣效應(yīng)物核酸酶技術(shù)(transceriptionactivator-likeeffectornucleases,talen)等。因此,在其他的實施例中采用crispr/cas9技術(shù)或其他的技術(shù)手段敲除gm20541基因,也是屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。進(jìn)一步地,在本發(fā)明的一些實施方案中,所述目標(biāo)動物為哺乳動物。進(jìn)一步地,在本發(fā)明的一些實施方案中,所述哺乳動物選自小鼠、大鼠、狗、豬、猴以及猿中的任意一種。需要說明是,本發(fā)明所述的目標(biāo)動物并不限于上述的動物,其他類型的哺乳動物也是可行,無論選用何種動物,只要是具有g(shù)m20541基因或其同源基因的動物,均可作為本發(fā)明所述構(gòu)建方法中的目標(biāo)動物,在其前體細(xì)胞中敲除gm20541基因,使其表現(xiàn)出視網(wǎng)膜色素變性性疾病特征,作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型,這也是屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。第二方面。好的動物模型能夠較好地模擬疾病狀態(tài),為的研究提供可能。湖南兔動物模型培養(yǎng)

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    靜置25分鐘后把酒精倒干,用吸水紙吸出多余的酒精,然后配壓縮膠,同樣的操作,關(guān)鍵是梳子要插得快,要小心梳子下產(chǎn)生氣泡,然后靜置30分鐘。如果是當(dāng)天跑膠,我會等上層膠凝2個小時再用,但要注意防干燥縮水,可以在一個小時的時候沿著梳子上緣加點電泳液。所以我一般提前一晚制膠,泡于純水或者電泳液里置于4度冰箱暫存。三、蛋白電泳1、上樣前準(zhǔn)備把膠組裝到電泳芯上,注意密閉性(否則漏液),如果內(nèi)槽漏液就不是勻強(qiáng)電場了,條帶可能就不是一條直線。然后內(nèi)槽倒?jié)M電泳液,拔梳子,這一步要小心,梳子要兩邊一起緩緩?fù)习纬?,然后觀察泳道內(nèi)有無脫落的膠?;蛘吣z絲,有的話用1毫升注射器吸出。然后從冰箱取出蛋白樣品,解凍。準(zhǔn)備振蕩器。2、上樣和電泳注意,上樣后蛋白會開始慢慢在膠中彌散,所以上樣越快越好。我習(xí)慣先上蛋白Marker,再上蛋白樣品,蛋白上樣前確保樣品完全解凍和充分振蕩(推薦使用振蕩器振蕩),吸的時候沒有拉絲即可,建議上樣分鐘把樣品從冰上取出來,不然樣品中SDS可能會結(jié)晶析出,從而影響電泳效果。上層膠80V25分鐘,下層膠120V65分鐘。四、轉(zhuǎn)膜1、轉(zhuǎn)膜前準(zhǔn)備我會在電泳結(jié)束0分鐘準(zhǔn)備,把轉(zhuǎn)膜液配好置于4度冰箱預(yù)冷,然后裁膜,準(zhǔn)備轉(zhuǎn)膜裝置。云南哪里有動物模型手術(shù)SD大鼠腦缺血模型建立。

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    疾病神經(jīng)系統(tǒng)疾病模型動物抗抑郁對腦突觸體攝取5-HT、NA、DA的抑制作用(樣品篩選、IC50測定)大鼠強(qiáng)迫游泳試驗(大/小鼠,Noduls軟件、視屏分析)大/小鼠小鼠懸尾試驗(Noduls軟件、視屏分析)小鼠5-羥色胺增強(qiáng)試驗小鼠利血平誘導(dǎo)眼瞼下垂試驗小鼠育亨賓毒性增強(qiáng)試驗小鼠高劑量阿撲拮抗小鼠大鼠慢性輕度不可預(yù)見性刺激(CUMS)模型大鼠新環(huán)境進(jìn)食抑制實驗大/小鼠小鼠腦內(nèi)單胺氧化酶MAO-A、MAO-B活性測定小鼠對新生大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用(谷氨酸損傷、過氧化氫損傷、缺糖缺氧損傷、損傷等)新生大鼠對SH-SY5Y細(xì)胞合成分泌BDNF的作用SH-SY5Y細(xì)胞抗驚厥育亨賓毒性增強(qiáng)試驗小鼠戊四唑驚厥小鼠荷包牡丹堿驚厥小鼠印防己驚厥小鼠抗焦慮與戊巴比妥類藥物的協(xié)同作用小鼠對巴比妥閾下劑量的影響小鼠再入睡試驗小鼠曠場實驗(大/小鼠,全程攝像監(jiān)控、軟件處理)大/小鼠大鼠高架十字迷宮法(全程攝像監(jiān)控、軟件處理)大鼠大鼠穿梭箱法(全程攝像監(jiān)控、軟件處理)大鼠抗帕金森氏癥抗帕金森氏癥6-羥多巴胺致大鼠帕金森病模型大鼠MPTP模型(雙側(cè)損毀PD模型)大/小鼠氧化震顫素致顫模型大/小鼠疼痛。

    準(zhǔn)備碎冰和。把膜置于甲醇溶液中活化1分鐘,然后轉(zhuǎn)移至轉(zhuǎn)膜液中平衡3分鐘后備用。2、轉(zhuǎn)膜組裝轉(zhuǎn)膜三明治夾,這一步很關(guān)鍵,重要的是膠和膜之間不能有氣泡且膜與膠要保證貼合緊密(否則會翻車),可以加多點轉(zhuǎn)膜液泡著。組裝好后加滿轉(zhuǎn)膜液,設(shè)置電源參數(shù),我習(xí)慣恒流轉(zhuǎn)膜,200-280毫安,1-2小時,根據(jù)分子量定,如50KD的分子用60分鐘就夠了。如果一個電源帶兩個轉(zhuǎn)膜大槽即四塊膠,我就會用恒壓70-110V。這個過程重要的是做好降溫。這里簡單說一下蛋白分子量與玻璃板厚度,分離膠的濃度,轉(zhuǎn)膜電源參數(shù)的選擇問題。如果是能用1毫米的玻璃板就不用,因為轉(zhuǎn)膜是在電場的作用下蛋白分子從膠上遷移到膜上,1毫米膠的蛋白遷移距離要比。選擇更薄的膠蛋白轉(zhuǎn)膜時間可以減少,從而減少發(fā)熱,以免膠變形,條帶也會更好看。然后是分離膠的濃度,如果是150—200KD的分子選10%以下的的分離膠,200—300KD的選8%的,300KD以上的選6%的,小于30KD的200mA30分鐘,30-100KD的按分子量的數(shù)值算,如70KD,250mA70分鐘;100-150KD的250mA100分鐘;150—300KD的分子轉(zhuǎn)膜條件用280毫安(以上均是對于,),120分鐘足矣,前提是膠的濃度相適應(yīng)。五、封閉孵一抗1、封閉轉(zhuǎn)膜結(jié)束后。膽管結(jié)扎誘導(dǎo)炎癥性肝損傷和肝纖維化小鼠模型。

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    實施例7在實施例6的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng),所述動物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察單元18包括coms高清圖像采集系統(tǒng)、數(shù)字視頻傳輸系統(tǒng)、頻硬件解壓卡、視頻顯示系統(tǒng)。本實施例的工作原理:系統(tǒng)內(nèi)配置coms高清圖像采集系統(tǒng)(支持icp/ip網(wǎng)絡(luò)通訊協(xié)議)、數(shù)字視頻傳輸系統(tǒng)、頻硬件解壓卡(usb或pci接口用戶自選)、視頻顯示系統(tǒng)(用戶自備),保障了實驗過程中實時監(jiān)控與實驗結(jié)束后操作過程的溯源。例如,在飼養(yǎng)倉2上方裝高精密攝像頭,搭載手機(jī)app,可360°監(jiān)控動物的行為,并能實時錄像,圖像采集等,通過監(jiān)控錄像來實現(xiàn)動物學(xué)行為觀察。以上所述為本實用新型的較佳實施例而已,并不用以限制本實用新型,凡在本實用新型的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等,均應(yīng)包含在本實用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。LPS脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型。西藏大鼠動物模型飼養(yǎng)

避免了在人身上進(jìn)行實驗所帶來的風(fēng)險。湖南兔動物模型培養(yǎng)

    SD大鼠腦缺血致腦梗死模型【材料】水合氯醛、線栓直徑(體重250-300g)【方法】1、10%水合氯醛(35mg/kg)腹腔注射麻醉。2、仰臥位固定,頸正中線切口,分離肌肉和筋膜,分離左側(cè)頸總動脈(CCA)、頸外動脈(ECA)和頸內(nèi)動脈(ICA)。3、微動脈夾暫時夾閉頸內(nèi)動脈(ICA),活扣結(jié)扎近心端頸總動脈(CCA)、頸外動脈(ECA)打雙結(jié),在雙結(jié)中間剪開小口插入線栓。4、將拴線插入到頸內(nèi)動脈(ICA),用眼科鑷輕推拴線,以頸外動脈(ECA)和頸內(nèi)動脈(ICA)分叉處為參考位置。5、栓線插入預(yù)刻深度,感到有阻力,說明栓線已到達(dá)腦中動脈(MCA),打結(jié)固定栓線。6、血管外的栓線不要留得過長,1h后拔出栓線,縫合傷口,單籠飼養(yǎng)觀察。注:前兩三天老鼠會萎靡,不進(jìn)食,注意不要,老鼠無死亡即可。湖南兔動物模型培養(yǎng)