可用鋨酸或甲醛蒸汽固定。主要用于血液或細胞涂片以及某些薄膜組織的固定。(2)固定的目的①保持其原有狀態(tài):使細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂肪、糖、酶等成分轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì),迅速防止組織、細胞的死后變化,防止自溶與,防止細胞過度收縮或膨脹而失去其原有形態(tài)結(jié)構(gòu),使之盡量保持生前的狀態(tài)和結(jié)構(gòu)。②以便染色后易于鑒別和觀察:不同組織成分對染料有不同的親和力,以便染色后易于鑒別和觀察。③使組織塊硬化,便于制作薄片(組織塊在脫水、包埋、切片、染色等過程中不易損壞)。(3)固定液固定液種類:一類是單純固定液,即只有一種試劑;另一類是混合固定液,由兩種或兩種以上試劑組成。作為較好的固定液,應(yīng)有下列特性,首先,有強滲透力,能迅速的滲入組織內(nèi)部;其次,不使組織過度收縮或膨脹,并能使組織內(nèi)欲觀察的成分得以凝固為不溶性物質(zhì);,能使組織達到一定的硬度并獲得較佳的折光率和對某些染料具有較強的親和力。固定液通常使用10%的甲醛溶液。特殊要求的組織,常需要特殊的固定液,取樣之前應(yīng)做好準備。如眼球樣本應(yīng)使用FAS眼球固定液,脂肪組織應(yīng)使用脂肪組織固定液等。此外,在進行骨組織樣本制備的時候,還應(yīng)注意提前進行脫鈣處理。小鼠CLP盲腸穿孔致膿毒血癥模型。湖北乳鼠動物模型
在人類疾病研究中數(shù)據(jù)表明,常用實驗動物模型按產(chǎn)生原因分為以下5類:自發(fā)性動物模型、誘發(fā)型動物模型、遺傳工程動物模型、生物醫(yī)學動物模型和陰性動物模型。下面上海研錄帶大家一起看看吧:1、自發(fā)性動物模型:是指動物未經(jīng)任何有意識的人工處理,在自然條件下或基因突變條件下所產(chǎn)生的疾病模型。主要包括突變型的遺傳病模型和近郊系的疾病模型。2、誘發(fā)型動物模型:亦稱實驗性動物模型。是使用物理、化學或生物致病因素誘導(dǎo)動物產(chǎn)生某些類似人類疾病表現(xiàn)而制備的動物模型。此模型具有制備方法簡單,實驗條件容易控制,重復(fù)性好等特點,廣泛應(yīng)用于藥物篩選、毒理、傳染病、病理機制的研究。3、遺傳工程動物模型:是利用遺傳工程技術(shù)對動物基因組進行修飾,用于研究基因功能或疾病機制的動物模型。也稱基因修飾動物模型,是指利用胚胎工程和基因工程等生物技術(shù)有目的的干預(yù)動物的遺傳組成,導(dǎo)致動物出現(xiàn)新的性狀,并使其能夠有效地遺傳下去,形成新的可供生命科學研究的和其他目的所用的動物模型。4、生物醫(yī)學動物模型:也是指利用健康生物的特定生物學特征,研究人類疾病相似表現(xiàn)得模型。這類動物模型與人類疾病存在一定的差異,研究者應(yīng)加以比較,從中獲得有關(guān)材料?;蚯贸齽游锬P团囵B(yǎng)肺泡上皮細胞及內(nèi)皮損傷,造成彌漫性肺間質(zhì)及肺泡水腫,導(dǎo)致的急性低氧性呼吸功能不全。
準備碎冰和。把膜置于甲醇溶液中活化1分鐘,然后轉(zhuǎn)移至轉(zhuǎn)膜液中平衡3分鐘后備用。2、轉(zhuǎn)膜組裝轉(zhuǎn)膜三明治夾,這一步很關(guān)鍵,重要的是膠和膜之間不能有氣泡且膜與膠要保證貼合緊密(否則會翻車),可以加多點轉(zhuǎn)膜液泡著。組裝好后加滿轉(zhuǎn)膜液,設(shè)置電源參數(shù),我習慣恒流轉(zhuǎn)膜,200-280毫安,1-2小時,根據(jù)分子量定,如50KD的分子用60分鐘就夠了。如果一個電源帶兩個轉(zhuǎn)膜大槽即四塊膠,我就會用恒壓70-110V。這個過程重要的是做好降溫。這里簡單說一下蛋白分子量與玻璃板厚度,分離膠的濃度,轉(zhuǎn)膜電源參數(shù)的選擇問題。如果是能用1毫米的玻璃板就不用,因為轉(zhuǎn)膜是在電場的作用下蛋白分子從膠上遷移到膜上,1毫米膠的蛋白遷移距離要比。選擇更薄的膠蛋白轉(zhuǎn)膜時間可以減少,從而減少發(fā)熱,以免膠變形,條帶也會更好看。然后是分離膠的濃度,如果是150—200KD的分子選10%以下的的分離膠,200—300KD的選8%的,300KD以上的選6%的,小于30KD的200mA30分鐘,30-100KD的按分子量的數(shù)值算,如70KD,250mA70分鐘;100-150KD的250mA100分鐘;150—300KD的分子轉(zhuǎn)膜條件用280毫安(以上均是對于,),120分鐘足矣,前提是膠的濃度相適應(yīng)。五、封閉孵一抗1、封閉轉(zhuǎn)膜結(jié)束后。
堿燒傷致角膜損傷大鼠模型一、服務(wù)信息1、動物模型名稱:堿燒傷致角膜損傷大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雌雄不限4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:160-200g6、實驗動物環(huán)境:SPF級二、服務(wù)項目服務(wù)編號服務(wù)內(nèi)容服務(wù)周期價錢DH2020堿燒傷致角膜損傷大鼠模型1周詢價1、實驗方法:氫氧化鈉致大鼠角膜化學性損傷。大鼠用戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,用干棉棒拭去結(jié)膜囊多余液體,將統(tǒng)一規(guī)格直徑3mm的圓形濾紙片浸入1mol/LNaOH溶液中20s,飽和后取出置于干燥濾紙上1秒以吸去過多的堿液,將濾紙片貼敷于大鼠右眼角膜90s后移去,立即用滅菌水沖洗結(jié)膜囊及角膜2min。2、檢測標準:肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。三、交付標準:1.提供動物模型構(gòu)建過程中的原始實驗記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動物或相關(guān)組織材料。四、服務(wù)項目說明:1、如有特殊要求,請另詢價。2、雙方簽訂合同后,收取70%首付后啟動實驗。臨床上平時不易見到的疾病可用動物隨時復(fù)制出來。
brain:腦組織;liver:肝臟;retina:視網(wǎng)膜,intestine:腸;muscle:肌肉;heart:心臟;kidney:腎臟;spleen:脾;b:圖1中a的統(tǒng)計結(jié)果;c:westernblot檢測gm20541蛋白在不同組織的表達;d:圖1中c的統(tǒng)計結(jié)果。圖2:gm20541基因敲除小鼠的構(gòu)建路線;圖中sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖3:中長距離pcr鑒定子一代鼠的結(jié)果;圖中:a:擴增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r,擴增產(chǎn)物為;其中a2,3,6,9,10,b1為陽性;b:擴增3’端長臂使用引物對neof和gm3’lrr,擴增產(chǎn)物為。其中:a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子,+/+為野生型對照。圖4:gm20541基因敲除小鼠的鑒定;a:gm20541基因敲除小鼠的基因型鑒定結(jié)果;b:實時定量pcr實驗分析gm20541敲除小鼠視網(wǎng)膜中基因敲除效率,證明gm20541在敲除小鼠視網(wǎng)膜中不再表達;sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖5:暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖(electroretinogram,erg)檢測結(jié)果;圖中:a-c:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖軌跡圖;d:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖a波統(tǒng)計。通過建立腦缺血-再灌注動物模型,模擬人類ICVD的病理過程。上海實驗動物模型實驗室
可以克服人類某些疾病潛伏期長,病程長和發(fā)病率低的缺點。湖北乳鼠動物模型
導(dǎo)師給我們上的堂課往往就是交代我們要詳細記好實驗記錄,只要是和實驗相關(guān)的,無論是照片,還是文字,必須要及時事無巨細地詳細記錄。并且要備份好每一份實驗記錄。我個人一般喜歡每天及時地記在「科研實驗記錄本」上面,然后拍照掃描成電子版儲存在電腦和云端。時間規(guī)劃首先,個人是不贊同每天24小時泡在實驗室的,高效率是關(guān)鍵。建議提前一天規(guī)劃好第二天需要做的事情,按照代辦事項的格式逐條列出,哪一個時間段需要做什么事情?這樣的好處有兩點,一個是自己提前把時間預(yù)約好,可以留出足夠的時間休息和娛樂;另一個是在執(zhí)行計劃的時候往往會有一種時間緊迫感,辦事起來往往更高效且不會遺漏??傊?,預(yù)實驗就是迷你版正式實驗,希望小伙伴們在進行預(yù)實驗的時候一定要盡可能地準備周全,這樣才能快的推進正式實驗。湖北乳鼠動物模型