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北京豚鼠動(dòng)物模型手術(shù)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-01-15

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    根據(jù)gm20541的cdna序列設(shè)計(jì)引物:gm20541-cdna-f:5’-tcggtctcatcttcattccc-3';gm20541-cdna-r:5’-ggaaggctctgttccggtat-3';(g)以提取的cdna為模板,進(jìn)行rt-pcr。擴(kuò)增后進(jìn)行電泳。結(jié)果見(jiàn)圖4中b,可以看出,通過(guò)rt-pcr方法檢測(cè)gm20541在gm20541基因敲除純合子小鼠的視網(wǎng)膜中表達(dá)量降低。圖4的b中ctrl是指野生型對(duì)照,sixko是指gm20541基因敲除純合子小鼠;gm20541rnalevel是指rna表達(dá)水平相對(duì)變化,以野生型表達(dá)水平為1。實(shí)施例3對(duì)4月齡的gm20541基因敲除純合子小鼠進(jìn)行erg視力檢測(cè):1暗適應(yīng)動(dòng)物應(yīng)整夜暗適應(yīng),環(huán)境應(yīng)做到?jīng)]有光線;2次日麻醉:稱重,腹腔內(nèi)注射;宜深度麻醉;3動(dòng)物固定及散瞳:麻醉完成后,在暗紅光照明下將小鼠用膠帶固定在動(dòng)物試驗(yàn)平臺(tái)的前方:需保證小鼠正"趴",即相對(duì)于閃光刺激器的刺激口,雙眼高度一致,充分暴露,滴加散瞳劑。4電極安裝:將視網(wǎng)膜電圖儀(espionvisualelectrophysiologysystem,diagnosysllc,littleton,ma,usa)預(yù)熱后,在耳夾電極涂上導(dǎo)電膏,夾尾巴,插入放大器“地”接口;雙頭的針電極插入后頸皮(大約在兩耳中間),同時(shí)接兩個(gè)通道的“負(fù)”接口;金環(huán)電極夾在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺(tái)的電極支架上,仔細(xì)調(diào)整其角度。寧夏哪里有動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)室通過(guò)博來(lái)霉素誘導(dǎo)的肺炎樣癥狀及肺纖維化癥狀模型為研究ALL的有效措施提供理想的動(dòng)物模型。

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    結(jié)果發(fā)現(xiàn)在這些組織中,gm20541均有表達(dá),說(shuō)明該基因可能在體內(nèi)發(fā)揮重要功能。2采用免疫印跡(westernblot)的方法檢測(cè)gm20541基因在不同組織中的表達(dá)。方法:(1)分別獲取小鼠腦、肝臟、視網(wǎng)膜、心臟、腎臟以及脾,充分研磨后加入200μl蛋白裂解液ripa。(2)超聲破碎細(xì)胞后,在冰上裂解20min。(3)4℃,16000g離心10min后,取上清轉(zhuǎn)移至另一干凈離心管,加入50μl的蛋白上樣液,混勻后95℃加熱5min。(4)待樣本冷卻后,分別取20μl,160v電壓進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳(sds-page)以分離蛋白。(5)sds-page結(jié)束后,根據(jù)需要,裁剪適當(dāng)大小的硝酸纖維素膜,按順序鋪上濾紙、膠、硝酸纖維素膜及濾紙,并趕去氣泡,轉(zhuǎn)膜槽放入冰水浴中,采用恒流,轉(zhuǎn)膜2h。(6)轉(zhuǎn)膜完畢后,純水沖洗硝酸纖維素膜一遍,晾干并標(biāo)記。然后用8%的脫脂牛奶封閉2h。(7)封閉完成后,加入一定量的按一定比例(按照抗體使用說(shuō)明書(shū))稀釋于封閉液的一抗,4℃孵育過(guò)夜。(8)回收一抗,1×tbst緩沖液洗膜4次,每次10min,根據(jù)一抗來(lái)源,選擇合適二抗,用1×tbst稀釋辣根過(guò)氧化氫酶(hrp)標(biāo)記的二抗,室溫于搖床上孵育2h。(9)二抗孵育結(jié)束后,用1×tbst洗膜3次,每次10min,用thermo的elc發(fā)光試劑盒檢測(cè)蛋白。

    IgA腎病小鼠模型【目的】建立IgA腎病小鼠模型,并觀察模型的生化及病理指標(biāo)特點(diǎn)。【材料】1、酸化水:鹽酸調(diào)滅菌水;2、蓖麻油+CCl4:5:1配制;3、LPS:;4、血清白蛋白BSA:800mg/kg用量,滅菌水配制;【方法】小鼠BSA+CCl4+脂多糖LPS誘導(dǎo)法1、20g小鼠牛血清白蛋白BSA(800mg/kg)隔天灌胃1次,配制160mg/ml,灌胃100ul/只,持續(xù)8周;2、同時(shí)皮下注射蓖麻油和CCl4(5:1),1次/周,持續(xù)8周;3、分別于第6、8周以()尾靜脈注射LPS,1次/周;4、每?jī)芍苋?4h尿液一次觀察尿蛋白及紅細(xì)胞;5、每日觀察精神、飲食、大小便,第9周處死,取血和腎、肝做相應(yīng)檢查;6、取尿液后2000r/min離心10min,取上清用全自動(dòng)生化儀檢測(cè)尿蛋白肌酐比值,鏡下觀察尿沉渣中有無(wú)紅細(xì)胞。LPS脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型。

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    代謝組學(xué)的研究對(duì)象大都是相對(duì)分子量在1000以內(nèi)的小分子物質(zhì),因此常用的血液樣本在取樣后,應(yīng)小心操作,防止溶血,盡快分離出血清,分置于溫環(huán)境下保存。由于用于病理實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物組織采集相對(duì)其他樣品的采集,操作更繁瑣,在處理過(guò)程中許多細(xì)節(jié)容易忽略,造成數(shù)據(jù)不完美(甚至不能用)。因此接下來(lái)將重點(diǎn)介紹組織樣品采集的注意事項(xiàng)及其固定。組織樣品采集注意事項(xiàng)組織應(yīng)新鮮,操作時(shí)間盡可能短,否則細(xì)胞發(fā)生死后變化、自融及現(xiàn)象。是動(dòng)物心臟還在跳動(dòng)時(shí)采集,樣本取出后在5分鐘以內(nèi)置于固定液內(nèi),避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣環(huán)境中。組織塊盡量小而薄。組織塊的厚度以不超過(guò)5mm為宜,較為理想的厚度為2mm左右,主要目的是使固定液迅速而均勻的滲入組織塊內(nèi)部。勿使組織塊受擠壓。在采集過(guò)程中,應(yīng)盡量選擇較為鋒利的手術(shù)器械,如手術(shù)刀片等,避免操作過(guò)程中擠壓挫傷標(biāo)本。擠壓過(guò)的組織均不可用。固定液的量一般以組織塊大小的20倍為宜,組織能夠在容器內(nèi)自由移動(dòng)。盡量保持組織的原有形態(tài)。新鮮組織經(jīng)固定后,或多或少產(chǎn)生收縮現(xiàn)象(如胃腸),為此可將組織展平,以盡可能維持原形。保持組織清潔。組織塊上如有血液、污物、粘液、食物、糞便等,可用生理鹽水沖洗。長(zhǎng)期攝入酒精致慢性酒精性肝病,建立酒精肝大鼠模型。湖南高脂高糖動(dòng)物模型技術(shù)

SD大鼠腦缺血模型建立。北京豚鼠動(dòng)物模型手術(shù)

    D-半乳糖致老年癡呆大鼠模型一、服務(wù)信息1、動(dòng)物模型名稱:D-半乳糖致老年癡呆大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:成年鼠5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:180g-220g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)二、服務(wù)項(xiàng)目服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)周期價(jià)錢DH2009D-半乳糖致老年癡呆大鼠模型8周詢價(jià)1、實(shí)驗(yàn)方法:D-半乳糖誘導(dǎo)(大鼠按)(注:每天1次,連續(xù)6-7周。)2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):①SOD明顯下降、MDA明顯增加;②水迷宮試驗(yàn)顯示學(xué)習(xí)記憶能力下降;③腦組織神經(jīng)元數(shù)目減少。三、交付標(biāo)準(zhǔn):1.提供動(dòng)物模型構(gòu)建過(guò)程中的原始實(shí)驗(yàn)記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動(dòng)物或相關(guān)組織材料。四、服務(wù)項(xiàng)目說(shuō)明:1、如有特殊要求,請(qǐng)另詢價(jià)。2、雙方簽訂合同后,收取70%首付后啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)。北京豚鼠動(dòng)物模型手術(shù)