可用鋨酸或甲醛蒸汽固定。主要用于血液或細(xì)胞涂片以及某些薄膜組織的固定。(2)固定的目的①保持其原有狀態(tài):使細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂肪、糖、酶等成分轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì),迅速防止組織、細(xì)胞的死后變化,防止自溶與,防止細(xì)胞過(guò)度收縮或膨脹而失去其原有形態(tài)結(jié)構(gòu),使之盡量保持生前的狀態(tài)和結(jié)構(gòu)。②以便染色后易于鑒別和觀察:不同組織成分對(duì)染料有不同的親和力,以便染色后易于鑒別和觀察。③使組織塊硬化,便于制作薄片(組織塊在脫水、包埋、切片、染色等過(guò)程中不易損壞)。(3)固定液固定液種類:一類是單純固定液,即只有一種試劑;另一類是混合固定液,由兩種或兩種以上試劑組成。作為較好的固定液,應(yīng)有下列特性,首先,有強(qiáng)滲透力,能迅速的滲入組織內(nèi)部;其次,不使組織過(guò)度收縮或膨脹,并能使組織內(nèi)欲觀察的成分得以凝固為不溶性物質(zhì);,能使組織達(dá)到一定的硬度并獲得較佳的折光率和對(duì)某些染料具有較強(qiáng)的親和力。固定液通常使用10%的甲醛溶液。特殊要求的組織,常需要特殊的固定液,取樣之前應(yīng)做好準(zhǔn)備。如眼球樣本應(yīng)使用FAS眼球固定液,脂肪組織應(yīng)使用脂肪組織固定液等。此外,在進(jìn)行骨組織樣本制備的時(shí)候,還應(yīng)注意提前進(jìn)行脫鈣處理。缺血性腦血管病(ICVD)是威脅人類健康與生存的主要疾病之一。兔動(dòng)物模型造模
再向老師、師兄師姐學(xué)習(xí)經(jīng)驗(yàn)和技術(shù),如果實(shí)驗(yàn)平臺(tái)的儀器需要提前預(yù)約,建議提前規(guī)劃好使用的時(shí)間。反復(fù)總結(jié)尋找答案在整個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中可能會(huì)出現(xiàn)很多問(wèn)題。比如造模效果欠佳、灌胃操作不當(dāng)、腹腔注射操作失誤、物使用不當(dāng)?shù)纫饎?dòng)物死亡。每遇到問(wèn)題都需要自己想辦法解決,可以從導(dǎo)師、師兄師姐、文獻(xiàn)、貼吧、視頻教程等找到答案。比如筆者曾遇到同樣的物給藥,發(fā)現(xiàn)有的大鼠麻醉得很深,有的大鼠還活蹦亂跳,在反復(fù)嘗試調(diào)整濃度,給藥劑量,更換麻醉方式,后來(lái)才發(fā)現(xiàn)是動(dòng)物體重秤的準(zhǔn)度有問(wèn)題,導(dǎo)致體重秤得不準(zhǔn)。因此,需要自己反復(fù)琢磨到底是實(shí)驗(yàn)過(guò)程中哪一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問(wèn)題,逐一排除。也要求在每一個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟需要標(biāo)準(zhǔn)化,統(tǒng)一化,盡可能的排除干擾因素,這樣方便在遇到問(wèn)題快的找到答案。同時(shí),建議每日總結(jié),大到動(dòng)物死亡原因分析,小到灌胃操作耗時(shí)多長(zhǎng)時(shí)間。建議反復(fù)總結(jié)出每天實(shí)驗(yàn)的優(yōu)缺點(diǎn)。做任何一個(gè)操作之前,建議提前腦海中反復(fù)模擬,準(zhǔn)備好相關(guān)工具和試劑,避免臨用之際缺少藥的,影響實(shí)驗(yàn)操作節(jié)奏和個(gè)人心情。筆者曾經(jīng)灌胃操作的時(shí)候發(fā)現(xiàn)藥物竟然忘帶了,只好重新回實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備,那真叫一個(gè)郁悶。仔細(xì)記錄每日實(shí)驗(yàn)過(guò)程無(wú)論是碩士還是博士。云南實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型動(dòng)物模型的優(yōu)越性主要表現(xiàn)在以下幾下方面。
可在設(shè)定的壓差標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)無(wú)極調(diào)控,以保障系統(tǒng)對(duì)海拔(3000m~7000m)的微負(fù)壓進(jìn)行模擬。并且,進(jìn)排風(fēng)風(fēng)管裝有高效空氣過(guò)濾器,使進(jìn)入飼養(yǎng)倉(cāng)2的氣體潔凈。實(shí)施例3在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng),所述高原低氧環(huán)境模擬裝置包括惰性氣源,所述惰性氣源與進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)13連接,所述惰性氣源與進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)13之間設(shè)置有比例式氣閥,還包括設(shè)置在飼養(yǎng)倉(cāng)2內(nèi)的嵌入式氧測(cè)定儀。本實(shí)施例的工作原理:惰性氣源可以是惰性氣體儲(chǔ)備罐或者是液態(tài)惰性氣體儲(chǔ)備罐。在模擬低氧環(huán)境時(shí),外接惰性氣體儲(chǔ)備罐連接進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)13。比例式氣閥和嵌入式氧測(cè)定儀均與功能控制面板19連接,通過(guò)功能控制面板19上的氧濃度表顯示濃度來(lái)調(diào)節(jié)比例式氣閥,通過(guò)加惰性氣體來(lái)來(lái)實(shí)現(xiàn)降低氧氣濃度。當(dāng)倉(cāng)體內(nèi)的氧氣濃度較高時(shí),手動(dòng)打開(kāi)惰性氣體儲(chǔ)備罐與進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)之間的氣閥,調(diào)節(jié)惰性氣體進(jìn)入量,使倉(cāng)體內(nèi)氧氣濃度降低,觀察控制面板上的氧濃度顯示,調(diào)整氣閥開(kāi)度大小,達(dá)到需求的氧濃度,以此調(diào)節(jié)實(shí)現(xiàn)高原缺氧環(huán)境的模擬。本技術(shù)方案采用的惰性氣體為對(duì)生命體無(wú)危害的惰性氣體。實(shí)施例4在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng)。
飼養(yǎng)倉(cāng)左右箱體上分別設(shè)置有小物件傳遞窗和大物件傳遞窗,所述代謝籠還包括設(shè)置在代謝籠上的投料斗、飲水瓶和設(shè)置在代謝籠下方的聚糞斗、尿液排出口、糞便排出口。進(jìn)一步地,所述無(wú)極調(diào)控微負(fù)壓裝置包括進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)、排風(fēng)系統(tǒng)和霍尼威爾或西門子調(diào)控模塊,所述進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)設(shè)置在功能設(shè)備集成底座內(nèi),所述排風(fēng)系統(tǒng)設(shè)置在飼養(yǎng)倉(cāng)頂部。進(jìn)一步地,所述高原低氧環(huán)境模擬裝置包括惰性氣源,所述惰性氣源與進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)連接,所述惰性氣源與進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)之間設(shè)置有比例式氣閥,還包括設(shè)置在飼養(yǎng)倉(cāng)內(nèi)的嵌入式氧測(cè)定儀。進(jìn)一步地,所述高原光照環(huán)境模擬裝置包括可見(jiàn)暖光系統(tǒng)和照明亮度無(wú)極控制系統(tǒng),所述可見(jiàn)暖光系統(tǒng)設(shè)置飼養(yǎng)倉(cāng)頂部。進(jìn)一步地,所述高原溫度環(huán)境模擬裝置包括降溫系統(tǒng)、升溫系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)和溫度采集顯示系統(tǒng)。進(jìn)一步地,所述高原濕度環(huán)境模擬裝置包括加濕系統(tǒng)、除濕系統(tǒng)、濕度控制系統(tǒng)和濕度采集顯示系統(tǒng)。進(jìn)一步地,所述動(dòng)物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察單元包括coms高清圖像采集系統(tǒng)、數(shù)字視頻傳輸系統(tǒng)、頻硬件解壓卡、視頻顯示系統(tǒng)。綜上所述,由于采用了上述技術(shù)方案,本實(shí)用新型的有益效果是:1、本實(shí)用新型非全自動(dòng)控制系統(tǒng),需要人為觀察并手動(dòng)調(diào)節(jié)隔離器內(nèi)部環(huán)境。SD大鼠腦缺血模型建立。
本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)工程技術(shù)領(lǐng)域,具體而言,涉及一種利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法和應(yīng)用。背景技術(shù):視網(wǎng)膜色素變性(retinitispigmentosa,rp)是一組視網(wǎng)膜光感受器異常導(dǎo)致的遺傳性致盲眼底病,在全世界的發(fā)病率約為1/3000~1/4000,而在中國(guó)人群的發(fā)病率可達(dá)1/3500,由于我國(guó)人口眾多,rp患者可達(dá)三十萬(wàn)之眾,給家庭和社會(huì)帶來(lái)了沉重的負(fù)擔(dān)。目前針對(duì)rp的診斷和面臨許多困難,尚無(wú)有效的手段,這主要?dú)w因于其在臨床表型和遺傳上具有高度的異質(zhì)性,針對(duì)其病理機(jī)制系統(tǒng)研究不足。典型的rp患者早由于視桿細(xì)胞功能缺陷而出現(xiàn)夜盲和視野狹窄,逐步發(fā)展為管狀視野,直至失明;眼底檢查可見(jiàn)視網(wǎng)膜色素沉著。在病理學(xué)方面,典型的rp主要影響視桿細(xì)胞,造成視桿細(xì)胞死亡并繼發(fā)視錐細(xì)胞死亡,主要表現(xiàn)為光感受器受損、變性,視網(wǎng)膜外核層逐漸變薄直至消失,視網(wǎng)膜外網(wǎng)層及其他相關(guān)細(xì)胞層出現(xiàn)相應(yīng)病理改變。此外,由于rp在臨床表型和遺傳模式上均具有高度的異質(zhì)性,導(dǎo)致許多的rp致病機(jī)制尚不清楚,這為rp疾病的臨床診斷帶來(lái)極大困難,因此針對(duì)rp疾病的致病機(jī)制研究迫在眉睫。而目前,缺乏相應(yīng)的rp疾病模型。通過(guò)截?cái)啻笫竺娌可窠?jīng)致面癱模型的建立。江蘇高脂高糖動(dòng)物模型建模
由于大鼠面神經(jīng)與人類相似,易于暴露.因此通過(guò)大鼠面神經(jīng)損傷致癱的模型制作方法為研究者提供更多的思路。兔動(dòng)物模型造模
靜置25分鐘后把酒精倒干,用吸水紙吸出多余的酒精,然后配壓縮膠,同樣的操作,關(guān)鍵是梳子要插得快,要小心梳子下產(chǎn)生氣泡,然后靜置30分鐘。如果是當(dāng)天跑膠,我會(huì)等上層膠凝2個(gè)小時(shí)再用,但要注意防干燥縮水,可以在一個(gè)小時(shí)的時(shí)候沿著梳子上緣加點(diǎn)電泳液。所以我一般提前一晚制膠,泡于純水或者電泳液里置于4度冰箱暫存。三、蛋白電泳1、上樣前準(zhǔn)備把膠組裝到電泳芯上,注意密閉性(否則漏液),如果內(nèi)槽漏液就不是勻強(qiáng)電場(chǎng)了,條帶可能就不是一條直線。然后內(nèi)槽倒?jié)M電泳液,拔梳子,這一步要小心,梳子要兩邊一起緩緩?fù)习纬?,然后觀察泳道內(nèi)有無(wú)脫落的膠?;蛘吣z絲,有的話用1毫升注射器吸出。然后從冰箱取出蛋白樣品,解凍。準(zhǔn)備振蕩器。2、上樣和電泳注意,上樣后蛋白會(huì)開(kāi)始慢慢在膠中彌散,所以上樣越快越好。我習(xí)慣先上蛋白Marker,再上蛋白樣品,蛋白上樣前確保樣品完全解凍和充分振蕩(推薦使用振蕩器振蕩),吸的時(shí)候沒(méi)有拉絲即可,建議上樣分鐘把樣品從冰上取出來(lái),不然樣品中SDS可能會(huì)結(jié)晶析出,從而影響電泳效果。上層膠80V25分鐘,下層膠120V65分鐘。四、轉(zhuǎn)膜1、轉(zhuǎn)膜前準(zhǔn)備我會(huì)在電泳結(jié)束0分鐘準(zhǔn)備,把轉(zhuǎn)膜液配好置于4度冰箱預(yù)冷,然后裁膜,準(zhǔn)備轉(zhuǎn)膜裝置。兔動(dòng)物模型造模