可用鋨酸或甲醛蒸汽固定。主要用于血液或細胞涂片以及某些薄膜組織的固定。(2)固定的目的①保持其原有狀態(tài):使細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂肪、糖、酶等成分轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì),迅速防止組織、細胞的死后變化,防止自溶與,防止細胞過度收縮或膨脹而失去其原有形態(tài)結(jié)構(gòu),使之盡量保持生前的狀態(tài)和結(jié)構(gòu)。②以便染色后易于鑒別和觀察:不同組織成分對染料有不同的親和力,以便染色后易于鑒別和觀察。③使組織塊硬化,便于制作薄片(組織塊在脫水、包埋、切片、染色等過程中不易損壞)。(3)固定液固定液種類:一類是單純固定液,即只有一種試劑;另一類是混合固定液,由兩種或兩種以上試劑組成。作為較好的固定液,應有下列特性,首先,有強滲透力,能迅速的滲入組織內(nèi)部;其次,不使組織過度收縮或膨脹,并能使組織內(nèi)欲觀察的成分得以凝固為不溶性物質(zhì);,能使組織達到一定的硬度并獲得較佳的折光率和對某些染料具有較強的親和力。固定液通常使用10%的甲醛溶液。特殊要求的組織,常需要特殊的固定液,取樣之前應做好準備。如眼球樣本應使用FAS眼球固定液,脂肪組織應使用脂肪組織固定液等。此外,在進行骨組織樣本制備的時候,還應注意提前進行脫鈣處理。博來霉素誘導急性肺損傷小鼠模型。高脂高糖動物模型造模
首先,預實驗必須要當做正式實驗來對待(態(tài)度要放端正,這是必須的)。預實驗的每一步都需要詳細規(guī)劃,多方籌謀。不論是實驗動物的選擇,還是檢測試劑的購買,都盡量和正式實驗統(tǒng)一標準。建議大家先把所有試劑和藥物購買完畢后,再去購買實驗動物。因為動物會長胖,長胖后給藥劑量就要增加,不僅多花錢,并且還容易影響實驗效果。筆者曾經(jīng)提前將實驗動物買回,但因為特殊原因沒能購買到造模藥物,終只能忍痛割愛將動物贈送他人,白白虧了一筆血汗錢(那批老鼠在我這兒白吃白喝長得太胖,沒辦法用作造模)。動物及試劑購買首先需要考慮:實驗動物品種、體重、性別、周齡(通常根據(jù)既往文獻報道可以獲得答案)、數(shù)量(需要考慮到實驗有一定動物死亡率或者動物本身會打架互毆,因此需要提前購買足夠的動物)。動物購買的途徑、安置的地點,飲食管理(一般實驗室會有動物房,也可以從其他地方購買),動物免疫證明、倫理證明需要提前準備好。實驗相關(guān)的試劑和藥物:比如造模藥物和器械,動物干預所需藥物,陽物選擇及購買(有些藥物購買很困難,必須通過特殊程序才能買到)。如果涉及到有創(chuàng)操作,要提前準備好物(建議提前購買),手術(shù)器械。需要了解自身實驗平臺能完成哪些技術(shù)。北京腦定位動物模型造模脂多糖(LPS)聯(lián)合煙熏法致慢性阻塞性肺部疾病小鼠模型。
17-高原濕度環(huán)境模擬裝置,18-動物行為學遠程觀察單元,19-功能控制面板。具體實施方式為了使本實用新型的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點更加清楚明白,以下結(jié)合附圖及實施例,對本實用新型進行進一步詳細說明。應當理解,此處所描述的具體實施例用以解釋本實用新型,并不用于限定本實用新型,即所描述的實施例是本實用新型一部分實施例,而不是全部的實施例。通常在此處附圖中描述和示出的本實用新型實施例的組件可以以各種不同的配置來布置和設計。因此,以下對在附圖中提供的本實用新型的實施例的詳細描述并非旨在限制要求保護的本實用新型的范圍,而是表示本實用新型的選定實施例。基于本實用新型的實施例,本領(lǐng)域技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動的前提下所獲得的所有其他實施例,都屬于本實用新型保護的范圍。需要說明的是,術(shù)語“”和“第二”等之類的關(guān)系術(shù)語用來將一個實體或者操作與另一個實體或操作區(qū)分開來,而不一定要求或者暗示這些實體或操作之間存在任何這種實際的關(guān)系或者順序。而且,術(shù)語“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含,從而使得包括一系列要素的過程、方法、物品或者設備不包括那些要素,而且還包括沒有明確列出的其他要素。
e:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網(wǎng)膜電圖b波統(tǒng)計;scotopicamplitude:暗光測定峰值;flashintensity:閃光強度;a-wave:a波;b-wave:b波。圖6:光適應視網(wǎng)膜電圖(erg)檢測結(jié)果;圖中:a-b:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網(wǎng)膜電圖軌跡圖;c:20cd·s/m2光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應閃爍(flicker)視網(wǎng)膜電圖軌跡圖;d:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網(wǎng)膜電圖a波統(tǒng)計;e:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應視網(wǎng)膜電圖b波統(tǒng)計;f:20cd·s/m2光強下gm20541基因敲除小鼠的光適應閃爍(flicker)視網(wǎng)膜電圖統(tǒng)計。sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖7:視網(wǎng)膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠視網(wǎng)膜切片免疫組化染色結(jié)果;小鼠年齡:4個月;os:outer-segment(外節(jié));is:inner-segment(內(nèi)節(jié));onl:outernuclearlayer(外核層);inl:innernuclearlayer(內(nèi)核層);圖中:a:視網(wǎng)膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠視網(wǎng)膜石蠟切片的h&e染色結(jié)果,外核層及內(nèi)核層均變??;b:對不同部位的gm20541敲除鼠視網(wǎng)膜外核層厚度統(tǒng)計。圖8:視網(wǎng)膜前體細胞特異敲除gm20541基因小鼠ihc染色結(jié)果。可以簡化實驗操作和樣品收集。
中風模型)股動脈內(nèi)皮損傷模型頸動脈結(jié)扎或部分結(jié)扎術(shù)深靜脈血栓模型下肢缺血模型門腔靜脈分流術(shù)左、右心血流動力學測試左心系統(tǒng)測壓右心系統(tǒng)測壓腹部手術(shù)膽管結(jié)扎術(shù)胃大部切除術(shù)小腸部分切除術(shù)急性腎衰模型單側(cè)腎切除術(shù)3/4腎切除術(shù)5/6腎切除術(shù)脾切除術(shù)腎上腺切除術(shù)腎上腺髓質(zhì)摘除術(shù)骨關(guān)節(jié)炎模型脾神經(jīng)切除術(shù)肝臟迷走神經(jīng)切斷術(shù)胃迷走神經(jīng)切斷術(shù)膈下迷走神經(jīng)切斷術(shù)去勢術(shù)輸精管結(jié)扎術(shù)卵巢切除術(shù)單側(cè)或雙側(cè)輸卵管結(jié)扎術(shù)子宮切除術(shù)輸尿管結(jié)扎術(shù)神經(jīng)系統(tǒng)手術(shù)單側(cè)腦內(nèi)定位插管雙側(cè)腦內(nèi)定位插管側(cè)腦室導管側(cè)腦室微量滲透泵導管第3腦室插管腓腸肌神經(jīng)切除術(shù)軟組織手術(shù)甲狀腺切除術(shù)甲狀旁腺切除術(shù)甲狀腺切除術(shù)伴甲狀旁腺再植入術(shù)胸腺切除術(shù)松果體切除術(shù)垂體切除術(shù)傳感器植入手術(shù)血壓遙測左心室壓遙測門靜脈壓遙測血壓與心電圖遙測血壓與腦電圖遙測胸內(nèi)壓遙測胸內(nèi)壓與心電圖遙測心電圖遙測腦電圖遙測肌電遙測心電圖與腦電圖遙測腦電圖與肌電遙測血糖遙測體溫與活動度遙測血管導管手術(shù)頸動脈導管顱內(nèi)給藥頸動脈導管腹主動脈導管股動脈導管股靜脈導管單側(cè)頸靜脈導管雙側(cè)頸靜脈導管門靜脈導管下腔靜脈導管非血管導管手術(shù)膽管導管胃導管十二指腸導管空腸導管回腸導管盲腸導管結(jié)腸導管膀。C57BL/6成年鼠肺部通過呼吸機過量通氣損傷模型的建立;北京腦定位動物模型造模
大鼠、小鼠動物疾病模型技術(shù)。高脂高糖動物模型造模
brain:腦組織;liver:肝臟;retina:視網(wǎng)膜,intestine:腸;muscle:肌肉;heart:心臟;kidney:腎臟;spleen:脾;b:圖1中a的統(tǒng)計結(jié)果;c:westernblot檢測gm20541蛋白在不同組織的表達;d:圖1中c的統(tǒng)計結(jié)果。圖2:gm20541基因敲除小鼠的構(gòu)建路線;圖中sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖3:中長距離pcr鑒定子一代鼠的結(jié)果;圖中:a:擴增5’端長臂使用引物對gm5’lrf和sa3’r,擴增產(chǎn)物為;其中a2,3,6,9,10,b1為陽性;b:擴增3’端長臂使用引物對neof和gm3’lrr,擴增產(chǎn)物為。其中:a2,3,6,9,10,b6,9,es1g,es2g為陽性雜合子,+/+為野生型對照。圖4:gm20541基因敲除小鼠的鑒定;a:gm20541基因敲除小鼠的基因型鑒定結(jié)果;b:實時定量pcr實驗分析gm20541敲除小鼠視網(wǎng)膜中基因敲除效率,證明gm20541在敲除小鼠視網(wǎng)膜中不再表達;sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr是指野生型;het是指雜合子。圖5:暗適應視網(wǎng)膜電圖(electroretinogram,erg)檢測結(jié)果;圖中:a-c:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網(wǎng)膜電圖軌跡圖;d:不同光強下gm20541基因敲除小鼠的暗適應視網(wǎng)膜電圖a波統(tǒng)計。高脂高糖動物模型造模