從白血病KG1a細(xì)胞中分選CD34+CD38-干細(xì)胞并研究其生物學(xué)特性.方法免疫磁珠法分選CD34+CD38-細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞表面膜抗原,細(xì)胞周期,甲基纖維素培養(yǎng)體系觀察其克隆性;以HL60,K562,CD34+CD38+細(xì)胞為對照,甲基偶氮唑藍(lán)法檢測柔紅霉素對CD34+CD38-細(xì)胞的抑制作用;BALB/c裸鼠皮下接種,觀察體內(nèi)成瘤能力.結(jié)果分選的CD34+CD38-細(xì)胞純度達(dá)95%以上,(69.03±3.25)%處于G0期,克隆形成率為(38.64±2.68)%,明顯抵抗柔紅霉素;不同濃度柔紅霉素作用后,CD34+CD38-,CD34+CD38+,HL60,K562細(xì)胞的活性差異有統(tǒng)計學(xué)意義(F=961.136,P=0.000);CD34+CD38-在裸鼠皮下成瘤率***高于CD34+CD38+細(xì)胞(P〈0.05).結(jié)論免疫磁珠法分選白血病干細(xì)胞簡單易行,分選的細(xì)胞符合白血病干細(xì)胞生物學(xué)特性.上海普平生物科技有限公司就帶您了解一下免疫磁珠的特點。甘肅anti-Flag COIP免疫磁珠供應(yīng)商

用多聚抗原肽(multipleantigenpeptides,MAP)包被磁珠制備單表位抗體的方法.方法:通過Fmoc法固相化學(xué)合成UreB的8分支單表位MAP,將其作為免疫原免疫小鼠,獲得多克隆抗血清.將MAP以共價偶聯(lián)的方式包被磁珠制備免疫磁珠(immunomagneticbeads,IB),通過IB從多克隆抗血清中純化單表位抗體,熒光偏振(fluorescencepolarization,FP)法鑒定抗體的特異性,SDS-PAGE鑒定抗體純度,紫外分光光度法測定其回收率.結(jié)果:合成的MAP具有較強的免疫原性,免疫小鼠后得到的抗體滴度高達(dá)1∶12800.MAP制備免疫磁珠的比較好包被濃度為100mg/L,包被效率比較高可達(dá)79%.應(yīng)用MAP免疫磁珠從抗血清中純化得到的單表位抗體,經(jīng)鑒定與其他抗原表位無反應(yīng)性,其純度為95%,抗體的回收率為5.8%.結(jié)論:MAP包被的磁珠可快速分離純化出針對某一抗原表位的特異性抗體,其性質(zhì)類似單克隆抗體.這一方案在快速制備少量高特異性抗體中具有廣闊的應(yīng)用前景.甘肅anti-HA COIP免疫磁珠供應(yīng)商上海普平生物科技有限公司免疫磁珠的售后服務(wù)很好。

免疫磁珠法(MACS)：免疫磁珠法是2O世紀(jì)80年代出現(xiàn)的技術(shù)方法。1983年Ugelstad提出將免疫磁珠用于細(xì)胞分選，1990年，Mihenyi建立了MACS。這一方法的**是在磁珠表面包被具免疫反應(yīng)性的抗體進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)，在細(xì)胞表面形成玫瑰花結(jié)，這些結(jié)合了磁珠的細(xì)胞一旦置于強大的磁場下，就會與其他未被結(jié)合的細(xì)胞分群，具***順磁場的磁珠脫離磁場后立即消失磁性，這樣就可以篩選或去除所標(biāo)記的細(xì)胞，從而達(dá)到陽性或陰性選擇細(xì)胞的目的。這一技術(shù)已經(jīng)***運用于細(xì)胞及分子生物學(xué)，分離基因、靶細(xì)胞及造血干細(xì)胞等。其分離效果得到了免疫熒光、PCR、FISH及FACS等方法的確認(rèn)。免疫磁珠可以有效地分選細(xì)胞，從而決定了這一方法在神經(jīng)干細(xì)胞分選中應(yīng)用的技術(shù)可行性。

免疫磁性細(xì)胞分選系統(tǒng)分離純化骨髓衍生肝干細(xì)胞亞群c-Kit^+lin^-。方法:實驗于2006—07/08在南方醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心完成。6~8周齡的SPF級純系BALB,C雄性小鼠10只,體質(zhì)量18~20g。收集小鼠股骨骨髓細(xì)胞,利用免疫磁性細(xì)胞分選系統(tǒng),通過兩步法分選純化c-Kit^+lin^-:將獲取的lin^-細(xì)胞懸液8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按80μL/10^7加入Buffer重懸細(xì)胞。按20μL/10^7加生物素抗體磁珠,混勻,4℃冰箱孵育15min,按1 mL/10^7加入Buffer洗細(xì)胞1次,8℃條件下1500r/min離心10min,棄上清,按500μL/10^8加入Buffer重懸細(xì)胞。Buffer 500μL潤MS柱,懸液過柱后,Buffer 500μL/次洗柱3次,柱子脫離磁場,加1mL Buffer,用配套柱塞推出柱中的c-Kit^+lin^-細(xì)胞,收集到c-kit^+lin-細(xì)胞,細(xì)胞計數(shù)。取2.0x108個細(xì)胞分成10等份,流式細(xì)胞儀分析c-Kit^+lin^-細(xì)胞純度,計算回收率,評估純化效率,苔盼蘭染色檢測純化前后的細(xì)胞活力。計算活細(xì)胞的百分率。細(xì)胞純度和細(xì)胞回收率的計算:細(xì)胞純度:分離產(chǎn)物中的陽性細(xì)胞數(shù),分離細(xì)胞的總細(xì)胞數(shù)×100%,細(xì)胞回收率:分離產(chǎn)物中的陽性細(xì)胞數(shù),起始標(biāo)本陽性細(xì)胞總數(shù)×100%。根據(jù)您的具體需求選擇不同的免疫磁珠系列。

免疫磁珠細(xì)胞分選方法可以在幾分鐘內(nèi)從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中分離出很高純度的細(xì)胞。把細(xì)胞用超級順磁性的免疫磁珠特異性地標(biāo)記，磁性標(biāo)記完后，把這些細(xì)胞通過一個放在強而穩(wěn)定磁場中的分選柱。分選柱里的基質(zhì)造成一個高梯度磁場。被磁性標(biāo)記的細(xì)胞滯留在柱里而未被標(biāo)記的細(xì)胞則流出。當(dāng)分選柱移出磁場后，滯留柱內(nèi)的磁性標(biāo)記細(xì)胞就可以被洗脫出來，這樣就完全可以獲得標(biāo)記和未標(biāo)記的兩個細(xì)胞組份。超順磁性的磁珠的體積很小，其直徑約為50nm，體積約小于真核細(xì)胞的一百萬份之一，可與病毒的大小相比。標(biāo)記細(xì)胞上的微型磁珠即使在掃描電鏡照片上也幾乎看不到。磁性抗體和磁性標(biāo)記物間的反應(yīng)可在幾分鐘內(nèi)完成。由于微型磁珠的體積極小，所以不會對細(xì)胞造成機械性壓力，而且使孵育時間短，操作過程快。免疫磁珠形成一個穩(wěn)定的膠體液，它們在磁場中既不沉淀又不凝聚。微型磁珠的大小和它的組成成份（氧化鐵和多糖）使其可被生物降解，且不會***細(xì)胞或影響細(xì)胞的功能和活力，細(xì)胞的生理功能也不變。磁珠不需要去除，因此，陽性分選出的細(xì)胞（即磁性標(biāo)記細(xì)胞）可立即用于分析和隨后的實驗。上海普平生物科技有限公司專業(yè)致力于免疫磁珠生產(chǎn)。安徽protein A/G COIP免疫磁珠性能

免疫磁珠的特點成為了一個重要因素。甘肅anti-Flag COIP免疫磁珠供應(yīng)商

應(yīng)用免疫磁珠法分離篩選人乳牙牙髓干細(xì)胞,并做培養(yǎng)鑒定.方法采用STRO-1為標(biāo)記物以免疫磁珠分離篩選人乳牙牙髓干細(xì)胞,觀察細(xì)胞形態(tài)及生長情況,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表型,并檢測細(xì)胞體外多向分化能力.結(jié)果應(yīng)用免疫磁珠法篩選人乳牙牙髓細(xì)胞可獲得乳牙牙髓干細(xì)胞,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理證明看其生長速度慢于牙髓細(xì)胞,細(xì)胞表型分析證實CD29,CD105高表達(dá),CD34,CD45低表達(dá).礦化誘導(dǎo)和成脂誘導(dǎo)證實STRO-1+乳牙牙髓細(xì)胞具有干細(xì)胞多向分化的能力.結(jié)論免疫磁珠法是有效的分離純化人乳牙牙髓干細(xì)胞的方法.所分離的細(xì)胞具有干細(xì)胞的表型特點及多向分化能力.甘肅anti-Flag COIP免疫磁珠供應(yīng)商

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