用多聚抗原肽(multipleantigenpeptides,MAP)包被磁珠制備單表位抗體的方法.方法:通過Fmoc法固相化學(xué)合成UreB的8分支單表位MAP,將其作為免疫原免疫小鼠,獲得多克隆抗血清.將MAP以共價偶聯(lián)的方式包被磁珠制備免疫磁珠(immunomagneticbeads,IB),通過IB從多克隆抗血清中純化單表位抗體,熒光偏振(fluorescencepolarization,FP)法鑒定抗體的特異性,SDS-PAGE鑒定抗體純度,紫外分光光度法測定其回收率.結(jié)果:合成的MAP具有較強的免疫原性,免疫小鼠后得到的抗體滴度高達1∶12800.MAP制備免疫磁珠的比較好包被濃度為100mg/L,包被效率比較高可達79%.應(yīng)用MAP免疫磁珠從抗血清中純化得到的單表位抗體,經(jīng)鑒定與其他抗原表位無反應(yīng)性,其純度為95%,抗體的回收率為5.8%.結(jié)論:MAP包被的磁珠可快速分離純化出針對某一抗原表位的特異性抗體,其性質(zhì)類似單克隆抗體.這一方案在快速制備少量高特異性抗體中具有廣闊的應(yīng)用前景.人骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨間充質(zhì)祖細胞的免疫磁珠分選和鑒定。安徽protein A/G COIP免疫磁珠性能

免疫磁珠法分離細胞是基于細胞表面抗原能與連接有磁珠的特異性單抗相結(jié)合，在外加磁場中，通過抗體與磁珠相連的細胞被吸附而滯留在磁場中，無該種表面抗原的細胞由于不能與連接著磁珠的特異性單抗結(jié)合而沒有磁性，不在磁場中停留，從而使細胞得以分離。免疫磁珠應(yīng)用分為正選法和負選法：正選法－磁珠結(jié)合的細胞就是所要分離獲得的細胞負選法－磁珠結(jié)合不需要的細胞，游離于上清液的細胞為所需細胞，一般而言，負選法比正選法的磁珠用量大磁珠：大小在0.1－0.45mm包被了生產(chǎn)的高質(zhì)量單抗磁珠已為白細胞亞群的分選所優(yōu)化將包被了特異性單抗的BDIMag磁珠加入細胞懸液，磁珠特異性地與有相應(yīng)抗原的細胞亞群結(jié)合，通過分離得到的連有磁珠的細胞可直接用于功能試驗和用流式細胞儀檢測。上海anti-HA COIP免疫磁珠送貨上門免疫磁珠法分離膽囊CancerCD133陽性細胞及其生物學(xué)特性鑒定。

Anti Flag COIP磁珠

產(chǎn)品價格

產(chǎn)品描述

BEENbio Anti Flag COIP磁珠在大小為1um的納米磁珠上供價結(jié)合了大量的小鼠Anti Flag單克隆抗體，與傳統(tǒng)的Anti Flag COIP瓊脂糖凝膠比較，抗體結(jié)合能力相同，背景更低，由于采用磁性分離，使得每次COIP可以節(jié)省40%的時間。

產(chǎn)品特性

儲存條件

4^oC長期穩(wěn)定，

使用說明

磁珠的準備

重懸Anti Flag 免疫磁珠，取10 μL加入到500 μL TBS，洗滌3次，分離磁珠，棄上清。

樣品的結(jié)合（binding）

在上述沉淀中加入500 μL細胞裂解液，室溫緩慢孵育2小時或者4°C條件下過夜，分離磁珠，棄上清。

結(jié)合過程中，磁珠可能會出現(xiàn)聚團或呈片狀，屬于正?，F(xiàn)象，不會影響實驗結(jié)果。

洗滌（washing）：0.5 mL TBS緩沖液洗滌四次，每次5min，分離磁珠，棄上清。

洗脫（elution）:上述所得沉淀中加 入50 μL 1×蛋白上樣緩沖液，煮沸5 min，冷卻后分離磁珠，吸取上清液，進行SDS-PAGE檢測。

免疫共沉淀（COIP）優(yōu)點

（1）相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的，處于天然狀態(tài)；

（2）蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進行的，可以避免人為的影響；

（3）可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物。

免疫共沉淀（COIP）缺點

（1）可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)相互作用；

（2）兩種蛋白質(zhì)的結(jié)合可能不是直接結(jié)合，而可能有第三者在中間起橋梁作用；

（3）必須在實驗前預(yù)測目的蛋白是什么，以選擇***檢測的抗體，所以，若預(yù)測不正確，實驗就得不到結(jié)果，方法本身具有冒險性。

（4）靈敏度沒有親和色譜高。 利用人免疫球蛋白構(gòu)建免疫磁珠富集金葡菌條件優(yōu)化。

免疫磁珠技術(shù)檢測外周血中卵巢Cancer細胞。安徽protein A/G COIP免疫磁珠性能

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。當(dāng)細胞在非變性條件下被裂解時，完整細胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來。當(dāng)用預(yù)先固化在agarosebeads上的蛋白質(zhì)A的抗體免疫沉淀A蛋白，那么與A蛋白在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)B也能一起沉淀下來。再通過蛋白變性分離，對B蛋白進行檢測，進而證明兩者間的相互作用。這種方法得到的目的蛋白是在細胞內(nèi)與興趣蛋白天然結(jié)合的，符合體內(nèi)實際情況，得到的結(jié)果可信度高。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合；也可用于確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔。安徽protein A/G COIP免疫磁珠性能

上海普平生物科技有限公司致力于化工，以科技創(chuàng)新實現(xiàn)***管理的追求。普平生物擁有一支經(jīng)驗豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團隊，以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供科研試劑、耗材、儀器，納米脂質(zhì)體，細胞、分子、蛋白實驗，科研項目。普平生物繼續(xù)堅定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路，既要實現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長，又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域，實現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破。普平生物始終關(guān)注化工行業(yè)。滿足市場需求，提高產(chǎn)品價值，是我們前行的力量。