建立檢測人血清抗白***烯醇化酶(Eno)IgG類抗體的免疫磁珠法,并評估其在***血癥診斷中的價值。方法將Eno重組蛋白耦聯(lián)至磁性微珠上,以辣根過氧化物酶(HRP)標記的羊抗人IgG為二抗,優(yōu)化免疫磁珠法的反應(yīng)條件,考察其精密度和特異性。收集經(jīng)血培養(yǎng)確診的***血癥患者(n=113)、***定植者(n=50)、細菌菌血癥患者(n=30)和健康人對照者(n=100)血清,用免疫磁珠法測定抗Eno抗體,并與ELISA法結(jié)果進行比較。結(jié)果免疫磁珠法測定抗Eno抗體的批內(nèi)、批間變異系數(shù)(CV)分別為8.2%和14.2%,重組Eno抗原對相應(yīng)抗體的阻斷率為91.6%。以吸光度(A)值0.29為cutoff值時,診斷***血癥的敏感性、特異性、陽性預測值和陰性預測值分別為80.5%、92.3%、90.1%和84.5%。免疫磁珠法的敏感性和特異性與ELISA法比較無統(tǒng)計學差異,但檢測流程從37℃2.5h縮短至常溫1h。結(jié)論免疫磁珠法檢測抗EnoIgG類抗體簡便、快捷、可靠,在侵襲性******研究中具有潛在的應(yīng)用價值。免疫磁珠的多種系列總有一款是您滿意。陜西anti-Myc COIP免疫磁珠代理價格4折起

免疫磁珠法原代分離純化大鼠視網(wǎng)膜微血管周細胞,并確定其免疫組化特征.方法免疫磁珠法結(jié)合傳統(tǒng)的膠原酶消化及篩網(wǎng)過濾法分離出大鼠視網(wǎng)膜微血管周細胞,采用含有20%胎牛血清的DMEM培養(yǎng).通過周細胞的形態(tài)和生長方式初步鑒別,再進行細胞α-SMA,vWF,GFAP抗體免疫組織化學特征鑒定,及激光共聚焦顯微鏡行周細胞PDGFR-β和desmin抗體熒光雙標觀察.周細胞生長曲線通過MTT法測定.結(jié)果本法獲得的周細胞純度可達98%,并能連續(xù)傳代.原代周細胞約2～3周融合,傳代后生長和融合速度加快,細胞形態(tài)不規(guī)則,胞內(nèi)可見絲狀結(jié)構(gòu),無接觸性抑制.免疫組化證實周細胞胞漿內(nèi)α-SMA蛋白表達陽性,內(nèi)皮細胞特異性vWF因子表達陰性,膠質(zhì)細胞特異性GFAP表達陰性.激光共聚焦顯示周細胞PDGFR-β和desmin抗原表達均為陽性.結(jié)論本研究***報道應(yīng)用免疫磁珠法分離培養(yǎng)大鼠視網(wǎng)膜微血管周細胞.獲得高度純化的周細胞具有明確的免疫組化特征,可用于相關(guān)視網(wǎng)膜血管性疾病的進一步研究.北京anti-Myc 免疫共沉淀免疫磁珠供應(yīng)商上海普平生物科技有限公司專業(yè)致力于免疫磁珠批發(fā)。

磁珠與抗體偶聯(lián)的比較好條件,制備抗單增李斯特菌免疫磁珠;將免疫磁珠與顯色培養(yǎng)法結(jié)合,初步建立起利用免疫磁珠分離技術(shù)對單增李斯特菌進行分離鑒定的檢測方法.從而為食品中單增李斯特菌的檢測提供一種快速,高效和靈敏的檢測新方法.方法:以單增李斯特菌體作為免疫抗原,免疫新西蘭兔,獲得兔抗單增李斯特菌多克隆抗體,鑒定多抗活性以及與單增李斯特菌體的結(jié)合能力;用激光粒度儀和透射電鏡分析不同活性基團修飾磁珠的粒徑大小和分散性,選擇性質(zhì)穩(wěn)定的磁珠用以制備免疫磁珠;設(shè)計正交試驗,摸索pH,溫度,時間對氨基修飾磁珠與多抗偶聯(lián)的影響,選擇比較好條件制備免疫磁珠并用于捕獲單增李斯特菌;設(shè)計不同的偶聯(lián)緩沖溶液,偶聯(lián)時間,偶聯(lián)溫度,通過比較羧基修飾磁珠與抗體偶聯(lián)后上清中剩余的抗體量來確定比較好偶聯(lián)條件,運用制備的免疫磁珠對樣品中的單增李斯特菌進行捕獲,并與顯色平板結(jié)合試驗,鑒定制備的免疫磁珠捕獲單增李斯特菌的能力.

免疫共沉淀檢測（CO-IP）BEENbio提供免疫共沉淀（CO-IP）檢測服務(wù)。可對兩種已知蛋白是否存在相互作用進行驗證，也可以驗證在總蛋白中是否含有與已知蛋白相互作用的未知蛋白。其實驗方法為將靶蛋白（X）與目的蛋白（Y）在同一細胞內(nèi)孵育，形成“靶蛋白-目的蛋白”復合物。將靶蛋白的特異性抗體與復合物共孵育，形成“抗體-靶蛋白-目的蛋白”復合物，利用ProterinA/G純化。通過SDS-PAGE銀染，結(jié)合WesternBlot及液相質(zhì)譜等對兩種蛋白之間是否存在相互作用進行定性分析。服務(wù)優(yōu)勢?使用銀染技術(shù)，靈敏度是考馬斯亮藍100倍，SDS-PAGE電泳結(jié)果更加清晰；?擁有液相質(zhì)譜及Fortebio等完整配套檢測設(shè)備，可對檢測結(jié)果進一步分析；?實驗重復進行兩次，排除隨機因素影響，結(jié)果更加可靠；?擁有蛋白、抗體等制備平臺，您只需提供序列便可完成全部實驗；上海普平生物科技有限公司主營免疫磁珠。

COIP實驗步驟第三步：免疫共沉淀根據(jù)不同的抗體結(jié)合方式，這里的免疫共沉淀步驟會稍有不同，但是本質(zhì)是一樣的，都是為了形成抗原-蛋白復合物。如果直接使用 Protein A/G 結(jié)合的 beads，先進行細胞裂解液/蛋白混合物與抗體的孵育，再加入 beads 將蛋白-抗體復合物拉下來。如果使用了交聯(lián)劑將抗體與 Protein A/G 固定，或者直接將抗體固定在 beads，則將固定抗體的 beads 與細胞裂解液或則蛋白混合物一起孵育。增加在洗脫之前的洗滌次數(shù)或在免疫共沉淀緩沖液中加入 Triton X-100 ，可以降低非特異性結(jié)合，以防止蛋白在陰性對照樹脂實驗樣品中被檢測到。第四步：洗脫與檢測***一步則是使用洗脫緩沖液將互作蛋白復合物洗脫，并通過 Western Blot 或者 Mass spectra 檢測鑒定蛋白。當?shù)鞍谆蚩贵w對低 pH 的緩沖液敏感，可使用中性 pH 值的洗脫緩沖液。注意事項：如后續(xù)需進行酶活或功能性分析，則需使用兼容下游檢測的 Elution buffer 進行洗脫。對于交聯(lián)劑結(jié)合的 beads，為了保持抗體偶聯(lián)樹脂的活性，應(yīng)立即再生和存儲樹脂，保證抗體可以重復利用。上海普平生物科技有限公司銷售的免疫磁珠質(zhì)量上乘。湖南anti-Flag COIP免疫磁珠批量定制

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小鼠脾臟CD8+T細胞的免疫磁珠負性分選方法,并對分選后所得細胞進行純度、活力及功能檢測.方法以免疫磁珠負性分選法從小鼠脾臟細胞中分離CD8+T細胞,流式細胞術(shù)檢測所得細胞的純度,臺盼藍檢測細胞活力并用ConA刺激檢測增殖能力.結(jié)果經(jīng)過流式細胞儀測定免疫磁珠負性分選后的小鼠脾臟CD8+T細胞純度達到(91.6±3.6)%,臺盼蘭染色細胞活力為(94.9±3.2)%,ConA刺激72h后有(56.3±1.7)%的細胞增殖.結(jié)論免疫磁珠負性分選法能夠分選出高純度的CD8+T細胞,并且不影響分選靶細胞的細胞活力和功能.陜西anti-Myc COIP免疫磁珠代理價格4折起

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