免疫磁珠分離法分選弓形蟲速殖子,以去除宿主細(xì)胞成分,并 盡可能對(duì)蟲體的生物學(xué)特性無(wú)不良影響,為弓形蟲的基礎(chǔ)與臨床研究提供技術(shù)基礎(chǔ).方法采用弓形蟲Wh3株( China 1基因型)速殖子***小鼠,提取腹腔液,常規(guī)方法制備速殖子可溶性抗原,免疫家兔,獲得兔抗弓形蟲多克隆IgG抗體.用抗體包被的免疫磁珠對(duì)小鼠腹腔液內(nèi) 弓形蟲速殖子進(jìn)行純化,比較其純度,回收率,蟲體活力,毒力與***性.結(jié)果用免疫磁珠分離技術(shù)純化弓形蟲速殖子后,其純度提高到98.2%,細(xì)胞***率為 96%,蟲體回收率為73.5%;用內(nèi)鹽法( MTS )細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒檢測(cè)分離后的速殖子活性為95.6%.定量分組***小鼠后死亡時(shí)間無(wú)***性差異.結(jié)論免疫磁珠分離的速殖子純度,細(xì)胞***率和 蟲體回收率較高,能有效去除宿主細(xì)胞,且對(duì)速殖子的活性和毒力無(wú)影響.該法操作簡(jiǎn)便快速,無(wú)需昂貴的儀器設(shè)備,具有較大的實(shí)用價(jià)值.利用BEENBIO免疫磁珠技術(shù)檢測(cè)大腸*細(xì)胞。天津anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠送貨上門

抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,并進(jìn)行初步應(yīng)用。方法采用B淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)制備抗熒光素單克隆抗體;制備腹水,經(jīng)50%硫酸銨粗提后,再經(jīng)陰離子交換樹脂DE52進(jìn)一步純化單克隆抗體;采用氧化共沉淀法制備納米磁性粒子;乳液聚合法制備羧基磁性微球;用碳二亞胺將抗熒光素單克隆抗體共價(jià)偶聯(lián)于磁性微球表面,制備抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠。用制備的免疫磁珠檢測(cè)乙肝表面抗原,并與市售ELISA試劑盒的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果共獲得5株雜交瘤細(xì)胞株,其中1F12細(xì)胞株分泌的抗體效價(jià)、相對(duì)親和力較高,特異性較好;純化的1F12株單抗的純度達(dá)95%,蛋白含量為2.4mg/ml,ELISA效價(jià)為106,相對(duì)親和力為0.2mg/L,與FITC標(biāo)記的BSA可特異性結(jié)合;納米磁性粒子的平均粒徑為150nm,鐵含量為71.63%;羧基磁性微球的平均粒徑為210nm,羧基含量約為2.15mmol/g;每克羧基磁性微球可結(jié)合抗熒光素單克隆抗體約12mg,制備的免疫磁珠可有效結(jié)合熒光素標(biāo)記的蛋白。應(yīng)用抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠檢測(cè)乙型肝炎表面抗原的靈敏度高于ELISA試劑,檢測(cè)限達(dá)0.1ng/ml。結(jié)論成功制備了抗熒光素單克隆抗體免疫磁珠,其具有應(yīng)用于免疫檢測(cè)分析的價(jià)值。湖北anti-HA 免疫共沉淀免疫磁珠銷售BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。

常見(jiàn)問(wèn)題及對(duì)策

3： 如何避免磁珠在儲(chǔ)存或使用過(guò)程中可能出現(xiàn)的聚集情況？

磁珠應(yīng)保存在2～8℃，使用時(shí)應(yīng)避免由于污染而導(dǎo)致的不可逆聚 集，或因干燥而導(dǎo)致的聚集。磁珠在低pH的洗脫緩沖液中發(fā)生聚集屬 于正?，F(xiàn)象，不影響磁珠的正常使用。在Binding buffer和Elution buffer中添加終濃度為0.1%(v/v)的非離子型去垢劑（如NP-40、 Tween-20 或 Triton X-100）可有效防止磁珠聚集。經(jīng)過(guò)低pH洗脫操 作的磁珠可以用結(jié)合緩沖液洗滌至中性，然后用含有0.1% (v/v)Tween-20的Tris buffer(pH7.5)振蕩重懸磁珠，并用超聲波水浴 處理2min，即可使磁珠恢復(fù)均勻狀態(tài)，以上處理均不影響磁珠的抗體 結(jié)合效率。

4： 如何解決磁珠易粘附管壁的現(xiàn)象？

建議使用低吸附率的耗材進(jìn)行磁珠操作。另外，在緩沖液中添加 0.01%～0.1%(v/v)的非離子型去垢劑（如NP-40、Tween-20或 Triton X-100）可以有效降低磁珠對(duì)耗材的粘附。

實(shí)驗(yàn)優(yōu)化建立基于免疫磁分離技術(shù)對(duì)金黃色葡萄球菌的快速分離方法,為后續(xù)快速檢測(cè)提供基礎(chǔ).利用金黃色葡萄球菌多抗制備的免疫磁珠對(duì)其捕獲.結(jié)合平板菌落計(jì)數(shù),考察包被磁珠時(shí)多抗加入量,免疫磁珠加入量及捕獲時(shí)間等因素對(duì)捕獲效率的影響.在單因素實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn),并對(duì)該方法的靈敏度,特異性及其在食品中的應(yīng)用效果初步探索.結(jié)果表明,比較好捕獲條件為抗體加入量30μL,免疫磁珠加入量80μL,捕獲時(shí)間45min,在此條件下捕獲效率均超過(guò)30%,該方法捕獲限可達(dá)到101CFU/mL,特異性良好,并初步用于羊肉卷洗水中金黃色葡萄球菌的快速分離,捕獲時(shí)間小于1h.免疫磁分離作為一種快速的分離篩選方法,可用于食源性金黃色葡萄球菌的快速分離.免疫磁珠法富集循環(huán)腫瘤細(xì)胞研究進(jìn)展。

免疫磁珠法分離,并培養(yǎng)人腦膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的方法.方法將術(shù)中取得的腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本,通過(guò)剪切,消化和吹打成單細(xì)胞懸液,篩網(wǎng)過(guò)濾,免疫磁珠分選試劑盒分選出CD133^+細(xì)胞,用神經(jīng)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)法培養(yǎng)出具有單細(xì)胞克隆能力的細(xì)胞球,取第3代進(jìn)行誘導(dǎo)分化,分化前后用免疫細(xì)胞熒光化學(xué)方法鑒定**干細(xì)胞及分化后細(xì)胞.結(jié)果免疫磁珠分選出的CD133^+細(xì)胞,可懸浮生長(zhǎng)并形成神經(jīng)干細(xì)胞樣細(xì)胞球,有較強(qiáng)的增殖能力,干細(xì)胞標(biāo)志物巢蛋白(nestin)陽(yáng)性,分化后細(xì)胞表達(dá)神經(jīng)元小管相關(guān)蛋白β-3(β-tubulin3)和星形膠質(zhì)細(xì)胞膠質(zhì)纖維酸性蛋白質(zhì)(GFAP)特異性抗原,而巢蛋白,CD133^+陰性,并具有**的核型.結(jié)論免疫磁珠分選法可避免原代培養(yǎng)中眾多細(xì)胞混雜生長(zhǎng)的發(fā)生,能夠從大量腫瘤細(xì)胞中分離出只占極少比例的**干細(xì)胞,細(xì)胞結(jié)合磁珠后在體外可以長(zhǎng)期培養(yǎng)和傳代,進(jìn)一步證實(shí)了**干細(xì)胞的存在,并為膠質(zhì)瘤干細(xì)胞的研究奠定基礎(chǔ).多聚抗原肽免疫磁珠在制備單表位抗體中的應(yīng)用。安徽anti-Flag COIP免疫磁珠銷售

免疫磁珠分選兔前軟骨干細(xì)胞及細(xì)胞研究平臺(tái)的建立。天津anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠送貨上門

從白血病KG1a細(xì)胞中分選CD34+CD38-干細(xì)胞并研究其生物學(xué)特性.方法免疫磁珠法分選CD34+CD38-細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞表面膜抗原,細(xì)胞周期,甲基纖維素培養(yǎng)體系觀察其克隆性;以HL60,K562,CD34+CD38+細(xì)胞為對(duì)照,甲基偶氮唑藍(lán)法檢測(cè)柔紅霉素對(duì)CD34+CD38-細(xì)胞的抑制作用;BALB/c裸鼠皮下接種,觀察體內(nèi)成瘤能力.結(jié)果分選的CD34+CD38-細(xì)胞純度達(dá)95%以上,(69.03±3.25)%處于G0期,克隆形成率為(38.64±2.68)%,明顯抵抗柔紅霉素;不同濃度柔紅霉素作用后,CD34+CD38-,CD34+CD38+,HL60,K562細(xì)胞的活性差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=961.136,P=0.000);CD34+CD38-在裸鼠皮下成瘤率***高于CD34+CD38+細(xì)胞(P〈0.05).結(jié)論免疫磁珠法分選白血病干細(xì)胞簡(jiǎn)單易行,分選的細(xì)胞符合白血病干細(xì)胞生物學(xué)特性.天津anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠送貨上門

上海普平生物科技有限公司致力于化工，以科技創(chuàng)新實(shí)現(xiàn)***管理的追求。公司自創(chuàng)立以來(lái)，投身于科研試劑、耗材、儀器，納米脂質(zhì)體，細(xì)胞、分子、蛋白實(shí)驗(yàn)，科研項(xiàng)目，是化工的主力軍。普平生物繼續(xù)堅(jiān)定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路，既要實(shí)現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長(zhǎng)，又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域，實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破。普平生物始終關(guān)注化工市場(chǎng)，以敏銳的市場(chǎng)洞察力，實(shí)現(xiàn)與客戶的成長(zhǎng)共贏。