用多聚抗原肽(multipleantigenpeptides,MAP)包被磁珠制備單表位抗體的方法.方法:通過Fmoc法固相化學(xué)合成UreB的8分支單表位MAP,將其作為免疫原免疫小鼠,獲得多克隆抗血清.將MAP以共價(jià)偶聯(lián)的方式包被磁珠制備免疫磁珠(immunomagneticbeads,IB),通過IB從多克隆抗血清中純化單表位抗體,熒光偏振(fluorescencepolarization,FP)法鑒定抗體的特異性,SDS-PAGE鑒定抗體純度,紫外分光光度法測(cè)定其回收率.結(jié)果:合成的MAP具有較強(qiáng)的免疫原性,免疫小鼠后得到的抗體滴度高達(dá)1∶12800.MAP制備免疫磁珠的比較好包被濃度為100mg/L,包被效率比較高可達(dá)79%.應(yīng)用MAP免疫磁珠從抗血清中純化得到的單表位抗體,經(jīng)鑒定與其他抗原表位無(wú)反應(yīng)性,其純度為95%,抗體的回收率為5.8%.結(jié)論:MAP包被的磁珠可快速分離純化出針對(duì)某一抗原表位的特異性抗體,其性質(zhì)類似單克隆抗體.這一方案在快速制備少量高特異性抗體中具有廣闊的應(yīng)用前景.BEENbio Anti Flag Co-IP&CHIP磁珠全國(guó)招商代理。黑龍江anti-HA COIP免疫磁珠市場(chǎng)報(bào)價(jià)
檢測(cè)EPCAM、MUC16兩種抗原在上皮性卵巢*循環(huán)腫瘤細(xì)胞中表達(dá)的相關(guān)性。方法分別用羧基磁珠制備EPCAM、MUC16兩種免疫磁珠,分3組:EPCAM免疫磁珠檢測(cè)組、MUC16免疫磁珠檢測(cè)組、2種磁珠均等混合檢測(cè)組。對(duì)來(lái)源于同一患者的等體積外周血樣本進(jìn)行循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè),HE染色后鑒定檢測(cè)值。結(jié)果EPCAM免疫磁珠、MUC16免疫磁珠、EPCAM+MUC16免疫磁珠對(duì)同體積、同來(lái)源樣本檢測(cè)值分別為22±11、14±6、28±12個(gè)腫瘤細(xì)胞(P0.05),說(shuō)明檢測(cè)效率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論MUC16與EPCAM在上皮性卵巢*循環(huán)腫瘤細(xì)胞中**表達(dá)且存在差異,因此增加MUC16這一***標(biāo)志物可有效提高上皮性卵巢*CTCs檢出數(shù)量。天津anti-Flag 免疫共沉淀免疫磁珠送貨上門BEENbio Anti HA Co-IP&CHIP磁珠廠家直銷。
利用免疫磁珠從SD大鼠坐骨神經(jīng)分離培養(yǎng)獲得大量,高純度雪旺細(xì)胞的方法.[方法]選用4-7dSD大鼠,無(wú)菌條件下取雙側(cè)坐骨神經(jīng),解剖鏡下剝離去除神經(jīng)外膜,獲得神經(jīng)束,將神經(jīng)束剪碎至1mm3大小.采用雙酶2次消化法消化,胎牛血清中止消化后,離心并加入DF12培養(yǎng)液培養(yǎng).7d后應(yīng)用免疫磁珠法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行純化培養(yǎng),培養(yǎng)2d后進(jìn)行傳代接種.培養(yǎng)過程中對(duì)細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,計(jì)數(shù)及活力測(cè)定;MTY法繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,采用免疫細(xì)胞化學(xué)熒光染色對(duì)細(xì)胞進(jìn)行鑒定并且計(jì)算所得細(xì)胞純度.[結(jié)果]分離培養(yǎng)所得細(xì)胞即為雪旺細(xì)胞;采用免疫磁珠法能對(duì)培養(yǎng)所得雪旺細(xì)胞進(jìn)行純化.純化后雪旺細(xì)胞活力為96%±0.5%,純度98%±1.1%,培養(yǎng)2d后就可以傳代.[結(jié)論]免疫磁珠法可以用于雪旺細(xì)胞的純化培養(yǎng),所得雪旺細(xì)胞純度高,活力強(qiáng),能滿足組織工程人工神經(jīng)的需要.
常用的磁珠法DNA提取試劑盒,國(guó)外的有Dynal、Qiagen等,國(guó)內(nèi)將磁珠應(yīng)用于核酸提取的研究起源于02年左右,經(jīng)過近些年的反復(fù)試驗(yàn),形成了穩(wěn)定的核酸提取體系,并已被***用于一些疾?。ㄈ缫腋?、丙肝、結(jié)核菌)等的定量檢測(cè)(如惠爾納米的系列磁珠法核酸提取試劑盒)。國(guó)產(chǎn)磁珠法試劑盒與進(jìn)口產(chǎn)品相比,已不單單是只具有價(jià)格優(yōu)勢(shì),其產(chǎn)品的穩(wěn)定性、高效性、提取出的核酸的質(zhì)量與產(chǎn)量都足以與進(jìn)口磁珠法試劑盒媲美。但是進(jìn)口試劑盒長(zhǎng)期以來(lái)形成的完善的銷售渠道對(duì)國(guó)產(chǎn)試劑盒的推廣是一大挑戰(zhàn)。BEENbio ProteinA/G Co-IP&CHIP磁珠 蛋白相互作用。
小鼠脾臟CD8+T細(xì)胞的免疫磁珠負(fù)性分選方法,并對(duì)分選后所得細(xì)胞進(jìn)行純度、活力及功能檢測(cè).方法以免疫磁珠負(fù)性分選法從小鼠脾臟細(xì)胞中分離CD8+T細(xì)胞,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)所得細(xì)胞的純度,臺(tái)盼藍(lán)檢測(cè)細(xì)胞活力并用ConA刺激檢測(cè)增殖能力.結(jié)果經(jīng)過流式細(xì)胞儀測(cè)定免疫磁珠負(fù)性分選后的小鼠脾臟CD8+T細(xì)胞純度達(dá)到(91.6±3.6)%,臺(tái)盼蘭染色細(xì)胞活力為(94.9±3.2)%,ConA刺激72h后有(56.3±1.7)%的細(xì)胞增殖.結(jié)論免疫磁珠負(fù)性分選法能夠分選出高純度的CD8+T細(xì)胞,并且不影響分選靶細(xì)胞的細(xì)胞活力和功能.免疫磁珠法分離純化人腎CancerCD133~+細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究。北京蛋白質(zhì)免疫共沉淀免疫磁珠批量定制
免疫磁珠捕獲法分離抗酸桿菌的實(shí)驗(yàn)研究。黑龍江anti-HA COIP免疫磁珠市場(chǎng)報(bào)價(jià)
COIP 磁珠緩沖液匯總
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細(xì)胞裂解液
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正常RIPA 細(xì)胞裂解緩沖液(一般是公司購(gòu)買)
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結(jié)合緩沖液binding buffer
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用RIPA 細(xì)胞裂解緩沖液代替
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洗滌緩沖液Washing buffer
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PBST(1*PBS + 1% Triton X-100)
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洗脫緩沖液Elution buffer
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直接加入1*蛋白loading buffer, 98oC 5 min后棄去磁珠后,收集上清液檢測(cè)。
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上海普平生物科技有限公司致力于化工,以科技創(chuàng)新實(shí)現(xiàn)***管理的追求。公司自創(chuàng)立以來(lái),投身于科研試劑、耗材、儀器,納米脂質(zhì)體,細(xì)胞、分子、蛋白實(shí)驗(yàn),科研項(xiàng)目,是化工的主力軍。普平生物繼續(xù)堅(jiān)定不移地走高質(zhì)量發(fā)展道路,既要實(shí)現(xiàn)基本面穩(wěn)定增長(zhǎng),又要聚焦關(guān)鍵領(lǐng)域,實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)型再突破。普平生物始終關(guān)注化工市場(chǎng),以敏銳的市場(chǎng)洞察力,實(shí)現(xiàn)與客戶的成長(zhǎng)共贏。