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外泌體作為一種細(xì)胞來源的“信使”,在疾病診斷和個體化***中展現(xiàn)出巨大的潛力。由于其內(nèi)容物能夠反映來源細(xì)胞的生理狀態(tài),外泌體常被用作**、***、***類疾病早期篩查的標(biāo)志物。例如,來自腫瘤細(xì)胞的外泌體中常富含與*變相關(guān)的miRNA或突變蛋白,通過液體活檢即可實(shí)現(xiàn)無創(chuàng)檢測。此外,外泌體的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、在體內(nèi)循環(huán)時間長、易于被細(xì)胞攝取,因此也是藥物遞送和基因***的理想工具。目前已有多項(xiàng)研究嘗試將藥物或RNA分子包裹進(jìn)外泌體,用于靶向***某些難治性疾病,尤其在腫瘤免疫***和神經(jīng)系統(tǒng)疾病方面前景廣闊。南京英瀚斯,外泌體檢測服務(wù),分離鑒定都能做。天津外泌體提取
外泌體的主要功能被認(rèn)為是細(xì)胞之間的信息傳遞,了解它帶有的蛋白質(zhì)和多種RNA上的信息就變得尤其重要。2019年外泌體中標(biāo)項(xiàng)目中帶有熱門話題miRNA、lncRNA和環(huán)狀RNA的項(xiàng)目數(shù)量,我們可以看到,外泌體中的miRNA和lncRNA過去研究的是比較多了,例如發(fā)表在Hepatology(IF=14.971)上的一篇文章表明肝ai細(xì)胞釋放的外泌體miRNA調(diào)控巨噬細(xì)胞程序性死亡配體1的表達(dá)。另一篇文章發(fā)現(xiàn)膽管細(xì)胞來源的外泌體LncRNA H19促進(jìn)肝星狀細(xì)胞活化和膽汁淤積性肝纖維化。相對的,外泌體中的circRNA研究目前還較少,而circRNA分子自身獨(dú)特的穩(wěn)定性、組織特異性、時序和疾病特異性等,使它很有可能成為外泌體檢測的下一個熱門分子。湖北專業(yè)的外泌體測序外泌體檢測服務(wù),經(jīng)驗(yàn)豐富,操作熟練。
外泌體的分離與鑒定技術(shù)是研究和應(yīng)用的關(guān)鍵步驟,目前常用方法包括超速離心、密度梯度離心、免疫親和捕獲、聚合物沉淀等。其中超速離心法是**經(jīng)典也是使用**廣的方法,能夠較好地富集外泌體,但操作復(fù)雜、時間長,且容易混雜微囊泡或細(xì)胞碎片。近年來,基于商業(yè)試劑盒的聚合物沉淀法由于操作便捷、效率較高,也***用于臨床樣本的初篩研究。而為了提高純度和特異性,免疫磁珠捕獲法結(jié)合外泌體特異性表面蛋白(如CD63、CD81等)逐漸成為高通量檢測的重要手段。外泌體的鑒定通常需要借助透射電鏡(TEM)、納米顆粒跟蹤分析(NTA)和Westernblot等方法綜合判斷。
盡管外泌體研究進(jìn)展迅速,但其商業(yè)化和臨床轉(zhuǎn)化仍面臨諸多挑戰(zhàn)。首要問題是分離純化方法尚未標(biāo)準(zhǔn)化,不同實(shí)驗(yàn)室采用不同提取手段,可能導(dǎo)致結(jié)果不一致。其次,外泌體成分復(fù)雜且受來源細(xì)胞狀態(tài)影響較大,缺乏統(tǒng)一的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。此外,如何實(shí)現(xiàn)大規(guī)模制備、長效保存及安全性評估也是目前研究的熱點(diǎn)。監(jiān)管方面,目前尚無針對外泌體類產(chǎn)品的完整法規(guī)體系,特別是在***用途方面,急需建立從實(shí)驗(yàn)室研究到臨床應(yīng)用的橋梁。未來的發(fā)展需依賴多學(xué)科交叉融合,包括材料學(xué)、生物工程、藥代動力學(xué)等方向的深度參與。外泌體檢測-南京英瀚斯-第三方檢測機(jī)構(gòu)。
外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì)、核酸、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,進(jìn)而***靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號通路。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,從而***細(xì)胞內(nèi)的信號通路。有報道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細(xì)胞膜上未能檢測出。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA。外泌體檢測服務(wù) [南京英瀚斯] 一站式外泌體檢測服務(wù)平臺。寧夏專門做外泌體粒徑分析
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外泌體的產(chǎn)生過程為:細(xì)胞膜內(nèi)陷,形成內(nèi)體(endosome),再形成多泡體(multivesicularbodies,MVB),比較后分泌到胞外成為外泌體。外泌體中攜帶有母細(xì)胞的多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息。外泌體比較早見于1981年,EGTrams等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡,并命名為exosome。對于外泌體的作用,當(dāng)時推測為細(xì)胞排泄廢物的一種方式。1996年GRaposo等發(fā)現(xiàn)類似于B淋巴細(xì)胞的免疫細(xì)胞也會分泌抗原呈遞外泌體(antigenpresentingvesicle),所分泌的外泌體可以直接刺激效應(yīng)CD4+細(xì)胞的抗**反應(yīng)。2007年HValadi等進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)細(xì)胞之間可以通過外泌體中RNA交換遺傳物質(zhì)。隨著有關(guān)外泌體研究越來越多,研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原呈遞、細(xì)胞分化、**生長于侵襲等各種生物過程中。天津外泌體提取