利用EAE動物模型,科學(xué)家們能夠深入研究多發(fā)性硬化癥(MS)患者可能出現(xiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙及其康復(fù)機(jī)制。這一模型不僅模擬了MS在人體內(nèi)的病理過程,還使得我們可以在控制實驗條件的情況下,觀察和研究神經(jīng)系統(tǒng)受損后的功能變化。通過對比正常動物與EAE模型動物在行為、感覺和運(yùn)動等方面的差異,我們可以揭示MS患者可能出現(xiàn)的神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙的具體表現(xiàn),并探究這些功能障礙背后的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制。同時,利用EAE動物模型,我們還可以測試不同的康復(fù)療愈方法,評估它們對神經(jīng)系統(tǒng)功能恢復(fù)的效果,為MS患者的康復(fù)療愈提供科學(xué)依據(jù)。因此,利用EAE動物模型研究MS患者的神經(jīng)系統(tǒng)功能障礙及其康復(fù)機(jī)制,對于改善MS患者的生活質(zhì)量具有重要意義。
EAE是由針對CNS髓鞘發(fā)生免疫攻擊的CD4+T介導(dǎo)的自身免疫性疾病,抗原致敏的T細(xì)胞穿過血腦屏障進(jìn)入中樞,誘發(fā)對自身髓鞘抗原的免疫應(yīng)答,導(dǎo)致腦及脊髓的免疫損傷。EAE是人類MS的經(jīng)典動物模型,通過對EAE發(fā)病機(jī)制、病情發(fā)***展規(guī)律、臨床及病理改變、***及預(yù)防等方面的深入研究,能夠為MS的***提供充分的實驗依據(jù)。國內(nèi)外學(xué)者試用多種易感動物建立EAE模型,以期闡明MS及EAE的發(fā)病機(jī)制,并為其病情的監(jiān)測、復(fù)發(fā)的預(yù)防、***方案的選擇以及新療法或新藥物的篩選等提供可靠依據(jù)。云南真實的eae模型是哪家EAE模型的發(fā)生也存在動物性別差異。
EAE模型的被動轉(zhuǎn)移實驗是研究其發(fā)病機(jī)制的**直接證據(jù),也是研究EAE的***及預(yù)防措施的良好模型。將抗原***的PLP特異性T細(xì)胞轉(zhuǎn)輸給同一品系的正常大鼠或小鼠,也可引起EAE。MBP特異性自身反應(yīng)性T細(xì)胞在MS的發(fā)病機(jī)制中也起著關(guān)鍵作用,T細(xì)胞必須先在外周活化,通過血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)入CNS才能致病。EAE的神經(jīng)癥狀通常根據(jù)Kono等提出的標(biāo)準(zhǔn)分為5級。0級:無任何臨床癥狀;1級:動物尾巴無力,2級:尾部無力+肢體無力,3級:肢體輕度麻痹,4級:肢體嚴(yán)重麻痹,被動翻身后不能復(fù)原;5級:瀕死狀態(tài)或死亡。
通常不同品種動物對同一抗原的敏感性不同、不同抗原的抗原性也不同,并且不同來源的同一抗原的活性也有明顯差異。一般情況下,抗原性強(qiáng)弱依次為豚鼠脊髓>大鼠脊髓>牛脊髓,脊髓組織>腦組織,豚鼠MBP>牛MBP。蛋白或多肽單體不但結(jié)構(gòu)明確,而且可以精確定量,因此利于進(jìn)行EAE發(fā)病機(jī)制研究,但不易獲得。脊髓勻漿和腦組織勻漿兩種抗原均含有多種抗原表位,且易于獲得,適用于多種動物,但其成分復(fù)雜,不易精確定量,這給某些特殊研究造成不便。誘導(dǎo)鼠類產(chǎn)生EAE模型的異種抗原,以新鮮豚鼠脊髓制備的抗原佐劑乳化物為比較好。在一定范圍內(nèi)抗原的量和EAE的發(fā)病率及發(fā)病程度有相關(guān)性,注射抗原佐劑乳化物的劑量越大,EAE的發(fā)病率越高??乖膭┝靠梢騽游锏钠废怠⒖乖N類、免疫方法、研究目的等的不同而有很大變化。另外,抗原的物理狀態(tài)也很重要,高分散度的抗原易于被吞噬和遞呈,進(jìn)而較高效率地***免疫系統(tǒng)。EAE小鼠模型可以反映MS的很多臨床特征。
EAE模型是實驗動物通過神經(jīng)組織(其中的某些成分)或病毒誘導(dǎo)產(chǎn)生的。EAE的誘導(dǎo)有主動誘導(dǎo)法和被動誘導(dǎo)法兩種。不同的免疫方法,可影響抗原遞呈,激發(fā)不同的免疫反應(yīng),這不但影響EAE的發(fā)生率,還可影響其發(fā)展與轉(zhuǎn)歸。通常采用主動誘導(dǎo)法制備EAE模型,將抗原與佐劑的混合乳劑直接注射至動物體內(nèi),經(jīng)過一定時間的潛伏期,誘導(dǎo)EAE的產(chǎn)生??乖⑸洳课坏牟煌捎绊慐AE的發(fā)生率、潛伏期、死亡率及復(fù)發(fā)率。常用的注射部位有腳墊、頸部及背部(皮下、皮內(nèi)、肌肉)、腹腔和尾靜脈等多種,其中以皮下多點注射及腳墊注射的發(fā)病率比較高,而頸部注射則有較高的復(fù)發(fā)率。 因多次注射易引發(fā)免疫耐受,現(xiàn)在多采用單次注射抗原法??乖T導(dǎo)EAE模型后一般都在注射抗原佐劑乳化物后10d左右開始出現(xiàn)癥狀。江蘇比較好的eae模型實驗外包
自身免疫性腦脊髓(EAE)模型是古老、常用的人類MS實驗?zāi)P?。湖北真實的eae模型動物實驗外包
用大鼠制備EAE有許多優(yōu)點,如品系多,選擇余地大,繁殖快,同一品系中個體間差異小,實驗方便。其中Lewis大鼠誘發(fā)的EAE具有穩(wěn)定性好、敏感性高等特點,其病程為單相,多數(shù)可自行恢復(fù),對再次誘發(fā)很快產(chǎn)生強(qiáng)的耐受性,多用作EAE激發(fā)和緩解機(jī)制的研究。而SJL/L及PL/J小鼠對再次誘發(fā)的敏感性沒有明顯降低,且?guī)缀蹩梢姷饺祟怣S的所有病理改變,可誘發(fā)出更接近于人類MS的緩解復(fù)發(fā)型EAE模型,但它的EAE發(fā)生率及潛伏期變化較大。人們對小鼠的遺傳背景了解得比較清楚,因此小鼠更適用于有關(guān)基因、細(xì)胞間作用等領(lǐng)域的研究。然而不同品系小鼠對EAE的敏感性也不同,有人將其分為EAE—易感(EAE—susceptible)和EAE—抵抗(EAE?resistant)兩種類型?;蛐头治鼋Y(jié)果表明,單倍型為H?2s的小鼠(如SJL/J)及H?2q的小鼠(如DBA1/J)屬于EAE—易感型。C57BL/10J及P/J小鼠可發(fā)生輕微的脫髓鞘病變。BABL/C和AKR/J小鼠基本不發(fā)生EAE,被認(rèn)為是EAE—抵抗小鼠。湖北真實的eae模型動物實驗外包