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TTC(2,3,5-三苯基四氮唑氯化物)染色是一種常用的組織學(xué)染色方法,主要用于檢測組織中的活性心肌細(xì)胞和腦組織的缺血性損傷。TTC染色在實驗研究中特別有用,尤其是在評估心肌梗死和腦卒中模型中的缺血區(qū)域。TTC染色的基本原理TTC是一種無色的水溶性化合物,在活細(xì)胞中通過線粒體內(nèi)的脫氫酶的作用被還原成紅色的不溶性產(chǎn)物——甲臜(formazan)。這種紅色產(chǎn)物只在有代謝活性的細(xì)胞中形成,而在壞死或缺血的細(xì)胞中則不會被還原,因此這些區(qū)域保持無色或白色。應(yīng)用領(lǐng)域1. 心肌梗死模型:?在心肌梗死的研究中,TTC染色用于區(qū)分正常的心肌組織和梗死區(qū)域。正常的心肌組織會被染成紅色,而梗死區(qū)域則呈現(xiàn)白色。?通過測量梗死區(qū)域與總心肌面積的比例,可以定量分析心肌梗死的程度。Picrosirius紅染色用于顯示心臟和腎臟中的膠原纖維。甲苯胺藍(lán)染色效果
?病理染色流程之組織脫水:樣品經(jīng)過固定后,將通過一系列的酒精梯度逐步脫水,然后用二甲苯透明化,***浸入石蠟中。這一系列步驟旨在去除組織中的水分,使其變得堅硬并易于切片。?石蠟包埋區(qū):脫水后的組織被包裹在石蠟中,形成一個堅硬的塊狀物,便于后續(xù)的切片操作。?切片制作區(qū):使用石蠟切片機(jī)(如Leica HistoCore MULTICUT)將包埋好的組織切成薄片(通常為4-5微米厚),以便于進(jìn)一步的染色和觀察。
英瀚斯專業(yè)病理實驗平臺,從取材固定包埋脫水切片染色拍照分析,一站式完成。 南京六胺銀染色哪家好常規(guī)染色包括:HE, Masson、免疫組化、免疫熒光染色等。
病理實驗外包常見染色介紹:天狼星紅染色(Sirius Red Staining)天狼星紅染色是一種廣泛應(yīng)用于組織學(xué)研究中的染色方法,特別適用于顯示膠原纖維的分布和結(jié)構(gòu)。該染色技術(shù)利用了天狼星紅染料對膠原纖維的高度親和力,在偏振光下可以觀察到不同類型的膠原纖維呈現(xiàn)出不同的顏色。染色原理:?染料特性:天狼星紅是一種陽離子染料,它能夠與膠原纖維中的負(fù)電荷基團(tuán)結(jié)合,從而產(chǎn)生強(qiáng)烈的紅色染色效果。?偏振光下的表現(xiàn):在偏振光顯微鏡下,I型膠原纖維呈現(xiàn)亮黃色或橙紅色,而III型膠原纖維則呈現(xiàn)綠色或黃色。這種顏色差異使得天狼星紅染色成為區(qū)分不同類型膠原纖維的有效手段。?其他成分:除了膠原纖維外,細(xì)胞核通常被染成藍(lán)黑色或淡藍(lán)色,而肌肉和其他非膠原組織則保持無色或淡粉色。應(yīng)用范圍:?心肌梗死模型:天狼星紅染色可以用于檢測心肌梗死后的心臟組織中膠原纖維的沉積情況,評估心肌修復(fù)和纖維化的程度。?肺纖維化:通過天狼星紅染色,研究人員可以定量分析肺組織中的膠原纖維含量,評估肺纖維化的嚴(yán)重程度。?肝纖維化:在肝臟疾病的研究中,天狼星紅染色常用來顯示肝組織中的膠原纖維沉積,幫助診斷和評估肝纖維化的進(jìn)展。
相較于IHC染色是針對「蛋白質(zhì)」抗原,化學(xué)染色法則是針對組織的化學(xué)及物理特性進(jìn)行染色。??免疫組織化學(xué)染色(IHC):針對要觀察的蛋白質(zhì)「抗原」,選擇具專一性的「抗體」來進(jìn)行標(biāo)定。具有高度專一性的特點(diǎn),但會受檢體固定及保存品質(zhì)極大的影響。??原位雜合試驗(ISH):使用核酸探針(probe)來標(biāo)定組織中的特定核酸片段。相較于IHC用于分析蛋白質(zhì),ISH則是用以分析核酸在組織中的分布。在缺乏專一性抗體可以使用的情形下,ISH可藉由偵測相關(guān)核酸片段,達(dá)到直接或間接檢測特定病原或蛋白質(zhì)前趨物的作用。病理染色是診斷模型是否造模成功的重要工具。
TUNEL染色能夠特異性地標(biāo)記DNA斷裂的末端,因此具有很高的特異性。?靈敏度高:即使在早期凋亡階段,TUNEL染色也能檢測到少量的DNA斷裂。?適用范圍廣:適用于多種類型的組織和細(xì)胞樣本。注意事項?對照設(shè)置:為了確保結(jié)果的準(zhǔn)確性,應(yīng)設(shè)置陽性對照(已知的凋亡細(xì)胞)和陰性對照(無TdT酶的對照組)。?背景信號:有時會出現(xiàn)非特異性的背景信號,需要注意優(yōu)化實驗條件以減少背景噪聲。?固定和通透性:正確的固定和通透處理對于獲得良好的染色結(jié)果至關(guān)重要??偨Y(jié)TUNEL染色是一種強(qiáng)大的工具,用于檢測和定位細(xì)胞凋亡過程中的DNA斷裂。它在細(xì)胞生物學(xué)、病理學(xué)和藥物研發(fā)等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用。通過TUNEL染色,研究人員可以獲得關(guān)于細(xì)胞凋亡的詳細(xì)信息,從而更好地理解疾病的發(fā)病機(jī)制和藥物的作用效果。內(nèi)容由AI生成Alcian藍(lán)染色用于檢測酸性粘液物質(zhì)。南京鍍銀染色結(jié)果分析
染色切片是病理層面診斷模型的重要工具。甲苯胺藍(lán)染色效果
TUNEL染色的染色步驟1. 樣品準(zhǔn)備:?將組織切片或細(xì)胞固定在載玻片上,通常使用4%多聚甲醛或其他固定劑。?進(jìn)行蛋白酶K處理,以增加細(xì)胞膜的通透性,使TdT能夠進(jìn)入細(xì)胞并接觸DNA。2. TUNEL反應(yīng):?準(zhǔn)備TUNEL反應(yīng)混合液,包括TdT酶和標(biāo)記的dUTP(如熒光素或生物素標(biāo)記的dUTP)。?將反應(yīng)混合液滴加到樣品上,在適當(dāng)?shù)臏囟认路跤欢〞r間(通常為1小時左右)。3. 洗滌:?用PBS緩沖液或其他適當(dāng)?shù)南礈煲呵逑礃悠罚コ唇Y(jié)合的dUTP。4. 信號檢測:?如果使用的是熒光素標(biāo)記的dUTP,可以直接在熒光顯微鏡下觀察。?如果使用的是生物素標(biāo)記的dUTP,則需要進(jìn)一步與鏈霉親和素-熒光素復(fù)合物或其他顯色試劑結(jié)合,然后在顯微鏡下觀察。甲苯胺藍(lán)染色效果