樣品的溶血、脂血、黃疸等會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生非化學(xué)反應(yīng)的干擾。因此,應(yīng)根據(jù)溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性,采用雙波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)的檢測(cè)模式,并在結(jié)果計(jì)算中扣除因溶血、脂血、黃疸引起的影響,減少干擾程度。每種待測(cè)物都有一個(gè)可測(cè)定的濃度或活性范圍,樣品結(jié)果若超過(guò)此范圍,分析儀將顯示結(jié)果超過(guò)范圍的提示。表示試劑已經(jīng)變質(zhì),應(yīng)更換合格試劑。使用連續(xù)監(jiān)測(cè)法、兩點(diǎn)法測(cè)定酶活性時(shí),若酶活性非常高,底物接近被耗盡,吸光度上升或下降會(huì)超過(guò)某一吸光度變化范圍,監(jiān)測(cè)期的吸光度將偏離線性,使測(cè)定結(jié)果不可靠。檢測(cè)試劑盒使液體充沛混合均勻,也使其得到充沛的反應(yīng)。奧氏試劑(Offner's Reagent)
檢測(cè)試劑盒檢測(cè)數(shù)據(jù)的處理步驟:實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確度。準(zhǔn)確度是測(cè)定值與實(shí)在值挨近的程度。為了獲得牢靠的成果,在實(shí)踐工作中人們總是在相同條件下,多測(cè)定幾回,然后求平均值,作為測(cè)定值。一般把這幾回在相同條件下的測(cè)定叫平行測(cè)定。如果這幾個(gè)數(shù)據(jù)相互比較挨近,就闡明剖析的精密度高。精密度。檢測(cè)試劑盒精密度是幾回平行測(cè)定成果相互挨近的程度。實(shí)驗(yàn)精密度和準(zhǔn)確度的聯(lián)系。精密度是確保準(zhǔn)確度的先決條件。高精密度不一定確保高準(zhǔn)確度。蛋白甘油粘貼劑檢測(cè)試劑盒如為有菌操作,則主張冰凍保存。
在緩沖溶液中加入少量強(qiáng)酸或強(qiáng)堿,其溶液pH值變化不大,但若加入酸,堿的量多時(shí),緩沖溶液就失去了它的緩沖作用。這說(shuō)明它的緩沖能力是有一定限度的。緩沖溶液的緩沖能力與組成緩沖溶液的組分濃度有關(guān)。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· L-1NaAc組成的緩沖溶液,比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的緩沖溶液緩沖能力大。關(guān)于這一點(diǎn)通過(guò)計(jì)算便可證實(shí)。但緩沖溶液組分的濃度不能太大,否則,不能忽視離子間的作用。組成緩沖溶液的兩組分的比值不為1∶1時(shí),緩沖作用減小,緩沖能力降低,當(dāng)c(鹽)/c(酸)為1∶1時(shí)△pH小,緩沖能力大。不論對(duì)于酸或堿都有較大的緩沖作用。
檢測(cè)試劑盒操作注意事項(xiàng):檢測(cè)試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液即可視為陰性對(duì)照或者空白;預(yù)處理后的樣本無(wú)需稀釋,直接取10μL加樣即可。嚴(yán)格按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。所有液體組分使用前充分搖勻。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值??蒲袑?shí)驗(yàn)中試劑取用應(yīng)注意事項(xiàng):讀數(shù)時(shí)量筒必須放平穩(wěn)。
試劑空白吸光度是反映試劑質(zhì)量的指標(biāo)之一,但不能反映試劑質(zhì)量的全部。試劑成份、純度、用量及穩(wěn)定性,才是保證試劑質(zhì)量的關(guān)鍵所在。目前市售的一些試劑具有抗干擾作用,主要是通過(guò)加入抗干擾物質(zhì)或使用新的色素原以避免內(nèi)源性物質(zhì)的干擾。但值得注意的是:一些試驗(yàn)項(xiàng)目在消除內(nèi)源性物質(zhì)干擾的同時(shí),會(huì)帶來(lái)樣品含量真實(shí)性的變化。 線性范圍變窄 現(xiàn)象:高值測(cè)不高。原因:生產(chǎn)試劑時(shí)有效成分投料量不足;試劑成份穩(wěn)定性較差。靈敏度變低現(xiàn)象:酶促反應(yīng)速度曲線斜率下降,測(cè)定結(jié)果有嚴(yán)重系統(tǒng)誤差。原因:試劑底物濃度不足。檢測(cè)試劑盒的要點(diǎn)有哪些?在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。免疫染色洗滌液
挑選ELISA檢測(cè)試劑盒的方法:靈敏度。反應(yīng)的是檢測(cè)試劑盒檢出被檢物質(zhì)的低量的才行。奧氏試劑(Offner's Reagent)
亞甲基藍(lán)染色液(1%)使用說(shuō)明 貨號(hào):G1303 規(guī)格:100ml 保存:室溫,避光,12 個(gè)月。 產(chǎn)品說(shuō)明: 亞甲基藍(lán)(Methylene blue)又稱美藍(lán)、次甲基藍(lán)、次甲藍(lán)等,是一種芳香雜環(huán)化合物。含水 亞甲基藍(lán)的分子式為 C16H24ClN3O3S,分子量為 373.9,CAS 號(hào)為 7220-79-3。亞甲基藍(lán)染色 液常用于絲綢、紙張、細(xì)菌、細(xì)胞等染色。因其容易氧化,染色結(jié)果不宜長(zhǎng)久保存。 操作說(shuō)明:(光供參考) 1、 樣品處理 (1) (2) (3) 對(duì)于石蠟切片:常規(guī)脫蠟復(fù)水。 對(duì)于冰凍切片:蒸餾水 2min。 對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞:先用 4%多聚甲醛固定,然后蒸餾水洗滌 2min,較后 換用新鮮的蒸餾水,再洗滌 2min。 2、 美藍(lán)染色 (1) (2) 染色結(jié)果: Methylene blue Stain(1%)染色。 用蒸餾水或自來(lái)水充分洗滌,進(jìn)行觀察和拍照。 組織或細(xì)胞 藍(lán)色 注意事項(xiàng): 1、 開(kāi)始次使用本試劑時(shí)建議先取 1~2 個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。 2、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。奧氏試劑(Offner's Reagent)