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來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-04-18

操作方法:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。3.加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。4.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6.結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽性。按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。廣東認(rèn)可ELISA試劑盒信息推薦

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夾心ELISA試劑盒在檢測(cè)大分子抗原時(shí)具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。它采用了雙抗體夾心法的原理。首先將捕獲抗體包被在微孔板上。然后加入含有待測(cè)抗原的樣本,抗原會(huì)與捕獲抗體特異性結(jié)合。接著加入檢測(cè)抗體,檢測(cè)抗體也是針對(duì)待測(cè)抗原的特異性抗體,但與捕獲抗體識(shí)別抗原的不同位點(diǎn)。檢測(cè)抗體與已經(jīng)結(jié)合在捕獲抗體上的抗原結(jié)合,形成“抗體-抗原-抗體”的夾心結(jié)構(gòu)。加入酶標(biāo)記的二抗,二抗與檢測(cè)抗體結(jié)合,再加入底物進(jìn)行顯色檢測(cè)。這種方法的靈敏度非常高,能夠準(zhǔn)確檢測(cè)出低濃度的抗原。它特別適合于檢測(cè)蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì),在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中,對(duì)于檢測(cè)細(xì)胞因子、等大分子生物分子的含量有著普遍的應(yīng)用。江蘇包含什么ELISA試劑盒價(jià)位上海伊麗薩生物科技,進(jìn)口ELISA試劑盒代理領(lǐng)域的佼佼者。

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在食品安全檢測(cè)領(lǐng)域,ELISA試劑盒在獸藥殘留檢測(cè)方面發(fā)揮著重要作用。隨著養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,獸藥的使用日益,但獸藥殘留可能會(huì)對(duì)人體健康造成危害。ELISA試劑盒可以快速、靈敏地檢測(cè)動(dòng)物源性食品中的獸藥殘留,如檢測(cè)肉類、蛋類、奶類中的殘留。例如,檢測(cè)牛奶中的β-內(nèi)酰胺類殘留的ELISA試劑盒,能夠在短時(shí)間內(nèi)確定牛奶中是否存在此類殘留,確保食品安全。這種檢測(cè)方法操作相對(duì)簡單,不需要復(fù)雜的儀器設(shè)備,適合在基層檢測(cè)機(jī)構(gòu)和企業(yè)中廣泛應(yīng)用。

在自身免疫性疾病的診斷中,ELISA試劑盒不可或缺。以類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)為例,該疾病患者體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生針對(duì)自身關(guān)節(jié)組織的抗體,如類風(fēng)濕因子(RF)和抗環(huán)瓜氨酸肽(抗-CCP)抗體。ELISA試劑盒能夠精確地檢測(cè)血清中的這些抗體。系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者體內(nèi)存在多種自身抗體,如抗核抗體(ANA)等,通過ELISA試劑盒可以對(duì)這些抗體進(jìn)行定量檢測(cè)。這有助于醫(yī)生準(zhǔn)確判斷疾病的活動(dòng)程度,因?yàn)榭贵w水平往往與疾病的嚴(yán)重程度相關(guān)。對(duì)于干燥綜合征,ELISA試劑盒可檢測(cè)抗SS-A和抗SS-B抗體等標(biāo)志物。這些檢測(cè)結(jié)果為自身免疫性疾病的早期診斷、病情監(jiān)測(cè)和治療方案的調(diào)整提供了關(guān)鍵依據(jù)。進(jìn)口ELISA試劑盒,上海伊麗薩生物科技代理品牌產(chǎn)品的性價(jià)比超高,一握伊麗薩的手。

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ELISA試劑盒在環(huán)境監(jiān)測(cè)中的水體污染檢測(cè)方面有獨(dú)特的應(yīng)用。水體中可能存在各種污染物,如重金屬離子的有機(jī)結(jié)合物、某些有機(jī)污染物等。ELISA試劑盒可以檢測(cè)水體中的特定污染物,例如,一些重金屬離子如汞、鉛等與生物分子結(jié)合后形成的復(fù)合物可以被ELISA試劑盒檢測(cè)。對(duì)于有機(jī)污染物,如多環(huán)芳烴的某些衍生物,通過制備特異性的抗體,ELISA試劑盒能夠識(shí)別這些污染物在水體中的存在。這種檢測(cè)方式相對(duì)于傳統(tǒng)的化學(xué)分析方法,具有操作簡便、成本較低等優(yōu)點(diǎn)。它可以對(duì)水體污染情況進(jìn)行快速篩查,為環(huán)境治理和保護(hù)提供及時(shí)的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)。進(jìn)口ELISA試劑盒,上海伊麗薩生物科技代理品牌產(chǎn)品的操作更簡便。成都Novateinbio ELISA試劑盒的線性范圍

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在土壤污染物檢測(cè)中,ELISA試劑盒也有用武之地。土壤中的污染物如多氯聯(lián)苯(PCBs)是一類持久性有機(jī)污染物,對(duì)生態(tài)環(huán)境和人類健康危害極大。ELISA試劑盒可以通過將PCBs與特定的半抗原結(jié)合,使其能夠被抗體識(shí)別。微孔板上包被有針對(duì)PCBs-半抗原復(fù)合物的抗體,當(dāng)土壤提取液中的PCBs-半抗原復(fù)合物與抗體結(jié)合后,經(jīng)過酶標(biāo)記和底物反應(yīng)來檢測(cè)土壤中的PCBs含量。此外,對(duì)于土壤中的重金屬污染,同樣可以采用類似水體中重金屬檢測(cè)的方法,通過ELISA試劑盒檢測(cè)土壤中的重金屬離子濃度,為土壤污染治理和修復(fù)提供依據(jù)。廣東認(rèn)可ELISA試劑盒信息推薦