ELISA,即酶聯(lián)免疫吸附測定(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay),其試劑盒基于抗原-抗體特異性結(jié)合的原理。在試劑盒中,首先將已知的抗原或抗體固定在微孔板的表面。如果檢測樣本中含有相應(yīng)的抗體或抗原,就會與之特異性結(jié)合。然后加入酶標(biāo)記的二抗或抗原,這種酶標(biāo)記物能夠與之前結(jié)合的物質(zhì)再次特異性結(jié)合。加入底物,在酶的催化作用下,底物發(fā)生顏色反應(yīng)或化學(xué)發(fā)光反應(yīng)等可檢測的信號變化。通過檢測信號的強(qiáng)度,可以定量或定性地分析樣本中的目標(biāo)物質(zhì)。例如在檢測某種疾病相關(guān)蛋白時(shí),樣本中的蛋白與微孔板上固定的抗體結(jié)合,后續(xù)的反應(yīng)步驟逐步放大信號,從而實(shí)現(xiàn)對低濃度蛋白的精確檢測。上海伊麗薩生物科技,進(jìn)口ELISA試劑盒代理的實(shí)力之選。遼寧有什么ELISA試劑盒器材
ELISA試劑盒中的封閉液是為了減少非特異性結(jié)合而使用的。在將抗原或抗體包被在微孔板后,微孔板表面可能還存在一些未被包被的活性位點(diǎn)。如果不進(jìn)行封閉,在加入樣本或其他試劑時(shí),這些位點(diǎn)可能會與樣本中的其他物質(zhì)非特異性結(jié)合,從而干擾檢測結(jié)果。封閉液通常含有一些蛋白質(zhì),如牛血清白蛋白(BSA)或脫脂奶粉等。這些蛋白質(zhì)可以與微孔板上的未被包被的活性位點(diǎn)結(jié)合,從而封閉這些位點(diǎn),減少非特異性結(jié)合的可能性。正確使用封閉液并選擇合適的封閉時(shí)間和濃度,對于提高ELISA試劑盒檢測的特異性和準(zhǔn)確性非常重要。上海專業(yè)ELISA試劑盒電話多少進(jìn)口ELISA試劑盒的代理,上海伊麗薩生物科技等你來。
操作方法:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3.加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。4.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6.結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
在內(nèi)分泌疾病的臨床診斷中,ELISA試劑盒是一種有效的檢測手段。例如在甲狀腺疾病的檢測方面,它可以用于檢測甲狀腺如促甲狀腺(TSH)、甲狀腺素(T4)、三碘甲狀腺原氨酸(T3)以及甲狀腺自身抗體如甲狀腺過氧化物酶抗體(TPOAb)和甲狀腺球蛋白抗體(TgAb)等。通過檢測這些指標(biāo),可以診斷甲狀腺功能亢進(jìn)、甲狀腺功能減退等疾病,并了解甲狀腺自身免疫狀態(tài)。在糖尿病的檢測中,ELISA試劑盒也可用于檢測胰島素、C-肽等相關(guān)指標(biāo),有助于評估胰島功能和糖尿病的病情。深圳Novateinbio ELISA試劑盒特惠活動(dòng)。
ELISA試劑盒在農(nóng)藥殘留檢測中也扮演著重要角色。以有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測為例,由于有機(jī)磷農(nóng)藥在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中普遍使用,其殘留可能會污染農(nóng)產(chǎn)品。ELISA試劑盒的微孔板可以固定有針對有機(jī)磷農(nóng)藥的特異性抗體。當(dāng)農(nóng)產(chǎn)品樣本中的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留與抗體結(jié)合后,再經(jīng)過酶標(biāo)記和底物反應(yīng),就能夠檢測出農(nóng)藥殘留量。這種檢測方法具有快速、簡便、成本相對較低等優(yōu)點(diǎn),能夠在農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)入市場前對其進(jìn)行大規(guī)模篩查,保障農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量安全,減少因農(nóng)藥殘留對人體健康的潛在威脅。進(jìn)口ELISA試劑盒,上海伊麗薩生物科技代理,科研人員的福音。南京Novateinbio ELISA試劑盒科學(xué)應(yīng)用
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在土壤污染檢測中,ELISA試劑盒也能發(fā)揮作用。土壤中可能存在多種污染物,包括有機(jī)污染物如多氯聯(lián)苯(PCB)和重金屬等。ELISA試劑盒可以通過檢測土壤提取物中的目標(biāo)污染物來評估土壤污染狀況。例如,對于多氯聯(lián)苯,它是一種持久性有機(jī)污染物,ELISA試劑盒利用特異性抗體識別土壤提取物中的多氯聯(lián)苯。對于重金屬污染,雖然直接檢測重金屬離子有一定難度,但可以檢測重金屬離子與土壤中生物分子結(jié)合形成的復(fù)合物。這種檢測方法有助于快速了解土壤污染的大致情況,為進(jìn)一步的詳細(xì)分析和土壤修復(fù)工作提供初步的依據(jù)。遼寧有什么ELISA試劑盒器材