采用何種方法進(jìn)行RCR/RCL病毒檢測？復(fù)制型病毒（RCR/RCL）是γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒載體與慢病毒載體的一個安全性質(zhì)量控制項目，因病毒載體設(shè)計的不同，產(chǎn)生復(fù)制型病毒的風(fēng)險也會有不同，如采用四質(zhì)粒共轉(zhuǎn)體系以及含有末端自我失活（SelfInactivating，SIN）結(jié)構(gòu)的病毒載體，其病毒載體生產(chǎn)過程中產(chǎn)生RCL的風(fēng)險會明顯降低，但盡管如此，產(chǎn)生RCR/RCL的風(fēng)險仍不能完全排除，因此仍需要對病毒載體進(jìn)行RCR/RCL的檢測，且病毒載體不得檢出RCR/RCL。為什么要做復(fù)制型逆轉(zhuǎn)錄病毒檢測？qPCR法病毒檢測常見問題

慢病毒(lentivirus)屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒家族，蕞為人熟知的慢病毒是人免疫缺陷病毒(HIV),來源于慢病毒的復(fù)制缺陷病毒載體已成功用于介導(dǎo)目的基因在靶向細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和表達(dá)，且能夠?qū)⑼庠椿?span style="color:#f5c81c;">有效地整合到宿主染色體上，從而達(dá)到持久性表達(dá)。目前基因治  療產(chǎn)品所用慢病毒載體均是非復(fù)制型的，但在病毒包裝過程中，可能會由于同源或非同源重組等機制產(chǎn)生復(fù)制型慢病毒(RCL)。出于安全、有效、質(zhì)量可控的考慮，應(yīng)當(dāng)進(jìn)行復(fù)制能力慢病毒檢測，以避免在人體內(nèi)無控地自我復(fù)制，造成傷害，防止發(fā)生臨床安全性隱患事件。南京RT-PCR法病毒檢測服務(wù)復(fù)制型逆轉(zhuǎn)錄病毒檢測方法有哪些？

用qPCR法進(jìn)行rcAAV復(fù)制型腺相關(guān)病毒檢測時，出現(xiàn)擴增曲線異常的可能原因是什么？①如出現(xiàn)非特異性擴增現(xiàn)象：反應(yīng)管未蓋緊或密閉性差引起溶液蒸發(fā)而造成。上機前確保管蓋密閉，反應(yīng)結(jié)束后查看八聯(lián)管或96孔板各管液面是否一致。與設(shè)備硬件相關(guān)，需咨詢硬件供應(yīng)商解決。②如出現(xiàn)擴增曲線不平滑現(xiàn)象：可能與ROX加入量不足相關(guān)，個別設(shè)備有ROX校正功能，不同型號設(shè)備對ROX的需求量會有差異，需設(shè)置實驗摸索合適的ROX加入量。歡迎了解正揚

《中國藥典》2020版三部《人用基因醫(yī)治制品總論》以及CDE發(fā)布的細(xì)胞基因醫(yī)治相關(guān)的技術(shù)指導(dǎo)原則中均提到，在設(shè)計為復(fù)制缺陷型或條件復(fù)制型載體的情況下，應(yīng)分析是否存在殘留的復(fù)制型或野生型載體及其水平。南京正揚生物科技有限公司自主研發(fā)生產(chǎn)的復(fù)制性腺相關(guān)病毒檢測試劑盒，可同時分別精確測定樣品中高濃度的目標(biāo)載體和低濃度的復(fù)制型載體濃度，從而有效地提高了方法靈敏度，滿足法規(guī)要求的無復(fù)制型腺相關(guān)病毒（rcAAV）的污染，可用于GMP生產(chǎn)的rAAV質(zhì)量控制。慢病毒檢測助力CAR-T細(xì)胞醫(yī)治產(chǎn)品質(zhì)控放行。

基于細(xì)胞培養(yǎng)法和qPCR快檢法都能實現(xiàn)對重組腺相關(guān)病毒載體(rAAV)中復(fù)制型腺相關(guān)病毒(rcAAV)的污染率的檢測，但兩者在實際檢測中都存在檢測值不夠準(zhǔn)確的風(fēng)險（基于細(xì)胞培養(yǎng)法存在低于實際值的風(fēng)險qPCR快檢法存在高于實際值的風(fēng)險）。南京正揚生物科技有限公司自主研發(fā)生產(chǎn)的復(fù)制性腺相關(guān)病毒檢測試劑盒（PCR熒光探針法）是一款既適用于基于細(xì)胞培養(yǎng)法對rcAAV的檢測，也適用于對rcAAV的直接檢測的試劑盒，可達(dá)到兩種方法間相互驗證、相互補充的目的。試劑盒中Reference基因和Target基因包含在同一定量參考品中可同時實現(xiàn)對rAAV載體和rcAAV濃度快速、靈敏、特異性的定量檢測。qPCR法復(fù)制型慢病毒檢測的優(yōu)點有哪些？鄭州重組腺相關(guān)病毒檢測廠家

復(fù)制型病毒檢測試劑盒適用性樣品有哪些？qPCR法病毒檢測常見問題

南京正揚生物科技有限公司自主研發(fā)生產(chǎn)的RCL基因拷貝數(shù)檢測試劑盒（RT-PCR熒光探針法）、RCR基因拷貝數(shù)檢測試劑盒（RT-PCR熒光探針法）、rcAAV-5/N檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）既適用于基于細(xì)胞培養(yǎng)法對復(fù)制型病毒的qPCR法的檢測，也適用于對無細(xì)胞基質(zhì)的病毒收獲液（上清液）等樣品的復(fù)制型病毒檢測。試劑盒進(jìn)行了多面的性能驗證，靈敏度高、特異性強、穩(wěn)定性好、符合法規(guī)要求。南京正揚生物科技有限公司自主研發(fā)生產(chǎn)的RCL基因拷貝數(shù)檢測試劑盒（RT-PCR熒光探針法）、RCR基因拷貝數(shù)檢測試劑盒（RT-PCR熒光探針法）、rcAAV-5/N檢測試劑盒（PCR-熒光探針法）既適用于基于細(xì)胞培養(yǎng)法對復(fù)制型病毒的qPCR法的檢測，也適用于對無細(xì)胞基質(zhì)的病毒收獲液（上清液）等樣品的復(fù)制型病毒檢測。試劑盒進(jìn)行了多面的性能驗證，靈敏度高、特異性強、穩(wěn)定性好、符合法規(guī)要求。qPCR法病毒檢測常見問題