外泌體分離方法之親和層析分離法：在親和層析分離法方面，主要使用凝集素和合成Vn(venceremin)肽。凝集素將結(jié)合存在于外泌體表面的糖基化蛋白質(zhì)，從而使外泌體沉淀。Vn肽分離技術(shù)基于其對(duì)含有HSP的細(xì)胞外顆粒的高親和力。然而，這種方法比較容易使提取物被膜表面上含有上述標(biāo)記物的細(xì)胞和其他顆粒污染。外泌體分離方法之介電泳分離法：介電泳分離法主要利用不同大小的粒子在不均勻電場(chǎng)中的位置差異。外泌體被吸引到高電區(qū)域，而較大的顆粒將位于低電區(qū)域。該方法速度快，適合用于高通量篩選，但缺點(diǎn)是需要加熱。分離外泌體后需要通過電鏡等方式進(jìn)行鑒定。無(wú)錫外泌體穩(wěn)定性好

分離外泌體的方法之降水：它是一種基于生物體液中外泌體的電荷沉淀的方法。帶負(fù)電荷的外泌體可以與PEG35,000Da基質(zhì)中帶正電荷的魚精蛋白相互作用并形成沉淀。外泌體的回收和重懸比基于超速離心的分離更有效。聚合物沉淀法以更少的勞動(dòng)力和昂貴的設(shè)備分離尿外泌體的潛在益處。該方法首先利用DL-二硫蘇糖醇溶液還原或去除Tamm-Horsfall蛋白的聚合網(wǎng)絡(luò)，然后在25°C和30min下只用10,000×g的向心力即可實(shí)現(xiàn)外泌體的沉淀。還有利用聚合物沉淀方法并消除超速離心的商業(yè)試劑盒。ExoQuick?、Exo-spin?是來自Invitrogen?和miRCURY?的市售總外泌體分離試劑。無(wú)錫外泌體穩(wěn)定性好現(xiàn)有的外泌體分離方法可能存在樣品丟失和樣品污染的問題。

在生物流體中發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞外囊泡包括來自內(nèi)體，多泡體的細(xì)胞外泌體（30nm至150nm）和來自質(zhì)膜的微泡（150nm至1000nm）。目前已知有多種從生物體液中分離外泌體的方法除了使用高速離心機(jī)的離心分離法以外，還有色譜法、超濾過濾法、基于聚合物的沉淀和免疫分離法等。#外泌體干細(xì)胞#這些細(xì)胞外泌體分離方法提取的外泌體要警惕非外泌體顆粒污染，如凋亡小體、凋亡小囊泡、外泌體和脂蛋白，均會(huì)對(duì)獲得的外泌體生物活性產(chǎn)生影響。另外，分離方法也會(huì)影響細(xì)胞外泌體的純度和產(chǎn)量。如果要從培養(yǎng)基中分離外泌體，就要使用無(wú)血清培養(yǎng)基或無(wú)外泌體胎牛血清。

什么是外泌體？外泌體的作用。簡(jiǎn)單來說，它就是我們皮膚肌底細(xì)胞的分泌物，但是這個(gè)分泌物是除了細(xì)胞核外，把其他所有的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)都能涵蓋，所以它是取之于人類細(xì)胞用之于人類細(xì)胞，成分安全。外泌體不是干細(xì)胞，是干細(xì)胞較精華的部分，生物**為了獲取外泌體囊泡，將臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行分離、純化、培養(yǎng)、增殖等一系列復(fù)雜先進(jìn)工藝制備而成的外泌體混懸液，他是干細(xì)胞得以存活的精華，細(xì)胞是靠它生長(zhǎng)的，**對(duì)干細(xì)胞的獲取很容易的，但外泌體就比較難了，全球醫(yī)學(xué)**都在為研究外泌體的醫(yī)學(xué)應(yīng)用而付出努力，目前只有少數(shù)國(guó)家的細(xì)胞庫(kù)能夠成功獲取這一成果，其含有許多信號(hào)蛋白，核糖核酸，細(xì)胞生命DNA的密碼，一個(gè)細(xì)胞里95%是水，還有5%就是外泌體成分，其復(fù)雜特殊性比干細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)四五倍，精貴了一百倍他是干細(xì)胞的精華部分，保證了“干細(xì)胞”的所有功能并且具備干細(xì)胞未具備的功能———它能準(zhǔn)時(shí)抵達(dá)指定位置及時(shí)準(zhǔn)確治著替代衰老病變細(xì)胞。外泌體來源于細(xì)胞內(nèi)各種類型的囊泡，包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體和細(xì)胞膜等。

外泌體的表征方法之非光學(xué)方法：非光學(xué)方法主要包括掃描電子顯微鏡（SEM）、透射電子顯微鏡（TEM）、冷凍電子顯微鏡（Cryo-EM）、原子力顯微鏡（AFM）、免疫檢測(cè)方法（ELISA）、傅立葉變換紅外光譜（FTIR）、可調(diào)諧電阻脈沖傳感(TRPS)和單粒子干涉反射成像傳感器(SP-IRIS)。SEM、TEM和AFM方法通常用于直接膜結(jié)構(gòu)和形態(tài)測(cè)定，而ELISA檢測(cè)提供各種結(jié)構(gòu)顆粒（主要是蛋白質(zhì)和受體）的檢測(cè)和量化，例如，用于外泌體形態(tài)的確認(rèn)。單粒子干涉反射成像傳感器(SP-IRIS)也用于外泌體定量，但也可用于檢測(cè)特定標(biāo)記物和確定外泌體亞群。外泌體分離器材的選擇也對(duì)分離結(jié)果有一定的影響。無(wú)錫外泌體穩(wěn)定性好

外泌體的高純度分離是外泌體研究的基礎(chǔ)。無(wú)錫外泌體穩(wěn)定性好

分離外泌體的方法之微流控分離：基于微流體的外泌體分離可以包括用于外泌體捕獲的免疫親和方法，納米多孔膜篩分方法或微柱上的納米線用于外泌體捕獲。所有三個(gè)系統(tǒng)都需要具有粘彈性分析和電操作的芯片才能進(jìn)行外泌體分離過程。外泌體的特異性很高，采用基于微流控芯片的免疫親和捕獲方法。尺寸范圍在40-100nm之間的外泌體被這種微流體芯片特異性地捕獲，在外泌體分離和定量方面的益處。篩分方法可用于通過壓力或通過電泳從全血中過濾外泌體，壓力的利用使分離時(shí)間更短，電場(chǎng)導(dǎo)致高外泌體純度。特異性、可重復(fù)性、低分離時(shí)間和更低的分離成本是基于微流體的外泌體分離的一些優(yōu)點(diǎn)。無(wú)錫外泌體穩(wěn)定性好