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來源: 發(fā)布時間:2023-08-29

外泌體的構成:除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白(包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9)、熱休克蛋白家族((HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些細胞特異性的蛋白包括A33(結腸上皮細胞來源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈細胞來源)、CD86(抗原提呈細胞來源)以及乳凝集素(不成熟的樹突狀細胞)。其它一些外泌體中的蛋白包括多種的代謝類的酶(烯醇化酶1,醛縮酶1,PKM2,PGK1,PDIA3,GSTP1,DPP4,AHCY,TPL1,抗氧化蛋白,P4HB,LDH,親環(huán)素A,FASN,MDH1和CNP)、核糖體蛋白(RPS3)、信號轉導因子(黑色素瘤分化相關因子,ARF1,CDC42,人類紅細胞膜整合蛋白,SLC9A3R1)、粘附因子(MFGE8、整合素)、細胞骨架蛋白以及泛素等。外泌體來源于細胞內各種類型的囊泡,包括內質網(wǎng)、高爾基體和細胞膜等。重慶外泌體芯片檢測

什么是外泌體?外泌體的作用。簡單來說,它就是我們皮膚肌底細胞的分泌物,但是這個分泌物是除了細胞核外,把其他所有的營養(yǎng)物質都能涵蓋,所以它是取之于人類細胞用之于人類細胞,成分安全。外泌體不是干細胞,是干細胞較精華的部分,生物**為了獲取外泌體囊泡,將臍帶間充質干細胞進行分離、純化、培養(yǎng)、增殖等一系列復雜先進工藝制備而成的外泌體混懸液,他是干細胞得以存活的精華,細胞是靠它生長的,**對干細胞的獲取很容易的,但外泌體就比較難了,全球醫(yī)學**都在為研究外泌體的醫(yī)學應用而付出努力,目前只有少數(shù)國家的細胞庫能夠成功獲取這一成果,其含有許多信號蛋白,核糖核酸,細胞生命DNA的密碼,一個細胞里95%是水,還有5%就是外泌體成分,其復雜特殊性比干細胞的培養(yǎng)時間長四五倍,精貴了一百倍他是干細胞的精華部分,保證了“干細胞”的所有功能并且具備干細胞未具備的功能———它能準時抵達指定位置及時準確治著替代衰老病變細胞。鄭州細胞外泌體哪家好分離過程中避免對外泌體結構和功能造成影響至關重要。

細胞外泌體的來源和表征方法:細胞外泌體是直徑為30-150nm的血管外囊泡亞群。在過去的20年里,科學家已經(jīng)從包括正常細胞和病細胞在內的許多細胞類型中分離出外泌體,并且研究了它們對其他細胞的影響。外泌體是由多種大分子組成,例如核酸、蛋白質和脂質。細胞外泌體具有天然的特定細胞靶向特性,通常被設計用于靶向大分子(DNA和RNA)和藥物遞送系統(tǒng)(多柔比星、紫杉醇和紫杉醇)。目前常用細胞外泌體的分離方法主要是超速離心法、密度梯度離心法、超濾分離法、基于聚合物的沉淀法、親和沉淀分離法、免疫磁珠法和色譜法等。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是超速離心法,這是外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,但是純度不足,電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊,由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標準,也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心,這種操作簡單、省時,不影響外泌體的生物活性,但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法,用此種方法分離到的外泌體純度高,但是前期準備工作繁雜,耗時,量少。外泌體通過調節(jié)免疫系統(tǒng)和疙瘩微環(huán)境,在疙瘩免疫治著中的作用日益受到關注。

外泌體的物理表征方法:常用的外泌體物理表征方法是基于顯微鏡的方法,例如透射電子顯微鏡、掃描電子顯微鏡、低溫電子顯微鏡和原子力顯微鏡;動態(tài)光散射;納米粒子跟蹤分析;可調電阻脈沖傳感;和單個EV分析等。用于分析外泌體濃度、定量和概況的分子生物方法主要包括:實時定量PCR、數(shù)字PCR技術(基于芯片的dPCR、液滴數(shù)字PCR、ddPCR)、蛋白質免疫印跡、全基因組測序(next-generationsequencing)、exome-targetedsequencing(下一代測序)、微陣列圖譜技術和ELISA技術等。外泌體與神經(jīng)系統(tǒng)的關系復雜,通過在神經(jīng)元間的轉移,參與多種神經(jīng)疾病的發(fā)生和病理機制的形成。鄭州細胞外泌體哪家好

外泌體與生物體的免疫應答密切相關,通過它們攜帶的抗原和免疫調節(jié)分子對免疫系統(tǒng)起到調節(jié)作用。重慶外泌體芯片檢測

差速離心法分離外泌體的實驗原理:離心管內粒子的速度,由三種力(離心力、阿基米德浮力和斯托克斯粘性阻力)的平衡決定,如:其中geff為離心力(加速度),R為旋轉半徑,即粒子距旋轉軸的距離,ω為旋轉角頻率,d為粒子直徑,ρ為質量粒子的密度和ρsolv和η分別是介質的密度和粘度。在固定的離心條件(轉速和介質成分)下,粒子速度完全由粒子的形態(tài)和密度決定。密度高于介質密度的粒子沿離心力“向下”運動,而比介質輕的粒子沿與離心力相反的方向“上浮”。對于相似的密度,較大的粒子遷移得更快。因此,在生物學中,離心主要用于按大?。ú钏俸退俾蕝^(qū)帶離心)或按密度(等密度離心)分離不同的物體。在這項研究中,我們專注于使用差速離心按大小進行顆粒分級。重慶外泌體芯片檢測

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