外泌體蛋白質(zhì)特征是:膜結(jié)合四跨膜蛋白（CD9、CD63、CD81和CD82），以及常規(guī)用于分離的EpCAM和Rab5。其他公認的蛋白質(zhì)是受體（CD46和CD55）、熱休克蛋白（HSP；Hsc70、Hsp70和Hsp90）、參與外泌體形成的蛋白質(zhì)（Alix、TSG101）和負責(zé)融合和轉(zhuǎn)運的膜蛋白（GTP酶、膜聯(lián)蛋白和flotillin；ATP7A、ATP7B、MRP2、SLC1A4、SLC16A1和CLIC1)等。使用ELISA法檢測這些標(biāo)記蛋白可以用于確認外泌體的存在。也有相關(guān)研究稱外泌體含有其他顆粒，如膽固醇（B淋巴細胞來源）、鞘脂、磷酸甘油酯和神經(jīng)酰胺等。外泌體還運輸形態(tài)發(fā)生素（Hedgehog、Wingless和Wingless-like），參與黑腹果蠅所描述的組織模式發(fā)育。外泌體富集、分離和檢測是當(dāng)前外泌體研究的熱點之一。徐州外泌體分離多少錢

外泌體衍生物miRNA的重要應(yīng)用：外泌體保護miRNA免于降解，使它們比游離miRNA更穩(wěn)定，并能被特定受體細胞有效整合。因此，在外泌體攜帶的貨物中，miRNA可以提供有關(guān)它們來源的細胞類型、靶標(biāo)和細胞狀態(tài)的身份信息。越來越多的證據(jù)表明，疙瘩細胞來源的外泌體已成為通過傳遞病miRNA促進疙瘩細胞增殖、侵襲、血管生成、遠處轉(zhuǎn)移和疙瘩微環(huán)境重塑的主要候選者。血管生成對于惡性疙瘩的生長和轉(zhuǎn)移至關(guān)重要，因為新血管可以提供額外的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)，還可以清理廢物。比如：病細胞釋放外泌體exo-miR-21、exo-miR-23；外-miR-29；exo-miR-103和exo-miR-210可以促進增殖、血管生成和疙瘩轉(zhuǎn)移。徐州外泌體分離多少錢外泌體受到多種因素的調(diào)控，例如細胞膜電位、氧化應(yīng)激和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑等。

外泌體分離方法之過濾法：超濾膜也可用于外泌體的分離。根據(jù)微泡的大小，使用超濾膜過濾的方法可以將外泌體與蛋白質(zhì)和其他大分子分離。外泌體也可以通過多孔結(jié)構(gòu)捕獲它們來分離。常見的過濾膜孔徑為0.8m、0.45m或0.22m，可用于收集大于800nm、400nm或200nm的外泌體。比如微柱多孔硅纖毛結(jié)構(gòu)一般用于分離40-100nm外泌體。在初始步驟中，去除較大的囊泡。在接下來的步驟中，外泌體會群集中在過濾膜上。隔離步驟相對較短，但該方法需要用PBS緩沖液對硅結(jié)構(gòu)進行預(yù)孵育。除標(biāo)準(zhǔn)過濾技術(shù)外，切向流過濾在有效分離外泌體方面也有著嘗試應(yīng)用，通過切向流過濾技術(shù)去除游離肽和其他小化合物從而分離具有確定大小的外泌體。此外，在體外研究和脂肪組織中，也會采用超濾與SEC的結(jié)合的方式來分離外泌體。通過(a)對片上過濾器施加壓力或(b)產(chǎn)生電場，迫使外泌體穿過多孔膜，結(jié)合錯流和電泳分選來完成篩分。

通過對外泌體以及外泌體提取相關(guān)生物試劑的研究發(fā)現(xiàn)：外泌體除了蛋白質(zhì)，外泌體還含有RNA。外泌體miRNA可用于各種疙瘩的判斷。目前有八種miRNA被確定為卵巢病的標(biāo)志物。此外，據(jù)報道，肺腺病者的血清和疙瘩樣本中的miRNA會增加。前列腺病的血清中外泌體miRNAmiR-141和miR-375水平會升高。研究表明，外泌體miRNA-21的血清水平升高和miRNA-1246在ESCC群體中凸現(xiàn)。有趣的是，外泌體miRNA可能是腎纖維化和心血管癥的潛在判斷標(biāo)志物。對于進行型退行型疾病，在阿爾茨海默者的生物體液中發(fā)現(xiàn)了幾種miRNA，如：miR-9、miR-107、miRNA-128、miRNA134和miRNA-137miRNA124的高表達水平。外泌體的分離純化有助于其后續(xù)研究，例如外泌體功能的解析等。

外泌體分離方法之尺寸排阻層析法：尺寸排阻層析法也被稱為凝膠過濾層析法，這種方法是基于凝膠孔的大小和外泌體的大小，大于凝膠孔徑的顆粒被洗脫；反之，小于凝膠孔徑的顆粒將被抑制。凝膠過濾層析分離法總體上能獲得較高的純度和產(chǎn)量。建議與超濾相結(jié)合，這種方法可提供更少的蛋白質(zhì)污染和更高的外泌體回收率。凝膠過濾層析分離法的缺點是凝膠的成本過高。外泌體分離方法之聲學(xué)流體分離：聲學(xué)流體分離技術(shù)利用聲場根據(jù)粒子的大小、密度和可壓縮性來分離粒子。生物樣品在此過程中不會受到損壞，并且分離的本身是非接觸式、高效的和無標(biāo)記的。外泌體可通過細胞間物質(zhì)轉(zhuǎn)移影響細胞的增殖、分化和生物學(xué)行為。血液DNA外泌體報價表

外泌體在人體的主要作用是充當(dāng)局部和全身信號和調(diào)節(jié)系統(tǒng)。徐州外泌體分離多少錢

外泌體的表征方法之非光學(xué)方法：非光學(xué)方法主要包括掃描電子顯微鏡（SEM）、透射電子顯微鏡（TEM）、冷凍電子顯微鏡（Cryo-EM）、原子力顯微鏡（AFM）、免疫檢測方法（ELISA）、傅立葉變換紅外光譜（FTIR）、可調(diào)諧電阻脈沖傳感(TRPS)和單粒子干涉反射成像傳感器(SP-IRIS)。SEM、TEM和AFM方法通常用于直接膜結(jié)構(gòu)和形態(tài)測定，而ELISA檢測提供各種結(jié)構(gòu)顆粒（主要是蛋白質(zhì)和受體）的檢測和量化，例如，用于外泌體形態(tài)的確認。單粒子干涉反射成像傳感器(SP-IRIS)也用于外泌體定量，但也可用于檢測特定標(biāo)記物和確定外泌體亞群。徐州外泌體分離多少錢

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