外泌體蛋白質(zhì)特征是:膜結(jié)合四跨膜蛋白(CD9、CD63、CD81和CD82),以及常規(guī)用于分離的EpCAM和Rab5。其他公認(rèn)的蛋白質(zhì)是受體(CD46和CD55)、熱休克蛋白(HSP;Hsc70、Hsp70和Hsp90)、參與外泌體形成的蛋白質(zhì)(Alix、TSG101)和負(fù)責(zé)融合和轉(zhuǎn)運(yùn)的膜蛋白(GTP酶、膜聯(lián)蛋白和flotillin;ATP7A、ATP7B、MRP2、SLC1A4、SLC16A1和CLIC1)等。使用ELISA法檢測(cè)這些標(biāo)記蛋白可以用于確認(rèn)外泌體的存在。也有相關(guān)研究稱外泌體含有其他顆粒,如膽固醇(B淋巴細(xì)胞來源)、鞘脂、磷酸甘油酯和神經(jīng)酰胺等。外泌體還運(yùn)輸形態(tài)發(fā)生素(Hedgehog、Wingless和Wingless-like),參與黑腹果蠅所描述的組織模式發(fā)育。外泌體在人體的主要作用是充當(dāng)局部和全身信號(hào)和調(diào)節(jié)系統(tǒng)。杭州血液RNA外泌體報(bào)價(jià)表
通過對(duì)外泌體以及外泌體提取相關(guān)生物試劑的研究發(fā)現(xiàn):外泌體除了蛋白質(zhì),外泌體還含有RNA。外泌體miRNA可用于各種疙瘩的判斷。目前有八種miRNA被確定為卵巢病的標(biāo)志物。此外,據(jù)報(bào)道,肺腺病者的血清和疙瘩樣本中的miRNA會(huì)增加。前列腺病的血清中外泌體miRNAmiR-141和miR-375水平會(huì)升高。研究表明,外泌體miRNA-21的血清水平升高和miRNA-1246在ESCC群體中凸現(xiàn)。有趣的是,外泌體miRNA可能是腎纖維化和心血管癥的潛在判斷標(biāo)志物。對(duì)于進(jìn)行型退行型疾病,在阿爾茨海默者的生物體液中發(fā)現(xiàn)了幾種miRNA,如:miR-9、miR-107、miRNA-128、miRNA134和miRNA-137miRNA124的高表達(dá)水平。佛山細(xì)胞外泌體報(bào)價(jià)表的外泌體分離技術(shù)采用了磁珠分離和濾膜分離的方法。
外泌體通常被認(rèn)為是細(xì)胞間信號(hào)分子,包含許多蛋白質(zhì)、核酸、細(xì)胞因子、轉(zhuǎn)錄因子和其他細(xì)胞來源的顆粒。外泌體不只可以向局部環(huán)境傳遞信息,還可以向距離很遠(yuǎn)的細(xì)胞和組織傳遞信息。這可能作為一般信號(hào)和通信通路,但也可能參與致病基因擴(kuò)散和惡性疙瘩進(jìn)一步惡化。迄今為止,已證實(shí)外泌體存在于體液中,例如羊水、血清、母乳、附睪液、唾液、尿液、腹水和胸腔積液、支氣管肺泡灌洗液、滑液和體外細(xì)胞培養(yǎng)上清液中。細(xì)胞排出的外泌體也可作為去除不必要的蛋白質(zhì)和核酸的一種方式,例如,在細(xì)胞成熟(網(wǎng)織紅細(xì)胞)或排泄系統(tǒng)(腎的內(nèi)臟和小管)期間的外泌體。
外泌體的提取主要包括以下幾種方式。一是免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,特異性高、操作簡(jiǎn)單、不需要昂貴的儀器設(shè)備,但是非中性pH和非生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性,不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。二是PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結(jié)合,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態(tài)完整,純度較高。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,外泌體可用于細(xì)胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。2016.9《ScientificReports》雜志發(fā)表了該方法較新數(shù)據(jù),表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體。外泌體分離器材的選擇也對(duì)分離結(jié)果有一定的影響。
外泌體分離方法之篩分分離法:該技術(shù)是通過膜從生物液體中篩分外泌體并通過壓力或電泳進(jìn)行過濾來分離外泌體。篩分分離法的分離時(shí)間較短,但分離的外泌體純度卻處于較高的水平。篩分分離法的缺點(diǎn)在于分離的外泌體回收率較低??傊?xì)胞外泌體提取、外泌體分離在疙瘩等研究領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。細(xì)胞外泌體分離方法目前多數(shù)還是采用高速離心機(jī)進(jìn)行離心分離的技術(shù)方法,然而,其他幾種分離技術(shù),如過濾法、免疫分離法和篩分法,雖然也能進(jìn)行外泌體分離,但每種方法都有其局限性,多數(shù)還是只應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室、科學(xué)研究等領(lǐng)域。外泌體分離是外泌體研究中的重要步驟。煙臺(tái)血液外泌體
手動(dòng)超高速離心和自動(dòng)化離心儀器的分離效果可能存在差異。杭州血液RNA外泌體報(bào)價(jià)表
外泌體分離方法之沉淀分離方法::基于聚合物的沉淀分離方法是利用超親水聚合物來增強(qiáng)小尺寸顆粒(如外泌體)的沉淀。聚乙二醇的常用濃度在8%到15%之間變化。使用這種方法,將含有外泌體的溶液與聚合物一起孵育過夜,并在約10,000×g下進(jìn)一步離心。外泌體分離方法之FFF分離法:FFF目前是一種很少使用但前景不錯(cuò)的一種外泌體分離方法。分離由橫流力驅(qū)動(dòng),并基于顆粒的分子量或流體動(dòng)力學(xué)直徑。它包括高純度、高效率和短時(shí)間處理,但迄今為止,F(xiàn)FF在外泌體分離中的使用案例較少,還有待進(jìn)一步開發(fā)。杭州血液RNA外泌體報(bào)價(jià)表
蘇州英澤生物醫(yī)藥科技有限公司是以提供RNA\DNA試劑盒,外泌體提取試劑盒,逆轉(zhuǎn)錄試劑盒,熒光定量PCR為主的有限責(zé)任公司(自然),英澤生物是我國醫(yī)藥健康技術(shù)的研究和標(biāo)準(zhǔn)制定的重要參與者和貢獻(xiàn)者。公司承擔(dān)并建設(shè)完成醫(yī)藥健康多項(xiàng)重點(diǎn)項(xiàng)目,取得了明顯的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。英澤生物將以精良的技術(shù)、優(yōu)異的產(chǎn)品性能和完善的售后服務(wù),滿足國內(nèi)外廣大客戶的需求。