外泌體的構(gòu)成：除了RAB蛋白，外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白（包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)乃目缒さ鞍准易澹–D63,CD81和CD9）、熱休克蛋白家族（(HSP60,HSP70,HSPA5,CCT2和HSP90以及一些細胞特異性的蛋白包括A33（結(jié)腸上皮細胞來源）、MHC-Ⅱ(抗原提呈細胞來源)、CD86(抗原提呈細胞來源)以及乳凝集素（不成熟的樹突狀細胞）。其它一些外泌體中的蛋白包括多種的代謝類的酶（烯醇化酶1,醛縮酶1,PKM2,PGK1,PDIA3,GSTP1,DPP4,AHCY,TPL1,抗氧化蛋白,P4HB,LDH,親環(huán)素A,FASN,MDH1和CNP）、核糖體蛋白（RPS3）、信號轉(zhuǎn)導因子（黑色素瘤分化相關因子,ARF1,CDC42,人類紅細胞膜整合蛋白,SLC9A3R1）、粘附因子（MFGE8、整合素）、細胞骨架蛋白以及泛素等。外泌體在很多生理和病理情況下都發(fā)揮著不可或缺的作用。泉州血漿外泌體分離供貨商

分離外泌體的方法之降水：它是一種基于生物體液中外泌體的電荷沉淀的方法。帶負電荷的外泌體可以與PEG35,000Da基質(zhì)中帶正電荷的魚精蛋白相互作用并形成沉淀。外泌體的回收和重懸比基于超速離心的分離更有效。聚合物沉淀法以更少的勞動力和昂貴的設備分離尿外泌體的潛在益處。該方法首先利用DL-二硫蘇糖醇溶液還原或去除Tamm-Horsfall蛋白的聚合網(wǎng)絡，然后在25°C和30min下只用10,000×g的向心力即可實現(xiàn)外泌體的沉淀。還有利用聚合物沉淀方法并消除超速離心的商業(yè)試劑盒。ExoQuick?、Exo-spin?是來自Invitrogen?和miRCURY?的市售總外泌體分離試劑。廣州血漿外泌體分離穩(wěn)定性好外泌體與肺的關系密切，通過氣道和肺泡微環(huán)境的打開和修飾，參與肺疾病如肺結(jié)核、肺病等的發(fā)生和發(fā)展。

對于外泌體的標記和鑒定，獲得外泌體之后，如何對其進行鑒定又是一個困擾研究者的問題。國際細胞外囊泡學會(ISEV)在2014年提議，對于分離獲得的外泌體需要從三個層面進行鑒定：WB檢測外泌體標志蛋白表達情況：外泌體膜上富含參與外泌體運輸?shù)目缒さ鞍准易?CD63/CD81/CD9)、熱休克蛋白家族(HSP60/HSP70/HSPA5/CCT2/HSP90)和一些細胞特異性蛋白。其中CD63/TSG101是較常用到的外泌體標志物。TEM鑒定外泌體形態(tài)：電鏡具有較高的分辨率，可以直接觀察到樣品中外泌體的形態(tài)。NTA檢測外泌體粒徑及濃度：TEM可以觀察外泌體的形態(tài)學特征，但無法體現(xiàn)樣本中所有外泌體的粒徑分布情況及整體濃度。NTA(NanoparticleTrackingAnalysis)技術可快速準確地分析外泌體的粒徑分布及濃度，為外泌體鑒定提供有力證據(jù)。

外泌體還參與神經(jīng)退行型癥。在神經(jīng)退行型癥個體的腦脊液和外周血中已檢測到幾種特定于阿爾茨海默氏癥、帕金森氏癥和Creutzfeldt-Jakob的聚集蛋白。特別是，在從阿爾茨海默者的腦脊液樣本中獲得的外泌體中檢測到Thr-181磷酸化的tau。在Thr-181磷酸化的Tau是阿爾茨海默的既定生物標志物。此外，α-突觸核的蛋白也常在阿爾茨海默者的群體中檢出。此外，在尿液中發(fā)現(xiàn)的外泌體標志物也可以是膀胱和前列腺疙瘩的標志物。比如：視黃酸誘導蛋白3(GPRC5A)、抵抗素、外泌體蛋白PCA-3、TMPRSS2:ERG、α1-抗胰蛋白酶、組蛋白H2B1等。除了腦和泌尿道疙瘩外，外泌體蛋白也可以是胰腺病的標志物。比如：結(jié)直腸病的外泌體蛋白標志物包括EpCAM、cadherin-17、粘蛋白13(MUC-13)、角蛋白18、claudins和ephrinB1。外泌體不是干細胞，是干細胞較精華的部分。

外泌體分離方法之尺寸排阻色譜分離法：尺寸排阻色譜(SEC)用于根據(jù)尺寸而非分子量分離大分子。該技術應用了一種填充有多孔聚合物珠子的柱子，該珠子含有多個孔和隧道。分子根據(jù)它們的直徑穿過珠子。小半徑分子通過色譜柱的孔遷移需要更長的時間，而大分子從色譜柱中洗脫得較早。尺寸排阻色譜可以精確分離大分子和小分子。此外，該方法可以應用不同的洗脫溶液。與離心機離心方法相比，色譜分離具有較多的優(yōu)勢，因為通過色譜分離的外泌體不受剪切力的影響，避免了因剪切力所造成的囊泡結(jié)構(gòu)改變。目前，SEC是一種普遍接受的分離血液和尿液中存在的外泌體的技術。此外，SEC方法與超濾相結(jié)合已用于分離和分析尿源性外泌體。此外，流場-流分餾結(jié)合紫外分析儀和光散射檢測器已被應用于分析外泌體的大小和純度。流場-流分餾結(jié)合拋物線和交叉流來分離外泌體。獲得的外泌體已通過電子顯微鏡和質(zhì)譜檢測。外泌體分離是外泌體研究中的重要步驟。東莞外泌體分離供貨商

外泌體與細胞死亡形式相關，可以參與凋亡和壞死細胞的清理和處理過程。泉州血漿外泌體分離供貨商

外泌體（細胞外囊泡）目前被認為是通過生物活性脂質(zhì)、蛋白質(zhì)以及RNA來進行細胞之間的通訊，同樣外泌體也是目前研究較深入的細胞外囊泡，外泌體的直徑只有我們頭發(fā)直徑的百萬分之一（30~150nm），當多泡體與細胞膜融合時釋放到細胞外的時候，富含許多生物活性分子，如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、轉(zhuǎn)移RNA以及微小RNA等就會被外泌體被釋放到細胞外，這樣一來就可以被微環(huán)境中的靶細胞吸收并且通過通過生物體液運送到遠處。而外泌體與“目標”進行交流方式主要有兩種途徑，一是通過胞吞作用被攝入到細胞內(nèi)；二是通過膜融合的方式來與靶細胞膜進行融合，接著就會直接釋放其中含有的物質(zhì)以及信息至靶標細胞，其實外泌體的作用形式是相互的靶細胞分泌含有細胞特異性RNA的外泌體作用于周圍細胞后可誘導其表型重組而獲得組織特異性的表型，而周圍細胞分泌的外泌體則可以通過調(diào)控蛋白表達來調(diào)控細胞的生理過程。泉州血漿外泌體分離供貨商

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