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合肥血液外泌體分離生產(chǎn)商

來源: 發(fā)布時間:2023-04-16

外泌體分離方法之基于聚合物的沉淀法:基于聚合物的沉淀技術(shù)通常包括將生物流體與含聚合物的沉淀溶液混合、4℃孵育和低速離心。用于基于聚合物的沉淀的較常見聚合物之一是聚乙二醇(PEG)。這種聚合物的沉淀可以對分離的外泌體產(chǎn)生溫和影響而且可以產(chǎn)生中性的pH值。由此,出現(xiàn)了幾種常見的外泌體試劑盒:比如:SystemBiosciences,MountainView,CA,ExoQuick等。研究表明,使用ExoQuick方法可以快速執(zhí)行,無需額外設(shè)備,只需用高速離心機進行超速離心可以獲得高產(chǎn)量的外泌體。但是此方法的缺點是:非外泌體材料對外泌體分離物的污染仍然是基于聚合物的分離方法的一個問題。此外,分離物中的聚合物可能會干擾下游分析。外泌體的組成成分包括脂肪、糖、蛋白質(zhì)等,對其組成成分的分析有助于了解其生物學(xué)功能和生理調(diào)節(jié)作用。合肥血液外泌體分離生產(chǎn)商

外泌體分離方法之免疫學(xué)分離方法:免疫學(xué)分離法是利用受位于外泌體膜中的選定蛋白質(zhì)標(biāo)記物影響的抗體對外泌體進行標(biāo)記。這些標(biāo)記的外泌體可以進一步輕松處理和純化,例如,使用微芯片或磁珠。磁分離后,外泌體被純化,磁珠被溶解和去除。通過這種簡單快速的方法,就可以獲得較高純度提取物,但不會分離出缺乏磁性標(biāo)記抗體識別的表面標(biāo)記的外泌體,這可能導(dǎo)致外泌體池表現(xiàn)效果不佳。這種方法雖然既省時又直接,輸出純度較高,但也需要較為昂貴的試劑。寧波快速提取外泌體企業(yè)外泌體不是干細胞,是干細胞較精華的部分。

分離外泌體的方法之過濾:過濾方法只取決于分子量或組分的大小,并有助于獲得較佳的外泌體產(chǎn)量。超濾、凝膠過濾和靜水透析包含在外泌體分離的過濾原理下。外泌體可以根據(jù)其定義的分子量或體積排阻限,使用標(biāo)準(zhǔn)膜過濾器從其他EV組分和細胞碎片中分離出來。市售的聚偏二乙烯碳酸酯膜過濾器具有各種孔徑范圍,用于滲透、納濾和微濾應(yīng)用。分離外泌體的方法之體積排阻色譜(SEC):該方法主要有助于從分離的外泌體中去除蛋白質(zhì)和脂蛋白雜質(zhì),它已被用于從尿液和血漿蛋白中分離外泌體。它被用作超速離心和超濾的后續(xù)分離方法。瓊脂糖2B/CL4B、qEV和瓊脂丙烯酸S-400是通常用于凝膠過濾色譜分離外泌體的色譜柱。SEC可以在低壓下進行,這有助于分離具有完整完整性的外泌體。

外泌體的表征方法之光學(xué)方法:目前,光學(xué)方法是外泌體表征的主要方法,即動態(tài)光散射(DLS)、多角度光散射(MALS)和納米粒子跟蹤分析(NTA)。這些方法允許對尺寸(DLS0.5–200nm;MALS10–500nm;NTA10–1000nm)、尺寸分布和濃度進行高分辨率測量。DLS和MALS的結(jié)合增加了測量范圍(0.5–500nm)和精度。光學(xué)方法比較受歡迎的,但缺點是靈敏度低、試劑消耗高以及需要昂貴的設(shè)備。在使用納米粒子跟蹤分析NTA方法過程中,熒光染料的加入也提高了分辨率,并允許通過使用熒光標(biāo)記來表征表面免疫表型。從而確定標(biāo)記物存在。外泌體分離方法的優(yōu)化需要對比不同方法的純度和收率。

分離外泌體的方法之微流控分離:基于微流體的外泌體分離可以包括用于外泌體捕獲的免疫親和方法,納米多孔膜篩分方法或微柱上的納米線用于外泌體捕獲。所有三個系統(tǒng)都需要具有粘彈性分析和電操作的芯片才能進行外泌體分離過程。外泌體的特異性很高,采用基于微流控芯片的免疫親和捕獲方法。尺寸范圍在40-100nm之間的外泌體被這種微流體芯片特異性地捕獲,在外泌體分離和定量方面的益處。篩分方法可用于通過壓力或通過電泳從全血中過濾外泌體,壓力的利用使分離時間更短,電場導(dǎo)致高外泌體純度。特異性、可重復(fù)性、低分離時間和更低的分離成本是基于微流體的外泌體分離的一些優(yōu)點。蛋白質(zhì)分離方法可以用于外泌體的分離和純化。杭州血液RNA外泌體穩(wěn)定性好

外泌體的分析需要根據(jù)不同來源的細胞選擇適宜的分離方法。合肥血液外泌體分離生產(chǎn)商

分離外泌體的方法之免疫親和相互作用:免疫親和法是利用外泌體表面蛋白(抗原)與其靶抗體或分離配體分子之間的免疫親和相互作用原理分離純外泌體的理想方法。它有助于根據(jù)其表面標(biāo)志物分離特定類型的外泌體?;谖⒖装宓拿嘎?lián)免疫吸附測定(ELISA)是免疫親和分離試劑盒的一個例子,用于根據(jù)外泌體表面標(biāo)志物分離外泌體。Tetraspanin蛋白是這種分離方法的決定因素??笴D9、抗CD63和抗CD81是免疫親和外泌體分離中使用的抗體的常見示例。免疫親和法可用于從結(jié)腸病細胞中分離外泌體,其效率高于超速離心和密度梯度分離。另外還有一種外泌體分離方法,該方法采用抗體包被的基于磁性顆粒的技術(shù)來分離外泌體。合肥血液外泌體分離生產(chǎn)商

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