MOPS電泳緩沖液(10×, RNase free):高效、穩(wěn)定的RNA電泳解決方案在分子生物學實驗中,RNA電泳是分析RNA完整性、大小和純度的關鍵技術。然而,RNA的穩(wěn)定性較差,容易被RNase降解,因此RNA電泳中使用無RNase污染的緩沖液至關重要。MOPS電泳緩沖液(10×, RNase free)憑借其高效的緩沖能力和無RNase污染的特點,成為RNA電泳的理想選擇。產品特點與優(yōu)勢MOPS電泳緩沖液(10×, RNase free)是一種高濃度、無RNase污染的緩沖液,主要成分包括MOPS(3-嗎啉丙磺酸)、乙酸鈉和EDTA。這種配方能夠在電泳過程中提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,確保RNA的完整性。無RNase污染:經過特殊處理,確保無RNase污染,能夠有效保護RNA樣品免受降解。高效緩沖能力:MOPS緩沖液的pH值接近中性(pH 7.0-7.5),能夠在電泳過程中維持穩(wěn)定的pH環(huán)境,避免RNA降解。高分辨率:MOPS緩沖液具有較低的粘度和較高的緩沖能力,能夠有效提高電泳分辨率,確保RNA條帶清晰。濃縮設計:10×的高濃度設計使得該緩沖液在使用時可以根據實驗需求靈活稀釋,減少浪費,降低實驗成本。使用方法使用MOPS電泳緩沖液(10×, RNase free)時,需按照以下步驟操作:配制1×工作液:根據實驗需求,取適量的10×MOPS緩沖液,加入去離子水稀釋至1×工作液。Pfu Master Mix (2x)(With Dye)在定量PCR中的兼容性 預混染料可直接用于實時熒光定量PCR,無需額外添加染料。上海類人源膠原蛋白技術服務技術服務
HPV病毒樣顆粒(Virus-LikeParticles,VLPs)表達服務技術是用于生產疫苗的關鍵技術,它涉及到利用生物技術手段在宿主細胞中表達HPV的主要衣殼蛋白L1,這些蛋白能夠自組裝成具有病毒樣顆粒結構的VLPs,從而用于疫苗制備。以下是畢赤酵母表達系統(tǒng)在表達HPVVLPs時的一些優(yōu)化策略:1.分子水平策略:通過分子水平的策略,如優(yōu)化密碼子使用,提高基因在畢赤酵母中的表達效率和蛋白質構象的正確性。2.信號肽篩選:選擇合適的信號肽以提高重組蛋白分泌到培養(yǎng)基中的效率,從而增加VLPs的產量。3.敲除蛋白酶基因:通過基因編輯技術敲除畢赤酵母中的蛋白酶基因,減少外源蛋白被降解的風險。4.共表達促折疊因子:共表達分子伴侶或促折疊因子,幫助正確折疊和組裝VLPs,提高其穩(wěn)定性和免疫原性。5.多拷貝數外源基因:使用多拷貝質?;蚧蛘霞夹g,提高外源基因的拷貝數,增加蛋白表達量。6.發(fā)酵條件優(yōu)化:通過優(yōu)化發(fā)酵條件,如溫度、pH、碳源等,提高VLPs的表達量和質量。7.基因編輯技術:利用CRISPR/Cas9等基因編輯技術對畢赤酵母進行遺傳改造,提高外源蛋白的表達。吉林人膠原蛋白技術服務研發(fā)Cre重組酶可以通過化學誘導劑(如他莫昔芬)進行調控,實現基因表達的開關控制。
DNA Marker II:高效、精細的DNA分子量標準DNA Marker II 是一種廣應用于瓊脂糖凝膠電泳的即用型DNA分子量標準,用于快速估算DNA片段的大小。它由多條線狀雙鏈DNA片段組成,能夠為DNA分析提供清晰、準確的分子量參考。產品特點組成:DNA Marker II 通常包含6-8條不同長度的DNA片段,覆蓋從100 bp到2000 bp的范圍。具體片段長度可能因品牌而異,但常見的片段包括100 bp、200 bp、500 bp、1000 bp和2000 bp。即用型設計:預混了1×Loading Buffer,無需額外添加,直接上樣,節(jié)省時間和操作步驟。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,條帶亮度均勻,便于在紫外燈下觀察。穩(wěn)定性高:在室溫下可穩(wěn)定保存6個月,長期保存建議置于-20℃,避免反復凍融。使用方法上樣量:建議每次取5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。如果加樣孔較寬,可適當增加上樣量。電泳條件:推薦使用1.0%-2.0%的瓊脂糖凝膠,1×TAE或0.5×TBE緩沖液,電壓5-10 V/cm。染色與觀察:電泳結束后,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,紫外燈下觀察。注意事項保存條件:建議低溫保存,避免反復凍融,以防止核酸酶污染導致條帶降解。瓊脂糖質量:電泳時應盡量選用高質量的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果。
λ DNA HindIII + EcoRI:精細的DNA分子量標準λ DNA HindIII + EcoRI 是一種廣應用于瓊脂糖凝膠電泳的DNA分子量標準,由λ噬菌體DNA經HindIII和EcoRI兩種限制性酶完全酶切后制備而成。這種酶切產物包含多條不同長度的DNA片段,能夠為DNA片段的大小分析提供精確的參考。產品特點片段組成:λ DNA HindIII + EcoRI Marker 包含12-13條雙鏈DNA片段,片段大小范圍從125 bp到21,226 bp。這些片段覆蓋了從小片段到大片段的廣范圍,適用于多種DNA分析場景。即用型設計:產品已預混1×Loading Buffer,可直接上樣,無需額外處理。穩(wěn)定性高:在-20℃下可長期保存,室溫下也能穩(wěn)定保存6個月。使用方法預熱處理:為獲得清晰的電泳圖像,建議在65℃加熱5分鐘,然后立即冰浴3分鐘。上樣量:根據加樣孔的大小,取2-5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。電泳條件:推薦使用1.0%的瓊脂糖凝膠,電泳電壓4-10 V/cm,電泳時間45分鐘。染色與觀察:電泳結束后,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,紫外燈下觀察。注意事項預熱的重要性:如果不進行預熱處理,21,226 bp和3,530 bp的片段可能會結合形成24,756 bp的額外條帶,同時3,530 bp的亮度會明顯減弱DL1000 DNA Marker能夠為研究人員提供準確的分子量參考,幫助快速估算目標DNA片段的大小。
這一過程首先需要構建一個包含大量酶基因變體的文庫??蒲腥藛T利用先進的分子生物學技術,如易錯PCR、DNA改組等,在酶基因中引入隨機突變,從而產生眾多具有不同序列和結構的酶變體。這些變體就如同一個龐大的酶“種群”,蘊含著各種潛在的性能改進可能性。接下來,通過高效的篩選方法,從這個酶“種群”中挑選出具有期望特性的酶變體。篩選過程可以基于酶的活性、穩(wěn)定性、底物特異性等多種指標進行設計。例如,在工業(yè)生產中,可能需要篩選出在高溫、高壓等極端條件下仍能保持高活性的酶變體;它是一種常用的電泳緩沖液,廣泛應用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于分離和分析DNA片段。北京酶定向進化技術服務開發(fā)
50×TAE粉劑憑借其高效、經濟和穩(wěn)定的特點,成為分子生物學實驗中理想的緩沖液選擇。上海類人源膠原蛋白技術服務技術服務
漢遜酵母表達系統(tǒng)是一種新型的酵母菌表達平臺,它具有高密度培養(yǎng)和高效表達外源蛋白的能力。在臨床前研究中,漢遜酵母被用于表達瘤病毒(HPV)病毒樣顆粒(VLPs),這為開發(fā)HPV疫苗提供了一種有希望的策略。HPVB19是一種高度傳染性的病毒,對免疫功能低下者和胎兒可能造成嚴重后果。目前,尚無針對HPVB19的批準疫苗或抗病毒藥物,因此開發(fā)有效的疫苗顯得尤為重要。漢遜酵母表達的VLPs,特別是VP1與VP2共組裝的VLP(VP1/VP2VLP),可能成為HPVB19疫苗開發(fā)的候選免疫原。在一項研究中,漢遜酵母成功表達了HPV68bL1蛋白,并形成了VLPs。這些VLPs在小鼠模型中顯示出良好的免疫原性,能夠誘導產生較高滴度的中和抗體,并且對HPV68a型也表現出一定的交叉保護作用。這表明漢遜酵母表達的HPV68bVLPs可能作為多價HPV疫苗的組分,用于疫苗生產。漢遜酵母表達系統(tǒng)還提供了一整套從表達載體構建到產業(yè)化發(fā)酵和蛋白純化的通用技術平臺,適合不同規(guī)模的企業(yè)使用。在HPV68bL1蛋白的VLPs研究中,通過高密度發(fā)酵和系列純化步驟,獲得了純度超過95%的VLPs,這些VLPs在形態(tài)上與天然病毒顆粒相似,并通過假病毒體外中和試驗證明了其免疫學效果。上海類人源膠原蛋白技術服務技術服務