DL2000 DNA Marker:分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的精細(xì)標(biāo)尺在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,DNA Marker是分析DNA片段大小的重要工具,而DL2000 DNA Marker憑借其精細(xì)的分子量范圍和清晰的條帶,成為了實(shí)驗(yàn)室中不可或缺的實(shí)驗(yàn)助手。DL2000 DNA Marker是一種即用型的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),通常用于瓊脂糖凝膠電泳。它包含6條不同長(zhǎng)度的線狀雙鏈DNA片段,覆蓋從100 bp到2000 bp的范圍,具體條帶包括100 bp、200 bp、500 bp、1000 bp、1500 bp和2000 bp。其中,500 bp和1500 bp的條帶亮度較高,便于快速定位和參考。這種設(shè)計(jì)使得DL2000在電泳過程中能夠清晰地顯示目標(biāo)DNA片段的大小,幫助研究人員快速判斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果。DL2000 DNA Marker的使用非常便捷。它已經(jīng)預(yù)混了Loading Buffer,可以直接取5-10 μL用于電泳,無需額外處理。這種即用型設(shè)計(jì)節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間,提高了實(shí)驗(yàn)效率。此外,DL2000的保存條件也非常靈活,可在-20℃長(zhǎng)期保存,融化后可在4℃保存,避免反復(fù)凍融即可。在實(shí)驗(yàn)中,DL2000 DNA Marker的條帶清晰、亮度均勻,即使在低濃度的瓊脂糖凝膠中也能保持良好的分離效果。它適用于1%-3%的瓊脂糖凝膠濃度,能夠滿足大多數(shù)常規(guī)實(shí)驗(yàn)的需求。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)已成為不可或缺的工具,用于基因擴(kuò)增、基因克隆以及基因表達(dá)分析等多個(gè)領(lǐng)域。漢遜酵母表達(dá)HPV VLP技術(shù)服務(wù)研發(fā)
DNA Marker IV:精細(xì)的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)DNA Marker IV 是一種即用型的DNA分子量標(biāo)準(zhǔn),廣應(yīng)用于瓊脂糖凝膠電泳中,用于估算DNA片段的大小和進(jìn)行粗略定量。它由多條線狀雙鏈DNA片段組成,能夠?yàn)镈NA分析提供精確的分子量參考。產(chǎn)品特點(diǎn)組成:DNA Marker IV 由6-7條線狀雙鏈DNA片段組成,具體片段大小包括200 bp、500 bp、1000 bp、1500 bp、2000 bp、3000 bp、4500 bp和7000 bp。即用型設(shè)計(jì):已預(yù)混1×Loading Buffer,使用時(shí)無需額外添加,直接上樣。清晰的條帶:電泳圖像清晰,背景干凈,條帶亮度均勻。穩(wěn)定性高:在室溫下可穩(wěn)定保存六個(gè)月,長(zhǎng)期保存建議置于-20℃。使用方法上樣量:建議每次取2-5 μL直接加入瓊脂糖凝膠的加樣孔中。如果加樣孔較寬,可適當(dāng)增加上樣量。電泳條件:推薦使用1.0%-1.5%的瓊脂糖凝膠,1×TAE或0.5-1×TBE緩沖液,電壓4-10 V/cm,電泳時(shí)間20-40分鐘。染色與觀察:電泳結(jié)束后,使用溴化乙錠(EB)或其他DNA染料染色,紫外燈下觀察。注意事項(xiàng)保存條件:建議低溫保存,避免反復(fù)凍融。瓊脂糖質(zhì)量:電泳時(shí)應(yīng)盡量選用質(zhì)量好的瓊脂糖,以獲得比較好分離效果。染料選擇:如果使用Goldview等染料,由于靈敏度較低,建議適當(dāng)增加Marker的上樣量。漢遜酵母表達(dá)HPV VLP技術(shù)服務(wù)研發(fā)50×TAE是一種高濃度的緩沖液,主要成分包括Tris(三羥甲基氨基甲烷)、醋酸鈉和EDTA(乙二胺四乙酸)。
酵母表達(dá)高通量篩選技術(shù)在臨床前研究中發(fā)揮著重要作用,特別是在重組蛋白的篩選和優(yōu)化方面。以下是一些關(guān)鍵點(diǎn):1.提高篩選效率:通過使用流式細(xì)胞儀等高通量篩選設(shè)備,可以快速?gòu)拇罅烤曛泻Y選出表達(dá)重組蛋白的高產(chǎn)菌株。例如,研究人員通過檢測(cè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)轉(zhuǎn)膜蛋白Sec63融合表達(dá)增強(qiáng)型綠色熒光蛋白EGFP的熒光值來代替檢測(cè)重組蛋白的表達(dá)水平和活性,從而實(shí)現(xiàn)高表達(dá)菌株的篩選,這種方法提高了應(yīng)用的便捷性和通用性。2.優(yōu)化重組蛋白表達(dá):在畢赤酵母中,通過融合表達(dá)增強(qiáng)型綠色熒光蛋白EGFP,可以觀察內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的形態(tài)變化,進(jìn)而根據(jù)熒光值的高低篩選出高效表達(dá)重組蛋白的菌株。這種方法不僅適用于工業(yè)酶,也適用于醫(yī)藥相關(guān)蛋白。3.微流控技術(shù)的應(yīng)用:液滴微流控技術(shù)為篩選提供了一個(gè)高通量的平臺(tái)。通過將單細(xì)胞包埋在液滴中進(jìn)行培養(yǎng),然后根據(jù)熒光或其他信號(hào)進(jìn)行分選,可以獲得高表達(dá)特定蛋白的突變株。例如,研究人員利用液滴微流控技術(shù)篩選獲得木聚糖酶表達(dá)和分泌能力提高的突變株,該方法的篩選通量可達(dá)每小時(shí)10萬菌株。
ProbeOne-StepqRT-PCRKit是一種一步法反轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)的預(yù)混液,主要用于RNA的特異性超高靈敏度定量檢測(cè)。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.一步法操作:該試劑盒整合了反轉(zhuǎn)錄和PCR步驟,簡(jiǎn)化了操作流程,減少了操作時(shí)間,并限度地減少了人為誤差和污染風(fēng)險(xiǎn)。2.高靈敏度檢測(cè):能夠檢測(cè)低至10個(gè)拷貝的目標(biāo)序列,適合于低豐度RNA的檢測(cè)。3.多重檢測(cè)能力:可以在單個(gè)反應(yīng)孔中進(jìn)行多重檢測(cè),不同基因?qū)?yīng)不同探針,不同探針對(duì)應(yīng)不同熒光標(biāo)記,進(jìn)行多重?zé)晒舛縋CR檢測(cè)。4.高特異性:通過使用TaqMan探針,該試劑盒提供了高特異性的檢測(cè),可以區(qū)分有單個(gè)核苷酸差異的miRNA。5.熱啟動(dòng)酶:使用的BeyoFast?TaqDNAPolymerase是一種與抗體結(jié)合的熱啟動(dòng)酶,有效避免非特異性擴(kuò)增,提高PCR反應(yīng)的特異性、靈敏度和定量檢測(cè)的準(zhǔn)確性。6.兼容多種熒光定量PCR儀:提供了LowROX和HighROX,兼容于無需ROX和需要LowROX或HighROX作為校正染料的熒光定量PCR儀。DNA Marker I是一種即用型產(chǎn)品,已預(yù)混1×Loading Buffer,可直接取5-10 μL用于電泳,無需額外處理。
確保CHO細(xì)胞株在大規(guī)模生產(chǎn)中的穩(wěn)定性和產(chǎn)量涉及到多個(gè)方面的優(yōu)化和控制策略:1.細(xì)胞株開發(fā):構(gòu)建高表達(dá)的穩(wěn)定細(xì)胞株是生物制藥工藝的關(guān)鍵步驟。通過使用GS篩選系統(tǒng)原理,利用谷氨酰胺合成酶(GS)抑制劑MSX,篩選含有額外GS基因的細(xì)胞,以獲得高表達(dá)的細(xì)胞株。2.宿主細(xì)胞選擇:工業(yè)上主要使用CHO-K1和GS缺陷型細(xì)胞,如CHOK1SV-KO、CHOZN和HD-BIOP3。這些細(xì)胞株的選擇對(duì)后續(xù)的表達(dá)和穩(wěn)定性有重要影響。3.細(xì)胞株篩選:通過轉(zhuǎn)染和Minipools篩選,選取表達(dá)量高的細(xì)胞群體,然后進(jìn)行單克隆化,篩選出比較好的單克隆細(xì)胞株。4.個(gè)性化產(chǎn)量?jī)?yōu)化:根據(jù)細(xì)胞株的生長(zhǎng)特性,優(yōu)化培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件,包括流加表達(dá)工藝和調(diào)糖培養(yǎng)基的使用,以提高產(chǎn)量和調(diào)節(jié)糖型比例。5.質(zhì)量評(píng)估系統(tǒng):建立完善的抗體質(zhì)量評(píng)估系統(tǒng),包括效價(jià)、活性、聚體分析、糖基化分析和效能分析,確保產(chǎn)品質(zhì)量。6.穩(wěn)定性分析:進(jìn)行基因型和表型穩(wěn)定性分析,包括傳代穩(wěn)定性分析,以確保細(xì)胞株在長(zhǎng)期生產(chǎn)中的穩(wěn)定性。7.氨基酸優(yōu)化:優(yōu)化氨基酸的組成和濃度,特別是天冬酰胺、谷氨酰胺和半胱氨酸,以支持細(xì)胞的高密度生長(zhǎng)和產(chǎn)物的高表達(dá)。Taq PCR Master Mix With Dye 是一款專為滿足科研需求而設(shè)計(jì)的即用型預(yù)混液憑借其性能和便捷的使用方式。遼寧人膠原蛋白技術(shù)服務(wù)技術(shù)服務(wù)
GoldenView II的使用方法與EB相似,但具有更高的靈敏度和安全性。漢遜酵母表達(dá)HPV VLP技術(shù)服務(wù)研發(fā)
CRISPR-Cas9技術(shù)在金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)基因組編輯中的應(yīng)用主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:1.基因敲除與功能研究:通過設(shè)計(jì)特定的sgRNA,利用CRISPR-Cas9技術(shù)可以高效地在金黃色葡萄球菌基因組中實(shí)現(xiàn)基因敲除,進(jìn)而研究這些基因的功能。例如,研究者利用CRISPR-Cas9技術(shù)成功構(gòu)建了srtA基因敲除的金黃色葡萄球菌,分析其對(duì)菌株毒力的影響。2.耐藥性研究手段開發(fā):金黃色葡萄球菌,特別是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)和耐萬古霉素金黃色葡萄球菌(VRSA),因其耐藥性帶來了巨大挑戰(zhàn)。CRISPR-Cas9技術(shù)可用于研究耐藥機(jī)制,并開發(fā)新型手段。季泉江教授課題組與韓大力研究員課題組合作,在金黃色葡萄球菌中建立了單堿基編輯技術(shù),有助于加快耐藥機(jī)制研究和藥物靶標(biāo)發(fā)現(xiàn)。3.基因編輯技術(shù)的優(yōu)化:CRISPR-Cas9技術(shù)在金黃色葡萄球菌中的應(yīng)用還包括對(duì)編輯技術(shù)的優(yōu)化。例如,研究者開發(fā)了基于CRISPR/Cas9的單質(zhì)粒系統(tǒng),允許在金黃色葡萄球菌中進(jìn)行快速有效的染色體操作,該系統(tǒng)可以實(shí)現(xiàn)無標(biāo)記、和快速的遺傳操作,加速了金黃色葡萄球菌基因功能的研究。漢遜酵母表達(dá)HPV VLP技術(shù)服務(wù)研發(fā)